脂肪酸轉運蛋白4在腎透明細胞癌中的表達及臨床意義

朱 軍，唐 矛

（上海市寶山區中西醫結合醫院泌尿外科，上海 寶山 201900）

腎透明細胞癌（clear cell renal cell carcinoma，ccRCC）是最常見的腎惡性腫瘤類型，占所有腎細胞癌的80%~90%[1]，以含有脂質和糖原的透明細胞質為主要組織學特征。細胞質脂質含量增加提示ccRCC腫瘤細胞中脂質代謝發生改變，脂肪酸轉運蛋白4（fatty acid transport protein 4，FATP4）屬于哺乳動物長鏈脂酰輔酶A合成酶家族，通過與輔酶A的酯化作用激活脂肪酸。FATP4擅長激活超長鏈脂肪酸，且自身具有轉運功能[2]。一項研究FATP4功能的報道表明，FATP2、FATP4的過度表達增強了人肝癌細胞對脂肪酸的攝取[3]。此外，Yen等研究提示了高FATP4表達與通過上皮間質轉化的人類乳腺癌腫瘤進展相關[4]。本研究評估了ccRCC腫瘤組織和正常腎組織之間FATP4表達的差異。并分析了ccRCC病人中FATP4表達的臨床病理特征的相關性，探討其臨床意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017-12~2019-12本院收治的ccRCC病人80例為研究對象，根據國際抗癌聯合會（UICC）TNM分類分期標準Ⅰ期25例，Ⅱ期39例，Ⅲ期10例，Ⅳ期6例。其中男性53例，女性27例，年齡51～79歲，平均年齡（63.7±8.5）歲。另選取40例因非腫瘤或腫瘤疾病手術切除的正常腎組織樣本作為對照組，排除標準：排除伴有急性心肌梗死、嚴重感染性疾病、阻塞性肺病等。每例做成4μm厚的切片并做免疫組化。本研究通過醫院倫理委員會審核批準。所有病人均簽署知情同意書。兩組病人的年齡、性別等一般資料差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 處理方法

收集經手術取得的組織標本，標本切片厚為5μm，全部標本均常規脫蠟、水化，免疫組織化學染色，采用免疫組化二步法測定FATP4的表達。將已知陽性片作為陽性對照標準，采用PBS取代第一抗體作為陰性對照。

結果判定：應用免疫組化S-P法染色，在免疫組化染色中，FATP4陽性信號為細胞漿或細胞膜的棕黃色顆粒物質。將每個組織切片在光鏡下觀察5個高倍視野（×200），統計陽性細胞數并計算陽性細胞率，根據陽性細胞在觀察細胞中所占比例定義如下：陽性細胞數<25%（-），25%~50%（+），50%~75%（++），>75%（+++）。其中（++）和（+++）定義為高表達，（-）和（+）定義為低表達。

比較FATP4的陽性表達率在ccRCC病人不同臨床病理特征中的差異。采用spearson秩相關分析FATP4的陽性表達率與臨床病理特征的相關性。

1.3 統計學方法

應用SPSS 18.0軟件處理數據，兩組間的FATP4的陽性表達率的比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。FATP4的陽性表達率與臨床特征的相關性分析采用spearson相關性分析（檢驗水準P=0.01）。

2 結果

2.1 FATP4在正常腎組織和ccRCC腫瘤組織中的表達率的比較

通過比較ccRCC腫瘤組織和正常腎組織中FATP4的表達，結果顯示ccRCC腫瘤組織的FATP4的陽性表達率顯著高于正常腎組織，差異有統計學意義（P<0.05）。

表1 FATP4在正常腎組織和ccRCC腫瘤組織中的表達（n，%）

2.2 FATP4表達與ccRCC臨床特征的關系

FATP4的陽性表達在ccRCC病人的不同臨床病理特征中的差異如下表所示，不同年齡、性別、臨床分級病人之間FATP4的陽性表達差異無統計學意義（P>0.05），是否轉移，是否伴肉瘤樣特征病人的FATP4的陽性差異無統計學意義（P>0.05）。在TNM分期Ⅲ-Ⅳ的病人中，FATP4高表達的比率顯著高于低表達的比率（P＜0.05）。在合并腫瘤壞死和復發的病人中，FATP4高表達的比率顯著高于低表達的比率（P＜0.05）。提示FATP4高表達與TNM分期、腫瘤壞死和復發有關。

