市售菌種在白酸湯發酵中應用的研究

◎ 柯旭清，徐兆伯，王 力

（貴州輕工職業技術學院，貴州 貴陽 550025）

白酸湯，又稱米酸湯，是貴州苗族傳統的發酵調味品，其傳統制作方式以米湯為原料，加入老湯在室溫下發酵4～5 d即成。食用時添加蔬菜、調味料煮制，蔬菜和酸湯一起食用，也可直接飲用。白酸湯具有清涼爽口、風味獨特、生津止渴及健脾開胃等特點，其中含有豐富的微生物以及多種營養代謝物質，對維持人類腸道微生態平衡有重要調節作用[1]，能清理腸胃、散寒消腫，具有預防和緩解消化道疾病等保健功能[2]，是苗族人家生活中必不可缺的生活食品。

目前，白酸湯發酵生產采用的老酸湯接種自然發酵方式，其發酵過程中的微生物全部來源于老酸湯中，不同區域、不同廠家生產的產品差異性很大，同一生產車間里不同發酵缸中的產品差異也較大，其原因主要是原料和老酸湯中的菌種差異。有部分研究成果用其從自然發酵酸湯中分離的菌種接種發酵，縮短了發酵時間，并得到較好的產品[3]。但目前的酸湯生產廠家規模較小，缺少專業技術人員，使用這種自己分離的菌種在擴大培養和菌種傳代方面存在技術障礙，同時食品安全性也無法保證[4]。

本研究基于尋找能用于白酸湯發酵的商品化的菌種，擬能形成穩定的發酵產品，又能保證產品的食品安全性，并且對企業技術人員的能力要求相對較低。同時通過商品化菌種的試驗過程對白酸湯的原料配比、發酵控制條件等進行技術優化，跟蹤進行發酵過程的各項指標檢測，為確保產品質量的穩定提供依據[5]。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

（1）原料。大米、水等。

（2）菌種。乳酸菌（2菌種）：保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌；乳酸菌（8菌種）：保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜熱乳桿菌、兩歧雙歧桿菌、植物乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌及羅伊氏乳桿菌；乳酸菌（10菌種）：保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、長雙歧桿菌、短雙歧桿菌、乳雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、嗜熱乳桿菌及羅伊氏乳桿菌；乳酸菌（老酸奶）：保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、乳雙歧桿菌及乳酸乳鏈菌乳酸亞種；乳酸菌（雙歧10菌種）：保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、乳雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、乳酸乳球菌乳酸亞種、乳酸乳鏈菌乳脂亞種、乳酸乳球菌雙乙酰亞種及腸膜明串珠菌腸膜亞種；酵母：高活性干酵母；酵母（耐高糖）：高活性干酵母（耐高糖）。

（3）儀器設備。高速磨漿機、蒸煮鍋、發酵罐、生化培養箱、酸度計。

1.2 試驗方法

1.2.1 白酸湯的制作流程

以大米為原料，按圖工藝流程進行實驗，見圖1。

圖1 白酸湯工藝流程圖

1.2.2 市售菌種的篩選

選用不同的市售乳酸菌菌種進行對比實驗。將不同的市售乳酸菌菌種、酵母菌菌種、老酸湯分別接種于制備的米漿中，發酵4～5 d，將發酵后的酸湯進行指標測定。對測定結果進行對比，篩選出適合白酸湯接種發酵的菌種。

1.2.3 復合接種的研究

對1.2.2中篩選出來的菌種與老酸湯進行復合接種[6]，即采用酵母+乳酸菌、老酸湯+乳酸菌、老酸湯+酵母等為菌種，接種于制備的米漿中進行發酵，將發酵后的酸湯進行指標測定。對測定結果進行對比，優化菌種和復合接種方式。

1.2.4 指標測定

本研究采用pH值、酸度、感官指標進行白酸湯成熟度和質量優劣的比較。pH值檢測采用pH計直接測量法；酸度檢測按照《食品中總酸的測定》（GB/T 12456—2008）；感官指標按照《酸湯調味料》（T/CNFIA 117—2020）5.2感官要求中5.2.1白酸湯的檢驗方法和指標要求。

