丹白顆粒對LPS誘導的子宮內膜上皮細胞TGF-β/Smad通路及上皮間質轉化的影響

王淑蘭 潘劍榕

子宮內膜炎是由于細菌入侵宮腔而導致的子宮內膜持續性炎癥病變，主要致病菌是大腸桿菌、鏈球菌等革蘭陰性菌[1]，臨床表現通常無癥狀或者月經失調、白帶增多和性質異常、下腹部墜痛等，但病情嚴重者可在生殖方面引起不孕癥[2]。臨床治療子宮內膜炎常用口服抗生素的方法，但細菌易產生耐藥性，治療效果不佳。丹白顆粒是一種中成藥，具有清熱化瘀，祛濕止痛的功效，常用于慢性盆腔炎。脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)是大腸桿菌細胞壁上的主要毒性因子，可誘導子宮內膜炎的發生[3]。上皮間質轉化(eputhelial-mesenchymal transition，EMT)是指在某些因素作用下上皮細胞轉化為間質細胞的一種生物現象[4]。通常情況下，發生EMT后，上皮組織不再具有保護和吸收的作用，上皮標記因子如鈣黏蛋白(E-cadherin)表達量減少，同時間質標記因子如波形蛋白(vimentin)表達量升高[5]。轉化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)在誘發MET過程中起重要作用，而Smads蛋白是TGF-β下游的信號蛋白，其中Smad2和Smad3是參與TGF-β1信號從細胞外傳導至細胞核內的關鍵因子[6]。本研究采用細胞體外實驗，旨在探究丹白顆粒含藥血清對LPS誘導的子宮內膜上皮細胞TGF-β/Smad通路及EMT的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗細胞與動物:人子宮內膜上皮細胞(貨號：CP-H058)購自武漢普諾賽生命科技有限公司。120只SPF級健康小鼠(雄性，6周齡，體重23～27 g)購自重慶醫科大學動物實驗中心，符合國家實驗動物倫理保護標準及相關法律規定。實驗期間小鼠自由攝食和飲水。

1.1.2 實驗藥物:丹白顆粒(8 g×10袋)生產廠家山東新時代藥業有限公司，小鼠等效劑量根據人和動物之間按體表面積折算的等效劑量比計算，按生藥量計質量濃度為2、1、0.5 g/ml分別設為高、中、低劑量[7]。……