2.3 FATP4的表達和TNM分期、腫瘤壞死和復發的相關性分析

采用Spearson相關分析法對ccRCC組織中FATP4的陽性表達率進行相關性分析，結果顯示ccRCC組織中FATP4的表達與TNM分期、腫瘤壞死呈顯著正相關關系（P＜0.01），與是否復發無顯著相關性。

3 討論

表2 ccRCC病人中FATP4的表達

腎癌是全球第12位最常見的實體腫瘤[5]，ccRCC是最常見的組織學亞型，占所有腎臟腫瘤的90%左右[6]。ccRCC組織細胞起源于腎近端小管，具有豐富的透明細胞質，原因在于糖原和脂質含量較高。由于線粒體數量較多，因此也可能存在嗜酸性細胞或顆粒細胞[7]。ccRCC通常表現為15.3%~21.5%的轉移率和71%~81.3%的5年存活率[8]。高達30%的病人在診斷時出現轉移性疾病，約20%~30%的接受手術的受試者會復發。因此，早期診斷或探索敏感的因子對于提高這些病人的生存率至關重要。

脂質代謝失調被認為是腫瘤的特征之一，癌細胞不僅能合成脂肪酸，還會增強外源性脂肪酸的攝取，以應對特定遺傳和環境條件下對脂肪酸的需求增加。有報告發現，在缺氧等代謝應激條件下，細胞外脂質清除是癌細胞維持活力和/或生長的重要適應機制[9]。另一項研究表明，當癌細胞從增殖狀態轉變為遷移狀態時，會降低脂質的生物合成并依賴于外源性脂質攝取[10]。在各種實驗模型中，已建議FATP作為膜轉運蛋白和/或作為具有CoA合成酶活性的酶來促進長鏈脂肪酸的轉運[11]。哺乳動物FATP家族由六個成員組成，FATP1到FATP6[12]。其中FATP4通常可在多種細胞中檢測到，包括心臟、肝臟、大腦、腎臟、肌肉、皮膚和內皮細胞[13]。

本研究表明，ccRCC腫瘤組織中FATP4的表達高于正常腎組織，研究結果提示，通過FATP4跨細胞膜的脂肪酸轉運增加可能是ccRCC的腫瘤特異性特征。此外，FATP4表達與ccRCC高TNM分期、腫瘤壞死和復發有關。這些結果表明FATP4在ccRCC腫瘤組織中的高表達可能有助于ccRCC的腫瘤發生和腫瘤進展。同時，ccRCC腫瘤細胞顯示出FATP4表達顯著增加，FATP4在80例ccRCC病人中有35例高表達。表明ccRCC細胞在代謝上與正常細胞不同，并且在腫瘤發生過程中更傾向于從細胞外來源攝取脂肪酸的機制。本研究結果與既往報道結果相似，毛英等研究結果顯示FABP4可通過促進EMT等促進腫瘤細胞的侵襲[14]。

此外，臨床上，腫瘤細胞中FATP4高表達與TNM分期、腫瘤壞死和腫瘤復發有關，與ccRCC的其他臨床病理參數無相關性。推測其原因可能在于在ccRCC腫瘤組織中，FATP4的高表達可能會降低線粒體中脂肪酸的利用并促進脂肪酸通過質膜的攝取，導致細胞質積累并促進腫瘤進展[15]。

本研究又分析了ccRCC組織中FATP4的陽性表達率與臨床特征的相關性，結果顯示FATP4的表達與TNM分期、腫瘤壞死呈顯著正相關關系（P＜0.01），與是否復發無顯著相關性。提示隨著ccRCC病人TNM分期的增加，病人FATP4水平隨之升高（P<0.05），能夠預測病人的嚴重程度。然而在本研究中，盡管在合并復發的病人中，FATP4高表達的比率顯著高于低表達的比率，但FATP4的表達增加與是否復發無顯著相關性。

綜上所述，ccRCC腫瘤組織中FATP4的表達與腎癌的臨床病理特征關系密切，包括TNM分期和腫瘤壞死，檢測FATP4的陽性表達對于評估腎癌的惡性程度和預后具有重要臨床指導價值。