2 結果與分析

2.1 市售菌種的篩選

不同菌種進行對比實驗的結果，理化指標結果見表1，感官指標結果見表2。

表1 不同市售菌種理化指標結果表

表2 不同市售菌種感官指標結果表

實驗結果表明，單獨使用市售菌種在接種發酵后的白酸湯中總酸含量均比傳統發酵白酸湯中總酸含量低。其中乳酸菌發酵的白酸湯的總酸含量不足傳統白酸湯總酸含量的50%，表明實驗選用的市售乳酸菌不適合在米漿中進行發酵生長并產酸。而酵母菌發酵的白酸湯的總酸含量可以達到傳統白酸湯總酸含量的70%～80%，表明酵母菌較乳酸菌適合于米漿中的發酵生長并產酸。

傳統白酸湯固有的酸味，在單獨使用市售菌種接種發酵所得的白酸湯中均不具有。使用酵母和老酸奶發酵的白酸湯有酸香味和微甜味，但卻與傳統白酸湯的酸香味所具有的豐富感和細膩感相差甚遠。而采用多菌種的乳酸菌菌種發酵的白酸湯則產生餿臭味等異味，不適合用于白酸湯的發酵生產。

單獨使用市售菌種生產的白酸湯在產酸量、感官指標等均不能達到傳統白酸湯所具有的特性，因此實驗選用的市售菌種單獨均不能完全代替老酸湯接種發酵制作白酸湯。老酸奶乳酸菌和酵母菌等菌種在白酸湯發酵過程中能形成一定的酸性物質，且沒有產生其他異味，因此較為適合用于白酸湯的制作。

2.2 復合接種的研究

采用將上述實驗結果較好的老酸奶乳酸菌和酵母菌與老酸湯進行復合接種，其實驗結果，理化指標結果見表3，感官指標結果表4。

表3 復合接種理化指標結果表

表4 復合接種感官指標結果表

實驗結果表明，采用老酸湯和市售酵母菌菌種復合接種進行的發酵所得的白酸湯品質良好，其不僅具有傳統白酸湯固有的酸味和清甜味，且在發酵期相同情況下，總酸含量高于傳統白酸湯30%～40%。老酸湯和酵母菌菌種復合接種生產的白酸湯達到傳統白酸湯的產品品質，市售酵母菌菌種的加入減少了50%的老酸湯的接種量，并且能有效縮短發酵周期，是提高傳統白酸湯生產的一種有效方法。

采用市集酵母菌與市售乳酸菌復合接種進行發酵所得的白酸湯，總酸含量與傳統白酸湯相近，但其具有強烈的刺激感酸味，口感有腥辣酸味。因此該兩種市售菌種復合接種的方式不適合用于白酸湯的發酵生產。

市售乳酸菌菌種與老酸湯復合接種進行發酵所得白酸湯，其雖無異味，但酸味較淡，其發酵所得白酸湯總酸含量遠低于傳統白酸湯總酸含量，形成此結果的原因跟市售乳酸菌與老酸湯中的微生物產生拮抗作用有關。在通過市售酵母菌、市售乳酸菌和老酸湯三菌種復合接種進行發酵所得白酸湯，其總酸含量低于市售酵母菌和老酸湯復合接種所得白酸湯的總酸含量，說明市售乳酸菌與老酸湯復合接種發酵不僅不能提高白酸湯的總酸含量，反使其下降。

3 結論與討論

通過采用市售乳酸菌、市售酵母菌和老酸湯分別單獨和復合接種進行白酸湯的發酵生產試驗，結果表明市售乳酸菌、市售酵母菌單獨進行白酸湯發酵生產，在產酸量、感官指標等均不能達到傳統白酸湯所具有的特性。采用老酸湯與市售乳酸菌的復合接種進行白酸湯發酵生產的白酸湯其總酸含量遠低于傳統白酸湯，市售乳酸菌不適合用于白酸湯的生產。

市售酵母菌與老酸湯復合接種進行白酸湯的發酵生產，所得白酸湯在總酸含量、感官指標等方面都與傳統白酸湯相近，甚至更好。因此，在傳統白酸湯的生產中添加市售酵母菌菌種可以有效提高白酸湯的生產效率、減少老酸湯的用量，但不能完全代替老酸湯進行接種發酵。