紫外分光光度法快速檢測百草枯中毒

陳姿如，杜書明

百草枯(paraquat, PQ)，是一種快速滅生性除草劑，可經由皮膚、黏膜、呼吸道、消化道等進入人體，以肺部分布最多，損傷最大，肺纖維化伴呼吸衰竭是患者中毒后期死亡的主要原因，且因其在臨床上沒有特效解毒的手段，病死率高達80%以上[1，2]。我國2016年7月禁止生產和使用百草枯，但臨床上百草枯中毒案例依舊存在。中毒患者體內百草枯濃度與病死率有著密切的關系，測定患者血漿中百草枯濃度不僅有助于準確診斷，并對制定合理的治療方案有重要意義。本實驗旨在探討使用合適的樣品前處理方法，建立靈敏、快速檢測百草枯中毒的紫外分光光度法，為基層醫院快速診斷百草枯中毒提供幫助。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 采用UV-2600紫外/可見分光光度計(上海天美科學儀器有限公司)；7820氣相色譜儀(山東魯南瑞紅化工儀器有限公司)，氮磷檢測器(NPD)，DB-5毛細色譜柱(30 m×0.23 mm×0.25 μm)，LC-LX-H165A高速離心機。試劑：保險粉(連二亞硫酸鈉)，碳酸氫鈉，飽和氫氧化鈉溶液(現配)，20%高氯酸甲醇溶液，20%硼氫化鈉溶液，環己烷化學試劑均為分析純，百草枯對照品購自上海甄準生物科技有限公司。

1.2 試驗方法 抽取患者靜脈血3 ml(同時做健康人對照)，3000 r/min高速離心后，取0.5 ml血漿于帶蓋的5 ml塑料試管中，加新鮮配制的20%高氯酸甲醇溶液0.2 ml 充分振蕩30 s混勻，以 12 000 r/min高速離心10 min。取上清液0.5 ml，加入碳酸氫鈉0.2 mg堿化和連二亞硫酸鈉0.5 mg顯色，再加飽和氫氧化鈉溶液0.1 ml增色，pH>14，采用50 μl微量比色池，設置200～700 nm波長自動掃描，以蒸餾水做基線測量，掃描待測液，百草枯吸收峰出現在紫外區(395±2)nm和可見光區(605±2)nm，空白液掃描不顯色，無吸收峰，記錄最大吸收峰(605±2)nm吸光度，查標準曲線或回歸方程求出血漿中百草枯含量。另……