上皮間質轉換標志物在胃癌中的表達及與Her-2的關系

王 賀,申志華,薛潤國,劉海麗,謝 靜

(河北省承德市中心醫院，河北 承德 067000)

胃癌是威脅人類健康的常見惡性腫瘤，居全部惡性腫瘤第5位，發病機制較為復雜[1]。上皮間質轉化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是惡性腫瘤發生、發展的重要步驟，在此過程中E-cadherin和Vimentin的表達變化是標志性事件。人表皮生長因子2(human epidermal growth factor receptor 2，Her-2)常用于腫瘤的研究，這個因子與藥物敏感性和預后密切相關[2]。本研究探討胃癌與EMT和Her-2的關系，從而分析EMT和Her-2在胃癌中的相互作用，為臨床的診斷和治療開拓新視野。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取承德市中心醫院2016年1月至2020年12月收治的確診為胃癌患者198例作為分析標本，患者當中男105例，女93例，年齡35～87歲。所有患者均經過病理證實胃癌，臨床病理資料完整。取癌旁組織為對照組。

1.2方法:采用免疫組化法檢測E-cadherin和Vimentin及Her-2的表達。按試劑說明書進行嚴格操作檢測試劑購自邁新生物技術有限公司。

1.3判斷標準:E-cadherin陽性：腫瘤細胞細胞膜呈棕褐色或黃色；Vimentin陽性：腫瘤細胞細胞漿呈棕褐色或黃色。由兩名病理醫師雙盲閱片，以細胞膜/細胞質/細胞核中出現黃色或黃褐色顆粒視為免疫組織化學染色陽性。評分標準依據：①染色強度：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②陽性細胞數比率：無細胞陽性著色為0分；1%～25%的細胞陽性著色為1分；26%～50%的細胞陽性著色為2分；51%～75%的細胞陽性著色為3分；大于75%的細胞陽性著色為4分；最終評分結果為染色強度和染色細胞所占比率的評分乘積；<3分為低表達，用“-”表示；≥3分為高表達，用“+”表示。Her-2判讀標準[3]：《乳腺癌Her-2檢測指南》，癌細胞無染色或≤10%癌細胞呈不完整的、微弱細胞膜染色或>10%的癌細胞細胞膜呈不完整、微弱的染色記為陰性(-)；>10%的癌細胞細胞膜呈不完整或中等強度的染色或≤10%癌細胞呈現強且完整的細胞膜著色或>10%癌細胞呈現強且完整的細胞膜染色記為陽性(+)。

1.4統計學方法:采用SPSS19.0統計學軟件進行數據分析，卡方檢驗對定性資料進行比較，P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1在胃癌及癌旁組織中，EMT標記物E-cadherin、Vimentin的表達情況:E-cadherin在細胞質與細胞膜表達，Vimentin在細胞質表達；胃癌組織中E-cadherin的陽性表達率(77.27%)，Vimentin的陽性表達率(13.13%)，癌旁組織中E-cadherin的表達(97.98%)，Vimentin的陽性表達率(2.02%)；兩者相比，具有明顯差異性，且差異有統計學意義(P<0.05)。見圖1，表1、2。

表1 胃癌和癌旁組織中EMT標記物E-cadherin的表達水平比較n(%)

表2 胃癌和癌旁組織中EMT標記物Vimentin的表達水平比較n(%)

2.2EMT標記物E-cadherin、Vimentin與胃癌臨床病理特征的關系:EMT標記物E-cadherin、Vimentin的表達與患者的性別、年齡無關(P>0.05)，與腫瘤的分化程度、浸潤深度和是否有淋巴結轉移有關(P<0.05),見表3、4。

表3 胃癌病理特征與E-cadherin的表達

表4 胃癌病理特征與Vimentin的表達

圖1 ①E-cadherin在胃癌組織中的表達；②E-cadherin在癌旁組織中的表達；③Vimentin在胃癌組織中的表達；④Vimentin在癌旁組織中的表達；⑤Her-2在胃癌中的表達(①③⑤為癌組織，②④為癌旁組織SP×100)

2.3胃癌中Her-2的表達與EMT標記物E-cadherin、Vimentin的相互關系:198例胃癌組織中有76例 her-2(+)，與Her-2(-)的胃癌病例相比較，her-2(+)的病例中E-cadherin 的表達降低，Vimentin 表達增加，檢驗得出差異具有統計學意義(P<0.05，)。見圖1，表5、6。

表5 Her-2表達與E-cadherin的關系

表6 Her-2表達與Vimentin的關系

3 討 論

近些年，隨著人們飲食習慣及生活規律改變，胃癌的發生率呈逐年上漲的趨勢。很多學者在研究胃癌的過程中，探尋了不同的研究路徑，EMT正是這些研究路徑中備受人們關注的。EMT參與了多種惡性腫瘤的發生發展[4]。

本實驗通過標記胃癌和癌旁組織中EMT標記物Vimentin和E-cadherin的表達差異性，證實了EMT與胃癌的發生密切相關；E-cadherin是EMT發生的重要標志之一，E-cadherin的低表達會促進腫瘤發生侵襲或轉移。同時發現EMT相關蛋白的表達與年齡、性別關系不大，而與腫瘤的分化程度、浸潤深度以及是否有淋巴結轉移關系密切。E-cadherin是上皮標記物，在相對正常的癌旁組織中表達高于胃癌組織，這是由于胃癌組織中發生EMT現象導致E-cadherin的表達缺失；Vimentin是間質標記物，相對正常的癌旁組織中的表達顯著低于癌組織中的表達，這也是EMT發生的有力證明；在低分化胃癌中E-cadherin的表達低于高-中分化胃癌，相反Vimentin的表達高于高-中分化胃癌的表達；浸潤深度超過肌層的胃癌E-cadherin的表達低于未浸透肌層的胃癌，相反Vimentin的表達高于未浸透肌層的胃癌；有淋巴結轉移的胃癌病例中E-cadherin的表達低于無淋巴結轉移的胃癌，相反Vimentin的表達高于無淋巴結轉移的胃癌，這與上述的研究相符合，更證實了在胃癌發生、發展中存在EMT現象。

日常診斷和治療過程中，Her-2是常用的腫瘤臨床靶向治療的重要靶點，尤其在乳腺癌的治療中發揮重要作用[5]。相關研究證實[6]，在乳腺癌中Her-2的表達與EMT具有密切關系，但在胃癌中類似的研究國內較少，因此我們在胃癌中，檢測Her-2的表達，并將Her-2的表達情況與EMT標記物Vimentin和E-cadherin相關聯分析，通過專業軟件的顯示，我們發現her-2(+)與Her-2(-)的胃癌病例相比較，Her-2(+)的病例中E-cadherin的表達降低，Vimentin表達增加。

實驗最后，我們發現，EMT在胃癌的發生、發展起到重要作用，同時Her-2的表達也影響EMT標志物的表達，究竟是EMT與Her-2具有直接相關性，還是EMT與Her-2同時在胃癌表達還有待繼續探討，但是我們的結論為進一步探討胃癌的診斷和治療的方向開拓了新思路。