艾滋病臨床診斷中應用抗體檢測與核酸檢測的優勢分析

史玲玲 董 林

（河南省三門峽市中心醫院醫學檢驗科，河南三門峽 472000）

艾滋病是全球關注的傳染病，目前并無確切有效的根治方案，患者在感染人類免疫缺陷病毒（HIV）后病毒侵襲T 淋巴細胞，造成細胞免疫損傷，免疫系統破壞后可發生條件致病菌感染及各類惡性腫瘤，盡早診斷疾病有助于臨床治療方案的擬定，早期進行疾病干預，控制二次傳播。臨床艾滋病患者的診斷主要依據《全國艾滋病檢測技術規范》[1]，確定患者發生了HIV 感染的實驗室判斷依據為血清存在HIV 抗體，篩查陽性者經過確證試驗后方可下達臨床陽性報告，才能進行下一步的治療、隨訪等工作。抗體出現表明患者一定存在HIV 感染，但艾滋病患者HIV 抗體形成需要時間，抗體檢測可出現漏診；HIV 病毒的RNA 較抗體先出現，此時可應用PCR-熒光法進行病毒載量的檢測，以判斷是否發生了HIV 感染，降低窗口期的漏診率，但核酸檢測推廣難度較大，現以100 例艾滋病確診患者為實驗對象，進行以上兩種檢測方法的優勢分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2017 年1 月至2020 年2 月已經確診為HIV 感染的艾滋病患者為研究對象，以回顧性研究方式進行臨床資料整合與分析，其中72 例患者為初次抗體陽性但確證試驗（免疫印跡法試驗）不確定，后經二次隨訪、艾滋病生物樣本庫確診陽性，結合臨床癥狀及相關檢查判斷為艾滋病早期感染者，取其首次血樣為實驗進行對象；通過艾滋病疫情網絡直報系統獲得28 例艾滋病感染中晚期患者血樣，且CD4+淋巴細胞計數<50 個/mL[2]，此28 例患者均有艾滋病中晚期相關癥狀。100 例患者中男性70 例，女性30 例；年齡19～66 歲，平均（46.45±6.35）歲。

1.2 方法：對所有患者血樣進行篩查試驗、確證試驗、CD4+淋巴細胞計數檢測及核酸檢測。抗體檢測采用酶聯免疫試驗法，選擇第四代HIV ELISA 試劑，快速診斷試劑則為雅培HIV 硒標試劑；確證試驗為免疫印跡試驗；流式細胞儀及相關試劑完成CD4+淋巴細胞計數檢測；核酸檢測應用核酸序列擴增試驗技術及配套試劑進行檢測。

1.3 觀察指標：比較兩種檢測方法對于早期及中晚期艾滋病患者病毒感染準確性，并分析兩種檢測方式的診斷效能。

1.4 統計學分析：運用SPSS 22.0 軟件進行處理，診斷準確性采用百分比表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方法對于不同時期艾滋病患者病毒感染準確性的比較：核酸檢測對早期艾滋病患者病毒感染的診斷準確性為97.22%，顯著高于抗體檢測診斷準確性86.11%，差異有統計學意義（P<0.05）。中晚期艾滋病患者病毒感染抗體檢測診斷準確性92.86%，核酸檢測診斷準確性為82.14%，兩者對比不具有統計學意義（P>0.05），詳見表1。

