宮頸癌患者血清鱗狀細(xì)胞癌抗原、尿激酶型纖溶酶原激活物受體、CD105、轉(zhuǎn)化生長因子-β 水平及臨床意義

李靜，劉靜，張燕

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院1腫瘤科，2耳鼻喉科，3檢驗科，鄭州 450000

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤之一，占所有女性惡性腫瘤的13%左右，是造成女性死亡的第二大惡性腫瘤，近年來其發(fā)病率逐年升高且呈年輕化趨勢，對患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅，因此早期明確診斷宮頸癌并及時治療對改善患者預(yù)后具有重要意義。近年來分子生物學(xué)指標(biāo)在惡性腫瘤的診斷中廣泛應(yīng)用，鱗狀細(xì)胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）是從鱗狀上皮細(xì)胞分離的抗原，特異性高，宮頸癌患者中SCCA 水平顯著升高。CD105 是一種與人血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖相關(guān)的細(xì)胞膜抗原，它是一種跨膜糖蛋白，一般在新生血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)水平升高，尤其是在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞中呈過表達(dá)。轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）已被證實是惡性腫瘤發(fā)生免疫逃逸的重要因子，可參與腫瘤細(xì)胞在人體中的免疫逃逸，同時誘導(dǎo)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移。尿激酶型纖溶酶原激活物受體（urokinase-type plasminogen activator receptor，uPAR）是以糖基化磷脂酰肌醇錨定在細(xì)胞表面的多功能受體，與配體結(jié)合后可以介導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的非特異性水解過程，造成膠原纖維崩解，同時還可以誘導(dǎo)細(xì)胞的化學(xué)趨化及形狀改變，在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移等多種生理和病理過程中發(fā)揮著重要作用。檢測血清SCCA、CD105、TGF-β、uPAR 水平可能有助于宮頸癌患者的腫瘤分級和病理分期診斷。目前臨床上關(guān)于上述幾項指標(biāo)聯(lián)合診斷宮頸癌的報道較為少見，本研究分析了宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105 及TGF-β 水平，以期為宮頸癌的臨床診斷提供指導(dǎo)和依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年2 月至2018 年12 月于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院治療的宮頸癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡25～55 歲；②經(jīng)病理學(xué)檢查確診為宮頸癌；③初診患者；④未接受過放化療等抗腫瘤治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤；②妊娠期或哺乳期女性；③合并自身免疫系統(tǒng)疾病、血液疾病、肝腎功能障礙等。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入158 例宮頸癌患者，作為宮頸癌組。同時選取宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡25～55 歲；②經(jīng)病理學(xué)檢查確診為CIN；③未接受過治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期或哺乳期女性；②合并肝、肺、腎功能異常；③近期有輸血史。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入50 例CIN 患者，作為CIN 組。宮頸癌組和CIN組患者的年齡、體重指數(shù)等臨床特征比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（

P

﹥0.05）（表1），具有可比性。

表1 兩組患者的臨床特征（±s）

1.2 檢查方法

于入院次日抽取患者空腹靜脈血3 ml，2000 r/min離心30 min，離心半徑為15 cm。采用HLC-723GXH 全自動糖化血紅蛋白分析儀（購自日本東曹株式會社）和BS280 全自動生化分析儀（購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）檢測兩組患者的糖脂代謝指標(biāo)，包括空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇；采用經(jīng)過校準(zhǔn)的臺式水銀血壓計及合適的袖帶測量患者坐位血壓；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清uPAR、CD105 及TGF-β 水平，采用微粒子酶聯(lián)免疫分析法檢測血清SCCA 水平，試劑盒購自上海康朗生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 宮頸癌組和CIN 組患者血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平的比較

宮頸癌組患者的血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平均明顯高于CIN 組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（

P

﹤0.01）。（表2）

表2 宮頸癌組和CIN 組患者血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平的比較（±s）

2.2 不同臨床特征宮頸癌患者血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平的比較

TNM 分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清SCCA 水平分別高于TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（

t

=5.227、5.139，

P

﹤0.05）；低分化宮頸癌患者的血清uPAR 水平高于中高分化的患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（

t

=2.374，

P

﹤0.05）；TNM 分期為Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤直徑≥5 cm、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清CD105 水平分別高于TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤直徑﹤5 cm、中高分化、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（

t

=2.183、3.045、3.013、3.108，

P

﹤0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清TGF-β 水平高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（

t

=3.350，

P

﹤0.05）。（表3）

表3 不同臨床特征宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平（n=158）

2.3 相關(guān)性分析

采用Pearson 相關(guān)分析法分析宮頸癌患者血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平的相關(guān)性，結(jié)果顯示，宮頸癌患者的血清SCCA 與TGF-β 水平呈正相關(guān)（

r

=0.431，

P

﹤0.05），血清uPAR 與CD105 水平呈正相關(guān)（

r

=0.332，

P

﹤0.05），其余未見明顯相關(guān)性。

2.4 治療前后宮頸癌患者血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平的比較

治療1 個月后，宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平均明顯低于治療前，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（

