RBPT檢測對布魯氏桿菌病病情診斷準確率的影響

張輕棉閆磊磊

（1.寶豐縣疾病預防控制中心檢驗科，河南寶豐467400；2.寶豐縣人民醫院檢驗科，河南寶豐467400）

布魯氏桿菌病是由布魯氏桿菌引起的人畜共患傳染病，該病細菌傳播途徑包括皮膚接觸、呼吸道和消化道等，傳播速度快，任何年齡的人都可能感染該類疾病，急性發作期患者會出現發熱、多汗、肝脾和淋巴結腫大、關節痛等臨床表現[1-2]。若患者得不到及時有效的治療，病情就會逐漸向慢性疾病轉變，這將大大增加治療難度。因此，早期診斷對布魯氏桿菌病患者具有重要意義。目前實驗室篩查和診斷布氏桿菌病常用虎紅平板凝集實驗（RBPT）和試管凝集實驗（SAT）[3-4]，但對兩種診斷效能仍存在爭議。鑒于此，本研究分析RBPT檢測對布魯氏桿菌病病情診斷準確率的影響，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2018年10月至2019年10月我中心收集的220例疑似布魯氏桿菌病的受檢者血清標本，其中男150例，女70例；年齡25～70歲，平均年齡（46.98±6.32）歲。所有受檢者均需進行流行病學調查，主要詢問是否與牛、豬、羊等動物接觸過，患者應符合發熱、出汗、肌肉和關節疼痛、反復發作等臨床表現。納入標準：自愿簽署同意書；無精神異常者。排除標準：合并嚴重臟器功能障礙者；合并血液系統或免疫系統疾病者。本研究經醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 RBPT：實驗前，確認RBPT中使用的凝集抗原在標記的有效期內，保存溫度在4～6℃之間，微量移液槍測定合格。用微量移液槍取虎紅平板凝集抗原30μL，滴于干凈的玻片上，取待測血清樣品30μL，使二者在玻片上充分混合，靜置5min后觀察結果。目測是否凝集，若可見凝集顆粒則為陽性（+），若未見凝集顆粒則為陰性（-）。

1.2.2 SAT：實驗前，確認SAT中使用的布魯氏菌溶液在標記的有效期內，恒溫培養箱經測量檢驗合格，按照說明書進行檢測。

1.3 評價指標：所有受試者的血清樣本進行抗人球蛋白試驗、病原體分離試驗，以實驗室綜合檢查結果為金標準，比較RBPT與SAT兩種血清學檢測方法的檢出率、靈敏度、特異性與準確率。

1.4 統計學方法：運用SPSS18.0軟件進行數據處理，計數資料用%表示，采用χ2檢驗，一致性采用Kappa檢驗（Kappa＞0.75表明一致性極好，0.4-0.75表明一致性較為理想，＜0.4表明一致性差），P＜0.05為差異具有統計學意義。

表2 SAT與實驗室綜合檢查結果對比

2 結果

2.1 檢查結果：以實驗室綜合檢查結果為金標準，220例布魯氏桿菌病的受檢者中，共有80例血清標本檢查結果呈陽性。

2.2 RBPT與SAT檢測結果比較：RBPT對血清標本的陽性檢出率為87.50%，RBPT對血清標本的檢測結果具有極好的的一致性（Kappa=0.822）；SAT對血清標本的陽性檢出率為87.50%，RBPT對血清標本的檢測結果具有較為理想的一致性（Kappa=0.607），詳見表1，2。2.3 RBPT與SAT診斷布魯氏桿菌病的指標評價：與SAT比較，RBPT檢測布魯氏桿菌病的靈敏度、特異度、準確度均較高，差異均有統計學意義（P＜0.05），詳見表3。

表1 RBPT與實驗室綜合檢查結果對比

表3 RBPT與SAT檢測布魯氏桿菌病的指標評價比較（%）

3 討論

布魯氏桿菌病是由革蘭陰性桿菌引起的動物源性傳染性疾病，布魯氏菌病的發病率在接觸受感染的動物和屠宰者以及經常飲用未經消毒的乳制品的人群中最高，該病菌普遍通過直接接觸感染者潰爛的皮膚，攜帶傳染病菌的病人粘液，或者吃帶有傳染病菌的食物等途徑來傳播。因此，需要一種檢出率及靈敏度較高的檢測方法，通過早期檢測、早期診斷、早期治療等，確保人民的生命安全[5-6]。

本研究表明，RBPT對血清標本的陽性檢出率為87.50，RBPT對血清標本的檢測結果具有極好的的一致性（Kappa=0.822）；SAT對血清標本的陽性檢出率87.50%，RBPT對血清標本的檢測結果具有較為理想的一致性（Kappa=0.607），與SAT比較，RBPT檢測布魯氏桿菌病的靈敏度、特異度、準確度均較高，分析其原因在于，SAT是臨床上最早用來診斷布魯氏菌病的免疫分析方法，具有較高的特異性和敏感性，但該檢測方法存在主觀性較強、費時、不能準確區分魯氏桿菌病是經過人工免疫還是自然感染的缺點，且SAT需要大量的血清樣本和抗原，檢測時間長（實驗結果需在24h后獲得），容易耽誤患者的治療時間，檢測成本較高，而且通過人眼觀測到的測試結果（渾濁度）存在一定誤差，不易達到預期值[7-8]。布魯氏桿菌病經RBPT診斷速度較快，該方法通過激活IgG的活性，去除血清中的非特異性凝集素，操作簡便，是將待測血清樣品直接與相應抗原混合，檢測時間短（5min即可獲取檢測結果）。同時，檢測中所使用的相應檢測抗原是酸性的，因此具有良好的特異性，且大多用于急慢性患者的檢測，具有較高的準確性[9-10]。

綜上所述，布魯氏桿菌病病情通過RBPT檢測具有較高的靈敏度、特異度、準確度，具有重要的臨床應用價值。