表1 兩種檢測方法對于不同時期艾滋病患者病毒感染準確性比較

2.2 兩組診斷效能比較：在艾滋病診斷中核酸檢測的曲線下面積最大，明顯高于抗體檢測診斷，差異具有統計學意義（P<0.05），詳見表2。

表2 兩組診斷效能比較 （%）

3 討論

機體在感染HIV 后發生的疾病為艾滋病，該病具有傳染性，患者自身表現為細胞免疫缺陷引起的各類并發癥。HIV 為逆轉錄病毒，并具有攜帶RNA形式遺傳信息，人類在感染此病毒后，病毒RNA 基因組通過病毒編碼產生DNA 并與宿主的細胞DNA 進行整合，從而病毒可長時間潛伏于人體并不產生癥狀，部分患者在10 年內逐漸發展為艾滋病患者[3]，而艾滋病患者盡早的接受抗病毒治療對于其機體免疫功能的恢復及HIV 水平的控制均有積極意義，因此早期準確的診斷HIV 病毒感染是艾滋病患者接受針對性干預治療的前提。無癥狀期間HIV 的感染診斷主要依靠臨床實驗室檢測，我國HIV 檢測流程基本分為篩查階段及復檢確證階段，篩查陽性的病例中存在假陽性情況，保證復檢準確性是臨床有序干預艾滋病患者的證據。抗體檢測與核酸檢測均屬于我國艾滋病檢測技術規范中的初篩陽性樣本補充試驗內容，可規范并未規定具體哪一種檢測手段為補充試驗方法，合理應用抗體檢測及核酸檢測對HIV 感染確診有重要意義。

酶聯免疫試驗聯合檢測是抗體檢測方法中的一種，隨著醫療技術的進步此種檢測方法發展到第四代，血清轉換窗口期較第三代酶聯免疫試驗縮短4～8d[4]，大大提高了檢測靈敏性、準確性及特異性；HIV 抗體形成后會一直存在，且隨疾病進展艾滋病患者機體抵抗力嚴重下降，HIV 病毒“復蘇”大量復制，病毒載量持續增加，抗體檢測特異性、靈敏性更高，因此臨床將抗體檢測作為實驗室診斷HIV 感染的金標準，但是有研究表明HIV 感染窗口期或急性感染者抗體檢測（特別是免疫印跡法）有概率出現陰性或不確定[5]，潛在感染者得不到及時診斷，阻礙了艾滋病防治工作的有效開展。核酸檢測包括定量檢測與定性檢測，HIV 感染診斷通常為定性檢測，患者在HIV 感染后7～10d 血清中即可出現HIV RNA，核酸檢測對于該標志物有較高的診斷準確率，因此核酸檢測對于急性期或窗口期HIV 感染均可診斷，有效降低此時期病毒造成的風險。有學者認為對于免疫印跡法不確定患者及初步篩查陰性者采用核算定量檢測有較高的診斷特異性及靈敏性，建議首次免疫印跡法檢測不確定及陰性者立即實施核酸檢測，縮短疾病確診時間，利于窗口期、急性期患者的早期診斷[6]。但是部分血清轉化前期或者發生高危行為的感染者預防性應用了抗病毒藥物后，即使存在感染但病毒復制遭到抑制，窗口期延后，核酸檢測不能檢出[7]；艾滋病中晚期患者遵醫囑規律服藥，病毒復制受限，病毒載量即核算反而降低，故存在一定的漏診。核酸定性檢測有其局限性，即使單次檢測結果為陰性亦只能表明本次結果為陰性，并不代表患者并未發生HIV 感染，檢測陽性則可作為HIV 感染的輔助診斷指標；此外，核酸檢測操作復雜、成本高，鄉鎮等地區無法普及。病毒RNA 較抗體出現時間早1 至2 周[8]，核酸檢測能為患者是否發生HIV 感染提供最早期的輔助判斷意見；隨后病毒RNA 片段大量復制，人體機能做出相應反應，病毒載量逐漸降低，出現抗原甚至抗體，抗體形成后應用抗體檢測法對疾病檢測準確率更高，因此為了保證檢測準確率應針對患者HIV 感染時間靈活應用檢測方式。本研究中早期艾滋病患者的核酸檢測準確率高于抗體檢測，證明了核酸檢測在HIV 早期感染診斷中的優勢；中晚期艾滋病患者的抗體檢測準確性高于核酸檢測，但尚未構成統計學意義，筆者分析一方面與樣本量有關，一方面為部分晚期艾滋病患者免疫功能幾乎完全淪陷，抗體難以表達，故干擾了抗體檢測結果。就診斷效能分析，相對而言抗體檢測診斷特異性較差，假陽性診斷概率較高，核酸檢測略顯優勢。

綜上所述，艾滋病患者的HIV 檢測應根據疾病進程選擇檢測方法，核酸檢測適用于早期艾滋病患者、抗體檢測則對中晚期艾滋病患者有更高的診斷準確性，兩者相互配合能降低漏診、誤診概率，保證診斷準確性、特異性。