卵巢癌病灶血管新生及惡性程度與陰道彩色超聲血流參數間相關性研究

王東 吳佳慧 任原玉

黑龍江省佳木斯市腫瘤醫院物理診斷科 154000

卵巢癌作為我國女性發病率前3位的惡性腫瘤之一，其病死率始終居高不下［1］。調查顯示，Ⅰ期卵巢癌的5年生存率可高達90%，但受臨床癥狀不典型影響，患者確診時通常已經處于晚期［2］。但臨床上針對早期卵巢癌的篩查方式仍局限于腫瘤標志物和/或經陰道超聲篩查，篩查效果并不理想。卵巢癌病灶血管新生會導致血流阻力下降，增加血流量，致使癌細胞生長，是癌組織增生的病理基礎［3］。研究認為，腫瘤的惡性程度升高血流信號會有所增強，但仍無法將血流信號作為腫瘤良惡性的鑒別手段［4］。而卵巢癌患者的人附睪蛋白4（HE4）、糖類抗原125（CA125）水平與卵巢癌患者的惡性程度存在密切相關［5］。經陰道彩色多普勒血流顯像（TV-CDFI）可用于血流狀態評估，通過對病灶血流參數加以定量測定確定病灶處的血流狀態［6］。本研究旨在深入探究卵巢癌血管新生、惡性程度與TV-CDFI所測定的相關血流參數間的相關性，以便于卵巢癌的早期篩查提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年2月就診佳木斯市腫瘤醫院的卵巢腫瘤預行手術治療患者120例，術前行陰道彩色超聲檢查，并依據患者術后病理診斷結果分為卵巢癌組（80例）、卵巢囊腫組（40例）。卵巢癌組患者年齡范圍為30～75歲，年齡50.25（46.50，70.00）歲；國際婦產科聯盟（FIGO）分期：Ⅰ期21例，Ⅱ期20例，Ⅲ期20例，Ⅳ期19例［7］。卵巢囊腫組患者年齡范圍為30～75歲，年齡49.52（46.00，71.25）歲。納入標準：（1）存在異常陰道分泌物、陰道出血、腹部脹痛等；（2）患者及家屬對本研究內容知情同意，已簽署知情同意書；（3）經超聲檢查發現單側卵巢包塊、臨床資料完整；（4）擬進行手術治療。排除標準：（1）伴發心、肝、腎臟功能異常者；（2）伴發精神障礙、妊娠及哺乳期婦女；（3）伴發免疫缺陷及凝血障礙患者。兩組卵巢腫瘤預行手術治療患者年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經佳木斯市腫瘤醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 TV-CDFI檢測 儀器選用美國GE Voluson E10型號彩色多普勒超聲診斷儀，應用IC-5-9-D探頭，頻率設定在6.0～7.5 MHz。檢查前指導患者排空膀胱后取截石位，將探頭置入陰道內，運用二維超聲對腫瘤位置、大小、形態及回聲加以判斷，繼而啟動CDFI模式，當血流頻譜圖像穩定后，對病灶部位的血流參數加以測定，每個參數取3個穩定周期，取平均值。主要涵蓋：動脈血管搏動指數（PI）、阻力指數（RI）、舒張末期流速（EDV）、峰值流速（PSV）［8］。

1.2.2 血管新生相關基因表達量的檢測 TV-CDFI檢測后采集患者卵巢手術切除病灶部位樣本，加入RIPA裂解液后，獲取病灶內總蛋白，經離心后應用酶聯免疫吸附法測定總蛋白懸液中的血管內皮生長因子165（VEG F165）、鞘氨醇激酶1（SphK1）的蛋白表達量。

1.2.3 卵巢包塊的惡性程度評估 經病理診斷確定卵巢癌患者的卵巢癌FIGO分期、并采集患者入院次日晨起肘靜脈血4 ml，取自然凝固后上層血清作為觀察樣本，應用酶聯免疫吸附法檢測患者HE4、CA125水平。本研究相關實驗室檢查均由2名專業檢驗人員共同完成。

1.3 統計學處理 采用SPSS24.0軟件進行數據處理，不符合正態分布的計量資料應用M（P25，P75）表示，組間比較應用秩和檢驗，符合正態分布的計量資料應用（±s）表示，組間比較應用兩獨立樣本t檢驗，多組間比較選用多個樣本均數兩兩比較，計數資料應用率或構成比表示，組間比較應用χ2檢驗，相關性采用Pearson相關分析，校正水準α＝0.05，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 卵巢血管新生基因表達量及HE4、CA125水平比較 卵巢囊腫組患者VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平均顯著低于卵巢癌組，差異均有統計學意義（均P＜0.001），見表1。

表1 兩組卵巢腫瘤預行手術治療患者卵巢血管新生基因表達量及HE4、CA125水平比較（±s）

表1 兩組卵巢腫瘤預行手術治療患者卵巢血管新生基因表達量及HE4、CA125水平比較（±s）

注：VEGF165為血管內皮生長因子165，SphK1為鞘氨醇激酶1，HE4為人附睪蛋白4，CA125為糖類抗原125

組別卵巢癌組卵巢囊腫組t值P值例數80 40 VEGF165（μg/L）3.78±1.52 1.03±0.22 11.360＜0.001 SphK1（ng/L）378.56±50.47 112.42±16.85 32.401＜0.001 HE4（μmol/L）379.46±56.79 18.72±6.96 39.942＜0.001 CA125（U/ml）521.46±88.97 37.29±6.72 34.297＜0.001

