臨床微生物檢測(cè)系統(tǒng)的性能驗(yàn)證及注意事項(xiàng)

文 馮佼 （四川省鄰水縣人民醫(yī)院）

本篇文章的主體中心在于分析并總結(jié)臨床微生物常用檢測(cè)系統(tǒng)的性能以及有關(guān)注意事項(xiàng)，并提出在臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化水平持續(xù)提升的基礎(chǔ)上，儀器的性能評(píng)價(jià)也是需要重視的。檢測(cè)系統(tǒng)的性能評(píng)估是提升臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的基本前提，以此推進(jìn)ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，并保障微生物實(shí)驗(yàn)室的服務(wù)與檢測(cè)水平得到不斷提升。

制訂科學(xué)的驗(yàn)證計(jì)算

可由醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室的主管人員對(duì)驗(yàn)證計(jì)劃進(jìn)行制訂，在此基礎(chǔ)上還要確定驗(yàn)證計(jì)劃的起始時(shí)間、共同參與的工作人員以及計(jì)劃花費(fèi)的時(shí)間等。比如，有醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)必須嚴(yán)格根據(jù)行業(yè)的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)加以校對(duì)，若無(wú)參考標(biāo)準(zhǔn)，儀器即需根據(jù)我國(guó)規(guī)定的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（YY/T0654-2008）文件來(lái)加以校對(duì)，一般情況下，儀器廠家均會(huì)授權(quán)相應(yīng)的工程師來(lái)加以校對(duì)，現(xiàn)場(chǎng)還需安排相關(guān)人員確認(rèn)監(jiān)督，若無(wú)校對(duì)，即可要求對(duì)應(yīng)的廠商進(jìn)行解決，直至與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)文件報(bào)告相符合即可。實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員以及微生物檢測(cè)負(fù)責(zé)人要對(duì)系統(tǒng)分析性能加以評(píng)價(jià)，確保系統(tǒng)性能的正常工作。

依照計(jì)劃完成微生物檢測(cè)系統(tǒng)性能驗(yàn)證

精密度驗(yàn)證可參照CLSI（美國(guó) 臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所）出具的EP15-A2文件，取出2個(gè)水平質(zhì)控品，并對(duì)其展開(kāi)檢測(cè)工作。應(yīng)注意的問(wèn)題的是相同批號(hào)質(zhì)控品必須完善準(zhǔn)備，批間批內(nèi)驗(yàn)證的過(guò)程中切不可產(chǎn)生質(zhì)控品不足引發(fā)的批號(hào)更換現(xiàn)象。重復(fù)性精密度也就是我們通常所說(shuō)的批內(nèi)精密度，于室內(nèi)質(zhì)控需要確保在控的基礎(chǔ)上將呈現(xiàn)不同水平（濃度）質(zhì)控品于插入至患者樣本中，并在此基礎(chǔ)上實(shí)施檢測(cè)，對(duì)其標(biāo)準(zhǔn)差、均值、變異系數(shù)等加以計(jì)算，對(duì)項(xiàng)目的批內(nèi)精密度進(jìn)行驗(yàn)證（總誤差可＜1/4CLIA’88）。

中間精密度也就是臨床說(shuō)的批間精密度，于室內(nèi)質(zhì)控（同樣保證在控）的基礎(chǔ)上，2個(gè)不同濃度質(zhì)控品插入標(biāo)本實(shí)施檢測(cè)，每一次均要測(cè)定兩遍，取兩個(gè)檢測(cè)數(shù)據(jù)的平均值，連續(xù)檢測(cè)20天，對(duì)其標(biāo)準(zhǔn)差、均值以及變異系數(shù)加以計(jì)算。驗(yàn)證的批間精密度，其評(píng)判可＜1/3CLIA’88。而在此需注意的問(wèn)題是，對(duì)于一些允許總誤差相對(duì)小的項(xiàng)目檢測(cè)，若未嚴(yán)重控制其質(zhì)量，將無(wú)法準(zhǔn)確通過(guò)評(píng)語(yǔ)，這還需要從操作手、試驗(yàn)材料、環(huán)境、儀器以及方法等不同環(huán)節(jié)上加以控制。

