高危型人乳頭瘤病毒感染與陰道微生態(tài)及宮頸局部細(xì)胞免疫間的相關(guān)性分析

古國榮，郭麗萍，羅東平

（惠東縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣東 惠州 516300）

當(dāng)代女性普遍存在人乳頭瘤病毒（human papillomavirus,HPV）感染的情況，其中8%的患者會發(fā)展成為宮頸癌前病變或者宮頸癌[1]。宮頸癌發(fā)病的一個(gè)重要影響因素就是發(fā)生HPV 感染，特別是高危型人乳頭瘤病毒（high risk human papillomavirus, HR-HPV），數(shù)據(jù)顯示，70%～80%的宮頸癌的出現(xiàn)均與HR-HPV 感染有密切聯(lián)系[2]。女性陰道是由陰道生理結(jié)構(gòu)、陰道菌群與免疫系統(tǒng)構(gòu)成的一種微生態(tài)系統(tǒng)，該系統(tǒng)可發(fā)揮抵御外部病原菌感染和抑制炎癥反應(yīng)的重要作用。一旦發(fā)生HR-HPV 感染，患者的陰道微生態(tài)會發(fā)生紊亂，導(dǎo)致陰道菌群失衡或者局部的免疫功能障礙，增加發(fā)生宮頸癌前病變和宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)[3]。對HR-HPV 感染患者陰道微生態(tài)、陰道菌群以及宮頸局部之T 淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)情況進(jìn)行探究，現(xiàn)總結(jié)如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年7 月—2020 年12 月于我院就診的HPV感染患者100 例，其中HR-HPV 組50 例，其他50 例為非HR-HPV 組，選取同期于我院進(jìn)行體檢的健康人群50 名為對照組，所有受試者年齡28 ～52 歲，平均（42.08±6.72 歲）。納入標(biāo)準(zhǔn)：陰道鏡活檢、TCT 及HPV-DNA 檢測結(jié)果顯示出現(xiàn)HPV 感染；近2 個(gè)月內(nèi)未接受抗生素和抗病毒治療；所有受試者月經(jīng)周期規(guī)律。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并惡性腫瘤者；合并腎臟功能嚴(yán)重?fù)p傷者；有宮頸部位手術(shù)史者；合并全身性感染性疾病者；檢查前3 d 內(nèi)有性生活。三組受試者分娩史、產(chǎn)次以及年齡等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 標(biāo)本取樣前48 h 內(nèi)禁止性生活，取膀胱截石位，充分暴露受試者宮鎖口和陰道口。采用棉拭子于受試者陰道側(cè)壁上1/3 的位置取少量分泌物放置于試管中檢測受試者陰道的微生態(tài)；采用棉拭子按照順時(shí)針的方向于宮頸外口旋轉(zhuǎn)3 ～4 圈，將取樣的標(biāo)本放置于專用的保存液中，-20℃的環(huán)境下保存；使用宮頸采樣刷于受試者陰道后穹窿、宮頸鱗-柱上皮交界處按照順時(shí)針的方向刷4 ～5 圈，取下采樣刷的刷頭并將其放置于0.9%氯化鈉溶液中，樣本用于檢測受試者宮頸免疫細(xì)胞。

1.2.2 陰道微生態(tài) 采用陰道微生態(tài)聯(lián)合測定試劑盒（由北京中生金域診斷技術(shù)有限公司生產(chǎn)）檢測受試者唾液酸苷酶、過氧化氫、白細(xì)胞酯酶的活性，唾液酸苷酶結(jié)果呈現(xiàn)紅色或紫色為陽性，白細(xì)胞酯酶檢測結(jié)果顯示為綠色或者藍(lán)色為陽性，過氧化氫檢驗(yàn)結(jié)果呈藍(lán)色則為陽性。若上述3 個(gè)指標(biāo)結(jié)果顯示為陰性則提示患者陰道微生態(tài)正常，若其中一個(gè)指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果顯示為陽性則提示微生態(tài)失調(diào)[4]；同時(shí)檢驗(yàn)受試者滴蟲、解脲脲原體、衣原體、細(xì)菌性陰道炎以及乳酸桿菌感染情況。