P

﹤0.01）。（表4）

表4 治療前后宮頸癌患者血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平的比較（±s）

3 討論

宮頸癌是來源于宮頸鱗-柱交接部鱗狀上皮和腺體的惡性腫瘤，作為女性最常見的惡性腫瘤之一，對女性的身心健康和生命安全造成嚴(yán)重威脅，其中4/5 的患者在發(fā)展中國家，近年來隨著早期診斷方法的廣泛應(yīng)用，宮頸癌的臨床診斷率得以提升。目前關(guān)于宮頸癌發(fā)病的具體機(jī)制尚未明確，而腫瘤的發(fā)生發(fā)展主要是由癌前病變、原位癌、浸潤癌的連續(xù)演變過程，受到環(huán)境、宿主以及病毒等多種因素的影響，因此如何準(zhǔn)確評估宮頸癌的相關(guān)病理特征已成為臨床開展治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。宮頸癌早期無特殊性臨床表現(xiàn)，傳統(tǒng)的陰道鏡、宮頸刮片等方法漏診率較高，而血清學(xué)標(biāo)志物可為宮頸癌的明確診斷提供依據(jù)。近年來細(xì)胞學(xué)檢查具有較高的特異性，但敏感性較低，細(xì)胞學(xué)檢查主要是通過觀察細(xì)胞形態(tài)變化而看不到組織結(jié)構(gòu)的改變情況，取材不準(zhǔn)確或制片過厚、過薄均會影響最終診斷結(jié)果，宮頸脫落細(xì)胞常發(fā)生退變且容易受人為因素的影響，容易出現(xiàn)假陽性或假陰性。

本研究分析了宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平，SCCA 屬于臨床較為常用的腫瘤標(biāo)志物，參與細(xì)胞外基質(zhì)降解與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移，其在正常鱗狀上皮中表達(dá)，尤其在宮頸癌中表達(dá)水平較高，特異性較高。研究發(fā)現(xiàn)，SCCA可以通過抑制腫瘤細(xì)胞凋亡并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活，從而影響細(xì)胞周期，也可以通過增加表皮生長因子的表達(dá)刺激細(xì)胞遷移，從而對細(xì)胞周期產(chǎn)生影響；此外還可以促進(jìn)致癌轉(zhuǎn)化，誘導(dǎo)多種細(xì)胞因子產(chǎn)生，促進(jìn)原發(fā)性炎癥。

CD105 屬于同型二聚體細(xì)胞膜糖蛋白，可調(diào)節(jié)內(nèi)皮間質(zhì)信號傳遞，促進(jìn)血管生成，參與腫瘤細(xì)胞的生長、分化、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。研究表明，惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移依賴于腫瘤組織中新生血管的生成，腫瘤新生血管與腫瘤生長、侵襲及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。CD105 在腫瘤組織及其周圍的血管內(nèi)皮細(xì)胞中強(qiáng)表達(dá)，而在正常組織的血管中無表達(dá)，CD105 參與內(nèi)皮細(xì)胞增殖及血管生成，在腫瘤新生血管生成過程中發(fā)揮了重要作用，因此CD105也被證實可作為抗腫瘤治療的靶點。

uPAR 屬于高度糖基化蛋白質(zhì)，是尿激酶型纖溶酶原激活物特異性受體，存在于體內(nèi)多種細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞膜上，可以參與多種酶激活過程以及血管生成過程，促進(jìn)腫瘤新生血管生成以及腫瘤的發(fā)生。有研究認(rèn)為，腫瘤細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移是一種不受調(diào)控的腫瘤組織取代正常組織的重建過程，uPAR 在宮頸癌細(xì)胞表面的表達(dá)水平高于正常組織，與本研究結(jié)果一致。

目前已經(jīng)證實TGF-β 與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展具有緊密聯(lián)系，它屬于調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）分泌形成的細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β具有多種生物學(xué)功能，可以參與細(xì)胞外基質(zhì)的重建過程，對人體抗腫瘤免疫應(yīng)答具有作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，TGF-β 參與了從宮頸不典型增生發(fā)展至原位癌、浸潤癌的全過程，其表達(dá)上調(diào)促進(jìn)了腫瘤新生血管生成過程，導(dǎo)致上皮細(xì)胞朝向具有侵襲能力的間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)變，最終影響宮頸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程，與本研究結(jié)果一致。

本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌組患者的血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平均明顯高于CIN 組，提示在宮頸癌患者中上述指標(biāo)過表達(dá)，說明了上述指標(biāo)與腫瘤新生血管生成及宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，TNM 分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清SCCA 水平分別高于TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（

P

﹤0.05），低分化宮頸癌患者的血清uPAR 水平高于中高分化的患者（

P

﹤0.05），TNM 分期為Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤直徑≥5 cm、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清CD105 水平分別高于TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤直徑﹤5 cm、中高分化、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（

P

﹤0.05），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清TGF-β 水平高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（

P

﹤0.05）。說明SCCA 對宮頸癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的診斷價值，uPAR 對腫瘤分化程度具有一定的診斷價值，CD105 對臨床分期、腫瘤直徑、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的診斷價值，TGF-β 對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的診斷價值。通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者的血清SCCA 與TGF-β 水平呈正相關(guān)，血清uPAR 與CD105 水平呈正相關(guān)。開展有效的治療后，宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平均明顯降低。本研究分析了宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105 和TGF-β 水平，為預(yù)測宮頸癌發(fā)生發(fā)展、評估療效提供了客觀依據(jù)，但本研究入組患者數(shù)量少，隨訪時間較短，還需要進(jìn)一步擴(kuò)充樣本量進(jìn)行長期隨訪深入論證。

綜上述所，宮頸癌患者的血清SCCA、uPAR、CD105、TGF-β 水平均明顯升高，且其表達(dá)水平與患者的臨床特征具有一定關(guān)系，值得進(jìn)一步研究。