2.2 不同FIGO分期患者的彩色超聲血流參數差異不同FIGO分期（Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期）患者的PI、EDV、RI水平差異均有統計學意義（均P＜0.001）；不同FIGO分期患者的PSV水平比較差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同FIGO分期卵巢癌患者的陰道彩色超聲血流參數比較（±s）

表2 不同FIGO分期卵巢癌患者的陰道彩色超聲血流參數比較（±s）

注：FIGO為國際婦產科聯盟，PI為搏動指數，EDV為舒張末期流速，RI為阻力指數，PSV為峰值流速；與Ⅱ期比較，a P＜0.05；與Ⅲ期比較，b P＜0.05；與Ⅳ期比較，c P＜0.05；與Ⅰ期比較，d P＜0.05

分期Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期F值P值例數21 20 20 19 PI 1.12±0.22abc 0.82±0.19bcd 0.78±0.12acd 0.52±0.12abd 42.072＜0.001 EDV（cm/s）11.56±2.47abc 14.42±2.85bcd 17.56±3.47acd 19.42±2.85abd 28.181＜0.001 RI 0.56±0.27abc 0.42±0.15bcd 0.36±0.17acd 0.22±0.12abd 11.196＜0.001 PSV（cm/s）24.56±4.43c 25.42±4.67 26.56±5.37 28.42±5.45d 2.211 0.093

2.3 血管新生、惡化程度與彩色超聲血流參數的相關性 經Pearson相關分析，PI與VEGF165、FIGO分期呈顯著負相關（r＝-0.724、-0.747，均P＜0.001）；EDV與VEGF165、FIGO分期呈顯著正相關（r＝0.764、0.772，均P＜0.001）；RI與VEGF165、FIGO分 期、CA125呈 顯 著 負 相 關（r＝-0.311、-0.330、-0.230，均P＜0.05）。見表3。

表3 80例卵巢癌患者的血管新生基因表達量、FIGO分期、HE4、CA125與彩色超聲血流參數相關性

3 討 論

臨床上卵巢腫瘤的良惡性鑒別，主要以腫瘤標志物、影像學檢查、病理組織篩查作為主要手段。其中超聲檢查作為簡單、經濟且無創的篩查手段，應用較廣。血管新生是卵巢病灶血流阻力降低、血流灌注增加的病理基礎［9］。雖然，可通過微血管密度檢測作為新生血管情況測定的金標準，但由于其屬于免疫組化測定方法［10］，不適用于早期卵巢癌的評估篩查。VEGF165作為VEGF家族中能夠與腫瘤細胞膜及內皮細胞受體結合的蛋白之一，具有促內皮細胞管型生成及促腫瘤細胞生長的作用，是血管內皮增生的主要介導因子［11］。而SphK1是催化鞘氨醇磷酸化過程的重要催化酶，SphK1是與細胞膜表面的1-磷酸鞘氨醇受體（S1PR）結合的S1P結合物，具有啟動下游絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）、Rho等信號通路的特性，能夠促進內皮細胞增殖及遷移，并形成管型結果［12］。研究證實，VEGF165、SphK1在卵巢癌患者血管新生階段存在介導作用［13］。但VEGF165、SphK1需要取病灶組織樣本后才能確定患者病灶血管新生情況。因此，本研究將VEGF165、SphK1作為卵巢癌患者血管新生水平的量化指標。

卵巢癌患者HE4、CA125水平上調，與患者臨床分期、淋巴結轉移情況密切相關［14］。本研究發現，卵巢癌與卵巢囊腫患者的VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平比較差異均有統計學意義（均P＜0.001）。結合相關研究數據，不同FIGO分期患者的VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平存在顯著差異［15］。而本研究證實，PI、EDV、RI水平在不同FIGO分期患者間存在差異。據此推測，在不同FIGO分期患者間，PI、EDV、RI、VEGF165、SphK1、HE4、CA125水平均存在差異。TV-CDFI作為能夠避免腹部脂肪及腸道氣體干擾，分辨率及清晰度高的影像學篩查手段，有助于疾病早期篩查［16］。本研究經Pearson相關分析，PI與VEGF165、FIGO分期呈顯著負相關（P＜0.05）；EDV與VEGF165、FIGO分期呈顯著正相關（均P＜0.05）；RI與VEGF165、FIGO分期、CA125呈顯著負相關（均P＜0.05）。當卵巢病灶形成血管新生時，反射性的血流阻力下降，血流灌注增加，從TV-CDFI超聲血流參數PI水平變化看，PI、RI下調，VEGF165水平及FIGO分期上升［17］。EDV上升，VEGF165水平及FIGO分期上升［18］。研究證實，卵巢腫瘤組織的血流參數具有低阻力、高流速特征［19］，而EDV作為高流速的主要指標，與患者病理分期呈正相關。本研究同時發現，CA125水平與RI存在負相關，因此，對于RI指數異常降低者，應及時篩查CA125水平，以便于對疾病分期增長的早期防控。

綜上所述，卵巢癌病灶的血管新生基因VEGF165蛋白表達量可通過PI、EDV、RI水平加以反饋，RI與卵巢癌患者的CA125水平存在負相關，可在一定程度上用于CA125水平的監測，且陰道彩色超聲血流參數PI、EDV、RI水平與患者FIGO分期間存在相關性。

利益沖突：作者已申明文章無相關利益沖突。