種植體周圍齦溝液中IL-6、CRP及氧化應激標志物水平與種植體周圍炎的關系

喻 莉，許益萌，楊一帆

1.西北大學附屬醫院/西安市第三醫院口腔科，陜西西安 710000；2.空軍軍醫大學附屬口腔醫院口腔正畸科，陜西西安 710032

現如今，種植義齒技術被臨床廣泛應用于改善口腔功能和外觀的治療中[1]。由于細菌感染、患者自身的適應性、種植體設計不合理等將導致種植體周圍炎的發生，種植體周圍炎是宿主對種植體的炎性反應并能夠進一步導致種植體脫落、周圍組織破壞、骨結合失敗，其支持骨的喪失[2-3]。種植體周圍炎與種植體周圍齦溝液(PICF)中白細胞介素(IL)、C反應蛋白(CRP)、氧化應激指標的變化有關[4-5]，本研究通過比較種植體周圍炎患者、健康種植體者PICF中IL-6、CRP與氧化應激標志物超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GP-Phx)及丙二醛(MDA)等指標水平，探討這些指標與牙周探診深度(PD)、菌斑指數(PLI)、齦溝出血指數(SBI)的關系，進一步探討種植體周圍炎的發病原理，明確種植體周圍炎發生過程中的炎癥因子表達情況，為早期診斷和治療種植體周圍炎提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年10月至2020年10月西北大學附屬醫院口腔門診實施種植修復的100例(141個種植牙位)患者為研究對象，種植完成后12個月復查，其中32例(48個種植牙位)患者發生種植體周圍炎(炎癥組)、68例(93個種植牙位)患者為健康種植體(對照組)。炎癥組男20例，女12例；年齡23.0～65.0歲，平均(41.5±12.0)歲；平均體質量指數(BMI)為(23.7±2.3)kg/m2。對照組男44例，女24例；年齡27.0～65.0歲，平均(43.0±11.6)歲；平均BMI為(23.5±2.0)kg/m2。兩組患者年齡、性別、BMI比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。納入標準：(1)患者在西北大學附屬醫院接受種植體治療；(2)種植體周圍炎的PD>3.0 mm、SBI>2.0；(3)患者接受隨訪時間至少6個月。排除標準：(1)有凝血功能疾病者；(2)有免疫系統疾病者；(3)吸煙、口腔衛生狀況較差者；(4)有嚴重的肝、腎功能疾病者；(5)惡性腫瘤者；(6)近3個月使用抗菌藥物或非甾體類抗炎藥物者。本研究經西北大學附屬醫院醫學倫理委員會批準。

1.2PICF的采集及指標檢測

1.2.1PICF的采集 將醫用濾紙剪成2 mm×10 mm的濾紙條，經高溫、高壓滅菌后置于無菌微量離心管中，稱重后做好標記待用。清潔口腔后，用消毒棉球隔濕，吹干牙面后等待1 min。將裁剪好的濾紙條插入PICF中，當濾紙條遇阻力后停止，隨后取出濾紙條放入原始離心管中稱重。記錄后加入200 μL 磷酸鹽緩沖液(pH=7.4)，將離心管置于搖動震蕩機上震蕩1 h，低溫離心，離心后取上清液并保存于-80 ℃冰箱內待測。

1.2.2檢測指標及方法 檢測炎癥組和對照組PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平。

1周內從-80 ℃冰箱中分別取炎癥組、對照組的PICF 2 mL，先放置在-20 ℃冰箱中待測，準備好標本后檢測IL-6及CRP水平，使用電化學發光全自動免疫分析儀進行檢測，操作嚴格按照說明書進行，檢測所用試劑盒購自福建新大陸生物技術有限公司。

將凍存的離心管從-80 ℃冰箱取出，在室溫下解凍，搖晃1 h，4 ℃下離心(2 000 r/min，20 min)后取上清液，使用酶聯免疫吸附試驗檢測標本中SOD、MDA和GP-Phx的吸光度值，根據試劑盒說明書計算出相應水平并記錄。

1.3牙周健康指標檢測[6-7](1)PD測定：使用牙周探針檢查種植體和健康牙的4個位點的PD值，分別是近中頰側、遠中頰側、近中舌側和遠中舌側，使牙周探針平行于與種植體長軸，并輕輕貼緊牙根減輕患者的疼痛感，再將牙周探針深入齦溝底，記錄此刻探針所示刻度。(2)PLI測定：分別檢測種植體與健康牙，評價標準為表面無斑點為0分，表面輕劃可見斑點為1分，肉眼可見菌斑為2分，表面有大量軟垢沉積為3分。(3)SBI測定：分別檢查種植體和健康牙的SBI值，評價標準為牙周探診無出血現象為0分，探針處出血呈點狀為1分，齦溝內成線狀出血2分，沿齦緣擴展出血或溢出齦緣為3分。

2 結 果

2.1炎癥組和對照組的PD、PLI、SBI比較 炎癥組患者種植體的PD、PLI、SBI測定值均明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 炎癥組和對照組的PD、PLI、SBI比較

2.2炎癥組和對照組的PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平比較 炎癥組PICF中的IL-6、CRP水平均高于對照組(P<0.05)，SOD、GP-Phx水平均低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 炎癥組和對照組的PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平比較

