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TNIP1基因多態性rs17728338及負性情緒與尋常型銀屑病相關性研究

2021-09-19 08:03:12陳彩霞崔梓榆韓建文黃永清
內蒙古醫科大學學報 2021年4期

張 強,陳彩霞,崔梓榆,韓建文,張 琰,黃永清

(1.內蒙古醫科大學學生工作部,內蒙古 呼和浩特 010059;2.內蒙古醫科大學附屬醫院皮膚科;3.內蒙古醫科大學附屬醫院康復科;4.內蒙古精神衛生中心)

銀屑病是一種慢性炎癥性復發性系統性疾病。近年來的多項研究表明,銀屑病的發生、復發和焦慮、抑郁等負性情緒相關,尤其是尋常型銀屑病[1,2]。許多報道稱,銀屑病的發生、復發和相關遺傳因子有關。NF-κB(nuclear factor-κB)是一種重要的真核細胞轉錄因子,連接著活化的T細胞和銀屑病相關分子的轉錄。目前已經有研究報道,TNIP1基因在調節NF-κB信號方面發揮重要作用[3~5]。本研究就負性情緒(焦慮、抑郁)和遺傳因子(TNIP1基因多態性rs17728338)與尋常型銀屑病的相關性進行探討。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

經過臨床和病理確診的尋常型銀屑病患者345例,年齡39~76歲,平均年齡(58.12±9.57)歲,男性183例,女性162例,正常對照組341例,男性181例,女性160例,年齡和患者想當,所選疾病均無系統性疾病。所有患者2周內沒有使用過任何外用藥物,2個月內未使用過維A酸、糖皮質激素等藥物。

1.2 負性情緒評定

應用焦慮自評量表(SAS),抑郁自評量表(SDS)對345例尋常型銀屑病患者和341例正常對照進行評定,標準總分≥50分即認定為患者具有負性情緒的癥狀。

1.3 主要試劑及設備

10%SDS(十二烷基磺酸鈉),0.5M EDTA(pH8.0),10mg/mL蛋白酶K(Merk公司),紅細胞裂解液,白細胞裂解液,瓊脂糖凝膠加樣緩沖液(6x),PCR儀Gene Amp PCR system 9600(Norwalk,CT.06859 USA),TU-1810型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司)。

1.4 基因組DNA提取

采用鹽析法進行人外周血基因組DNA提取。空腹抽取受試者靜脈血3mL,置于K2EDTA抗凝真空采血管,提取基因組DNA,并檢測純度和濃度。

1.5 引物及探針的合成

設計引物和LDR探針,應用Primer3online(Version0.4.0,http://frodo.wi.mit.edu/)軟 件 和Oligo(Version 6.31,Molecular Biology Insights Inc.,USA),PCR引物序列(見表1、2)。

表1 PCR引物序列

表2 LDR探針序列

1.6 多重PCR擴增

10mM Tris-HCl(pH7.4),2.0mM MgCl2,50mM KCl,0.5μM Primers,200mM dNTPs,1U polymerase。再加入2μL基因組DNA。

1.7 多重連接酶檢測反應(LDR)

20mM Tris-HCl(pH 8.5),100mM KCl,5mM Mg-Cl2,0.2μM Probes,1mM NAD+,10mM DTT。加入2μL多重PCR的產物。

1.8 ABI3730測序儀檢測

分析判讀每個位點上,每個樣本的基因分型。

1.9 統計學分析

所有計量數據采用均數±標準差表示,等位基因及基因型頻率用卡方檢驗(χ2),基因型分布用擬合優度卡方檢驗,檢驗水準為α=0.05,所有檢驗用SPSS 13.0和PLINK1.07[6]處理。