1.2.3 HR-HPV 檢測 采用HPV-DNA 試劑盒（由凱普生物化學(xué)有限公司提供）檢測受試者HR-HPV 的基因型，主要包含HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58,59、66、68。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，其中計(jì)數(shù)資料用（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用（± s）表示，行t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 三組受試者陰道微生態(tài)情況對比

HR-HPV 組陰道微生態(tài)失調(diào)率（46.0%）較非HR-HPV組（40.0%）、對照組（24.0%）更高（P＜0.05），非HR-HPV 組整體失調(diào)率較對照組更高（P＜0.05），見表1。

表1 三組受試者陰道微生態(tài)情況對比

2.2 三組受試者陰道菌群情況對比

HR-HPV 組及非HR-HPV 組主要陰道菌群陽性率較對照組更高（P＜0.05），HR-HPV 組解脲脲原體、衣原體及乳酸桿菌異常方面較非HR-HPV 組更高（P＜0.05），見表2。

表2 三組受試者陰道菌群情況對比[n（%）]

2.3 三組受試者宮頸局部組織T 淋巴細(xì)胞亞群對比

HR-HPV 組及非HR-HPV 組T 淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)較對照組更低（P＜0.05），HR-HPV 組較非HR-HPV 組T 淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)更低（P＜0.05），見表3。

表3 三組受試者宮頸局部組織T 淋巴細(xì)胞亞群對比（ ± s）

表3 三組受試者宮頸局部組織T 淋巴細(xì)胞亞群對比（ ± s）

注：與對照組對比，*P ＜0.05，與非HR-HPV 組對比#P ＜0.05。

組別 例數(shù) CD3+/% CD4+/% CD8+/% CD4+/CD8+HR-HPV 組 50 42.5±2.2*# 25.7±4.3*# 29.6±3.5*# 0.8±0.1*#非HRHPV 組 50 51.3±6.2* 37.8±5.2* 36.5±4.3* 1.2±0.2*對照組 50 55.4±6.2 41.5±4.6 42.4±5.3 1.3±0.4 F 32.56 26.76 18.66 12.54 P 0.00 0.00 0.00 0.00

3.討論

國內(nèi)外專家學(xué)者指出，HPV 病毒通過感染、整合以及癌變等一系列變化參與到宮頸病變的發(fā)生和發(fā)展過程中[5]?，F(xiàn)階段全球范圍內(nèi)尚缺乏有效的藥物用于清除HPV 病毒，目前有關(guān)HPV 疫苗的臨床研究顯示效果良好，但就目前來說，HPV 疫苗整體藥效時(shí)間短，在長期預(yù)防方面的效果不理想。因此，為有效降低HPV 危害，應(yīng)從源頭入手，盡量減少或者避免出現(xiàn)HPV 感染[6]。隨著有關(guān)宮頸癌研究的不斷深入，有學(xué)者指出，大部分出現(xiàn)HPV 感染的患者可自行轉(zhuǎn)歸，并未發(fā)生宮頸癌前病變和宮頸癌。少部分HPV 持續(xù)感染的患者是宮頸癌發(fā)病的高危人群。這就提示HPV 的感染并不是唯一個(gè)導(dǎo)致宮頸癌出現(xiàn)的因素，宮頸癌的發(fā)病有其他多個(gè)未知因素的參與[7]。研究指出，患者感染HPV 的過程中，陰道微生態(tài)環(huán)境會出現(xiàn)一定的變化，考慮到陰道內(nèi)存在多種微生物，與機(jī)體的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、免疫功能以及生理結(jié)構(gòu)共同組成了動態(tài)、獨(dú)特的微生態(tài)體系[8]。若該體系一旦出現(xiàn)失衡，機(jī)體的局部免疫功能較正常人下降，因此感染HPV 的敏感性較正常人更高[9]。

綜上所述，HR-HPV 感染會破壞患者陰道微生態(tài)平衡，降低宮頸局部細(xì)胞的免疫功能，導(dǎo)致病情進(jìn)一步惡化。