2.3相關性分析 炎癥組患者種植體的PLI、PD、SBI與PICF中IL-6、CRP水平均呈正相關(P<0.05)，與PICF中SOD、GP-Phx水平呈負相關(P<0.05)，見表3。

表3 相關性分析結果

3 討 論

口腔種植體的應用一方面可以使人們口腔更為美觀，另一方面可以使患者的口腔功能得到改善。然而臨床上種植體的成功率不甚理想，種植體周圍炎往往是由細菌感染直接導致的[8]。目前臨床上主要通過兩種方法獲得患者種植體周圍組織情況，一是臨床醫師肉眼直接觀察，另一個是采用影像學來檢查?？谇会t生的主觀判斷不夠科學，容易造成誤診、漏診，缺乏客觀性數據證明，而影像學檢查雖然更為精確，但是缺乏即時性[9]。為了了解患者種植體周圍炎的情況，收集患者的PICF，分析影響種植體周圍炎的指標，如IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx等，成為近年口腔醫學領域的研究熱點。

IL-6作為促炎因子，可引起炎癥因子水平紊亂，誘導中性粒細胞或細菌產生膠原酶活性，從而導致牙骨質磷酸鹽的分解、鈣鹽沉積紊亂，加劇骨質的吸收[10]。CRP是一個重要的反映炎癥的生物學指標，CRP水平的升高往往提示炎癥細胞的富集，PICF中CRP水平有可能成為預測種植體周圍炎嚴重程度的重要指標之一[11]。SOD、MDA和GP-Phx屬于抗氧化酶體系，研究報道MDA是氧化應激產物，其水平會隨著牙周炎癥程度的增加而升高，可以反映炎癥對組織的損傷程度[12-13]。SOD是自由基O2-的清除酶，GP-Phx可清除體內儲存或生成的過氧化物，SOD和GP-Phx均可作為機體氧化應激的生物標志物[14]。

為了研究PICF中IL-6、CRP及氧化應激標志物水平變化與種植體周圍炎的關系，本研究將在西北大學附屬醫院口腔門診實施種植修復的100例患者分為兩組進行隨訪研究，檢測兩組患者PICF中IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx水平與PD、PLI、SBI的關系。結果發現炎癥組患者種植體的PD、PLI和SBI的測定值明顯高于對照組。IL-6、CRP、SOD、MDA、GP-Phx的水平跟種植體周圍炎的活動期具有相關性：炎癥組患者種植體的PLI、PD、SBI與PICF中IL-6、CRP水平均呈正相關，這說明種植體周圍部位IL-6和CRP水平可以在一定程度上反映該部位的炎癥程度；炎癥組患者種植體的PLI、PD、SBI與PICF中SOD、GP-Phx水平均呈負相關，說明PICF中SOD、GP-Phx持續維持在較低水平，局部炎性反應越明顯。炎癥組PICF中IL-6、CRP水平比對照組高，這是由于IL-6參與種植體周圍炎的發生，在種植體周圍炎組織中高表達，IL-6還是刺激機體產生CRP的重要細胞因子，IL-6等因子在種植體周圍炎中的表達水平比牙周組織更高，從而刺激CRP的合成，導致炎癥狀態下CRP水平升高。

炎癥組SOD、GP-Phx水平較對照組低，而MDA水平較對照組高。這可能是炎癥狀態下，種植體周圍會產生較多的自由基，機體會大量消耗抗氧化酶來清除自由基及其累積產物，導致被大量消耗的自由基的數量急劇減少，水平降低。當機體內氧化反應發生紊亂時，體內活性氧攻擊細胞膜上的不飽和脂肪酸，產生脂質過氧化物，這些脂質過氧化物最終反應變成MDA，造成種植體周圍的MDA水平升高。推測氧化應激標志物SOD、MDA和GP-Phx水平的改變與種植體炎癥程度具有相關性，種植體周圍炎存在氧化應激現象，可以為種植體周圍炎的早期預防和診治提供相關的理論基礎。不過究竟是炎性反應導致的氧化應激現象，還是氧化應激加速了炎性反應仍有待進一步求證，為種植體周圍炎的預防和診治提供更詳細的理論依據。

趙國強等[15]的研究表明，炎癥種植體組PLI、SBI、PD及PICF中炎癥因子水平高于健康種植體組和對照組；SBI、PLI、PD與炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α、MMP-8水平呈正相關。本研究不僅探討了種植體周圍炎與具有代表性的炎癥因子IL-6、炎癥早期生物標志物CRP的水平變化關系。還探討了PICF中氧化應激標志物SOD、GP-Phx和MDA的水平變化，結果表明種植體周圍炎的發生一定程度依賴于氧化應激標志物水平的變化，種植體周圍炎存在氧化應激現象。本研究雖然說明了PICF中IL-6、CRP及氧化應激標志物水平與種植體周圍炎的關系，但研究也存在不足之處：沒有明確氧化應激反應與炎癥作用的機制，尚不明確兩者是如何相互影響的。在接下來的研究中，需要深入地探討兩者之間的關系，為早期預防、診斷及臨床治療種植體周圍炎提供一定的理論依據。

綜上所述，種植體的PICF中炎癥指標及氧化應激標志物水平變化可反映炎癥程度。