對(duì)于準(zhǔn)確度的驗(yàn)證可依照CLSI EP9A2文件來(lái)實(shí)施，對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)加以統(tǒng)計(jì)，并參與12個(gè)月的衛(wèi)生部間質(zhì)評(píng)成績(jī)，使用本實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)值，并在此檢測(cè)衛(wèi)生部門(mén)臨檢中心發(fā)入出的室間質(zhì)控品，對(duì)其檢測(cè)值以及靶值的相對(duì)偏倚加以計(jì)算，同時(shí)統(tǒng)計(jì)其平均值，偏倚值總誤差可＜1/2CLIA’88。值得注意的是，驗(yàn)證過(guò)程中最好能保證有12個(gè)月的室間質(zhì)控成績(jī)，并且還應(yīng)進(jìn)行間質(zhì)評(píng)，以?xún)?yōu)良為最佳。

差異結(jié)果的解決措施：由CLSIM52文件來(lái)為差異性結(jié)果指導(dǎo)相關(guān)的解決方法，在鑒定驗(yàn)證的過(guò)程中，可由原來(lái)已經(jīng)過(guò)驗(yàn)證系統(tǒng)與新系統(tǒng)檢測(cè)相同的菌株，若2個(gè)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)出明顯差異，即可運(yùn)用第3種方式加以檢查仲裁。在情節(jié)藥敏實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證時(shí)，若2個(gè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)出顯著差異性，實(shí)驗(yàn)室即可對(duì)藥敏結(jié)果出現(xiàn)差異菌株進(jìn)行二次檢測(cè)，舊系統(tǒng)與新系統(tǒng)中用同一培養(yǎng)液一式三份或平行展開(kāi)二次檢測(cè)。如果二次檢測(cè)的結(jié)果相一致，即表明驗(yàn)證已通過(guò)，若2個(gè)系統(tǒng)二次檢測(cè)結(jié)果還存在差異性，即可通過(guò)CLSI參考方法對(duì)檢測(cè)的差異問(wèn)題進(jìn)行解決。

微生物檢測(cè)系統(tǒng)性能驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與人員培訓(xùn)

（1）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。實(shí)驗(yàn)室在對(duì)系統(tǒng)性能展開(kāi)驗(yàn)證之前，還需對(duì)其藥敏檢測(cè)系統(tǒng)以及商品化鑒定的有關(guān)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估與思考，這類(lèi)風(fēng)險(xiǎn)具體包含了系統(tǒng)變化相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)、錯(cuò)誤結(jié)果風(fēng)險(xiǎn)等，可根據(jù)CLSI EP23文件來(lái)加以評(píng)定，同時(shí)，還應(yīng)與實(shí)際情況相結(jié)合來(lái)制定實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方案，將評(píng)估結(jié)果記錄下來(lái)，以供查驗(yàn)核對(duì)。

（2）人員培訓(xùn)。在實(shí)驗(yàn)室安裝藥敏檢測(cè)與微生物鑒定系統(tǒng)后，要注意由廠家的技術(shù)人員對(duì)醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)教育，為了保證工作人員的學(xué)習(xí)質(zhì)量，還可配合考核來(lái)檢查，合格后即可進(jìn)行下一步的審核報(bào)告與儀器操作工作。廠家與工作人員在性能驗(yàn)證前要檢測(cè)并保障儀器系統(tǒng)的正常運(yùn)行。據(jù)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)系統(tǒng)對(duì)工作人員的培訓(xùn)情況與考核成績(jī)記錄下來(lái)。實(shí)驗(yàn)室對(duì)藥敏系統(tǒng)與微生物鑒定性能驗(yàn)證方案即包含了工作人員在檢測(cè)中得到可重復(fù)且正確鑒定以及藥敏結(jié)果的工作能力。

結(jié)束語(yǔ)

臨床微生物檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中屬于一項(xiàng)重要的學(xué)科，但是因?yàn)槭止げ僮飨鄬?duì)較多，而自動(dòng)化程度低，所以無(wú)法與其他專(zhuān)業(yè)組產(chǎn)生對(duì)比性。隨著ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量以及能力要求的提升，臨床微生物檢驗(yàn)作為檢驗(yàn)科的基本組成部分，其檢驗(yàn)?zāi)芰εc質(zhì)量也要不斷提升。近些年以來(lái)，臨床醫(yī)生物檢驗(yàn)自動(dòng)化水平有所提升，它的檢驗(yàn)系統(tǒng)的性能評(píng)價(jià)也將十分重要。從上文可知，美國(guó)的CLSI文件體系藥敏與微生物鑒定系統(tǒng)性能驗(yàn)證上具有一定的參考性，此文件體系相對(duì)較嚴(yán)格，執(zhí)行大成本也不低，它可從正確度與精密度指標(biāo)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證，所出具的質(zhì)控要求相對(duì)明朗，值得臨床推廣使用。