2 結果

2.1 尋常型銀屑病與對照組焦慮、抑郁的比較

尋常型銀屑病組焦慮發生率(44.9%)明顯高于對照組(7.3%),差異有顯著性(P=0.000),而且在尋常型銀屑病組的焦慮評分(SAS)分值(41.33±8.00)高于對照組(36.57±7.66),差異有顯著性(P=0.000)。尋常型銀屑病組抑郁的發生率(55.1%)明顯高于對照組(11.7%),差異有顯著性(P=0.000),尋常型銀屑病組的抑郁自評(SDS)分值(45.21±9.06)高于正常對照組(29.08±10.36)(見表3、4)。

表3 尋常型銀屑病與對照組焦慮、抑郁的比較

表4 尋常型銀屑病組和對照組SAS、SDS評分的比較

2.2 尋常型銀屑病組和對照組中TNIP1基因多態位點rs17728338:G>A基因型分布情況

TNIP1基因多態位點rs17728338在尋常型銀屑病組和對照組之間的基因型分布差異有顯著性(P<0.01),尋常型銀屑病組A等位基因頻率(15.22%)顯著高于對照組(8.06%)(P=0.000)(見表5)。

表5 尋常型銀屑病組和對照組中TNIP1基因多態位點rs17728338:G>A基因型分布情況

2.3 焦慮、抑郁、TNIP1基因交互作用和尋常型銀屑病相關性

2.3.1TNIP1基因多態位點rs17728338基因型及等位基因頻率在銀屑病伴/不伴焦慮癥狀組患者的分布 基因型AG和A等位基因頻率在尋常型銀屑病伴焦慮組和不伴焦慮組差異有統計學意義(P<0.01)。基因型AG和A等位基因頻率在尋常型銀屑病伴焦慮組高于不伴焦慮組(見表6)。

表6 TNIP1基因多態位點rs17728338基因型及等位基因頻率在銀屑病伴/不伴焦慮癥狀組患者的分布

2.3.2TNIP1基因多態位點rs17728338基因型及等位基因頻率在銀屑病伴/不伴抑郁癥狀組患者的分布 基因型AG和A等位基因頻率在尋常型銀屑病伴抑郁組和不伴抑郁組差異有統計學意義(P<0.01)。基因型AG和A等位基因頻率在尋常型銀屑病伴抑郁組高于不伴抑郁組(見表7)。

表7 TNIP1基因多態位點rs17728338基因型及等位基因頻率在銀屑病伴/不伴抑郁癥狀組患者的分布

3 討論

既往研究顯示焦慮、抑郁等負性情緒參與多種慢性病的發生發展。本研究發現在尋常型銀屑病患者中的負性情緒(焦慮、抑郁)的發生率,以及SAS和SDS評分顯著高于健康對照組,與既往相關研究結果一致。可能是由于緊張、焦慮、抑郁等心理因素可促進P物質釋放,從而剌激細胞增殖和角質形成,導致免疫系統異常,加重和誘發銀屑病[7,8]。TNIP1基因多態性與尋常型銀屑病的相關性在中國人群和歐洲人群均有報道[9~11]。本研究在進一步的基因分型實驗中結果示TNIP1基因多態位點rs17728338在尋常型銀屑病組和對照組之間的基因型分布差異有顯著性,尋常型銀屑病組A等位基因頻率顯著高于對照組,與Nair和Sun等人的研究結果一致[9~11]提示TNIP1基因多態性與尋常型銀屑病具有相關性。在進一步的分層分析發現rs17728338的基因型AG和A等位基因頻率和尋常型銀屑病伴焦慮呈正相關,基因型AG和A等位基因頻率和尋常型銀屑病伴抑郁呈正相關,這和聶鑫等人的研究相一致[12]。總之,本研究通過流行病學、基因分型研究,發現尋常型銀屑病患者中負性情緒(焦慮、抑郁)的發生率及評分均明顯增高;TNIP1基因多態性rs17728338與焦慮、抑郁可能存在交互作用進而影響銀屑病的易感性,但關于基因多態性如何與負性情緒相互影響,如何影響基因功能和免疫系統,仍有待于進一步研究。

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