結核分枝桿菌T細胞斑點試驗、肺泡灌洗液T細胞亞群檢測在肺結節病和肺結核鑒別診斷作用

鄧 群 劉建鋒 姚佳惠子 黃 健

江西省胸科醫院結核科，江西南昌 330006

肺結核是傳染性疾病，傳播的范圍較大，因此在發現疾病時需要對患者實施積極治療，患者發生肺結核疾病時，若治療不及時會發展為肺纖維化，還容易導致肺部形成干酪樣變或者形成空洞，容易對患者的肺部造成不可逆的傷害，若結核病菌傷害到大血管，還有可能引起患者咳血或者肺部囊腫，對患者的身體傷害非常大，雖然現在的醫療水平可以治療[1]，但是治愈后對患者的日常生活會造成一定的影響，使患者生活質量降低，因此對于肺結核患者的治療原則為早發現早治療，預防對肺部造成損傷。肺結節也是常見疾病，容易使患者多系統受累，具有多種臨床表現，由于上述兩種疾病具有相似之處，常常發生誤診情況，而實施一項有效的診斷較為重要，因此，本研究對結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗及肺泡灌洗液T 細胞亞群檢測在肺結節病和肺結核鑒別診斷中的作用進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2020年3月江西省胸科醫院結核科收治的60 例肺部疾病患者作為研究對象，根據疾病的類型不同，將其分為觀察組（肺結節病，30 例）和對照組（肺結核病，30 例）。觀察組中，男20 例，女10 例；年齡30～70 歲，平均（56.17±1.21）歲；病程3～8 個月，平均（5.33±0.54）個月。對照組中，男21 例，女9 例；年齡29～69 歲，平均（56.19±1.23）歲；病程3～8 個月，平均（5.31±0.51）個月。兩組患者的一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準，參與研究者知情同意。納入標準：對照組患者符合肺結核診斷標準[2]；觀察組患者伴有低熱、盜汗、乏力等癥狀，符合肺結節診斷標準[3]，經過影像學檢查證實。排除標準：①心臟肝腎等重要器官功能嚴重不全者；②精神類疾病或者癡呆者；③全身免疫性疾病者。

1.2 方法

結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗：采用江西省胸科醫院的結核感染T 細胞檢測試劑，使用酶聯免疫斑點試驗，將診斷結果詳細記錄。肺泡灌洗液T 細胞亞群檢測：采用江西省胸科醫院的FACSCanto Ⅱ型流式細胞儀（上海實維實驗儀器技術有限公司）實施檢測，新鮮的肺泡灌洗液經過尼龍布經痰液和雜質過濾后，離心洗滌2 次，計數并對細胞數進行調節，加入熒光抗體室溫避光孵育20 min，加入2 ml 紅細胞裂解液，避光10 min，3000 r/min 離心5 min，離心半徑為10 cm，加入離心洗滌劑，使用0.5 ml PBS 重懸細胞，采用效準儀器將分辨率調至最佳工作狀態，使用軟件分析并且獲取數據，調節電壓，獲取細胞總數10 000 個，根據同型對照分析細胞表達情況（CD8+、CD4+、CD3+），計算CD4+/CD8+。

1.3 觀察指標及評價標準

比較兩組的陽性率及CD4+/CD8+、CD8+、CD4+、CD3+水平。T 細胞斑點試驗陽性率診斷標準：當空白對照孔內斑點數＜6 時，任一實驗孔斑點數減去空白孔斑點數≥6，結果即為陽，如果空白對照孔斑點數＞6，那么任一實驗孔斑點數大于空白孔斑點數的兩倍，結果也表示陽性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗；計數資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組T 細胞斑點試驗陽性率的比較

觀察組患者結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗中，結核感染T 細胞斑點試驗陽性患者2 例，陽性率為6.67%；對照組患者結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗中，結核感染T 細胞斑點試驗陽性患者11 例，陽性率為36.67%。觀察組的結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗陽性率低于對照組，差異有統計學意義（χ2=11.4621，P=0.0137）。

2.2 兩組患者CD4+/CD8+、CD8+、CD4+、CD3+水平的比較

觀察組患者的CD4+/CD8+、CD8+低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），CD4+、CD3+高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組患者CD4+/CD8+、CD8+、CD4+、CD3+水平的比較

3 討論

相關研究顯示，結核分枝桿菌是寄生菌的一種，一般需要在活細胞內才能成活，通過飛沫、塵埃傳播，患者通過呼吸道吸入病菌從而感染發病，結核桿菌也稱作為結核桿菌、結核菌[4-6]，感染病菌后可導致人體發生結核病，一般以肺結核疾病較為常見，結核桿菌進入人體時不會立刻發病，當人體出現免疫力下降或者吸毒后，病菌容易發生病變，導致肺結核形成，結核分枝桿菌為抗酸性桿菌[7-10]，對于營養環境要求較為嚴格，采取培養法進行病菌培養，具有繁瑣、時間較長等不足，但是結果比較準確，能夠通過肉眼直接觀察到形成的菌落，作為肺結核診斷、治療的依據，但是由于培養菌落不具備生長繁殖能力，因此只能實施藥敏試驗、菌型鑒定等[11-13]。在機體免疫細胞內，T 細胞具有多種優勢，例如功能強、數量多等，具有抗感染相關作用，成熟的T 細胞包括兩個亞群（CD4+以及CD8+），CD4+主要在輔助T 細胞上表達，能對抗原信號轉導進行識別；CD8+在抑制性T 細胞上，能對癌細胞產生殺傷作用，而兩者之間具有一定的協同作用，能維持機體免疫平衡[14-16]，反映機體免疫狀態情況等。本研究結果顯示，觀察組患者的CD4+/CD8+、CD8+低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），CD4+、CD3+高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示患者自身細胞免疫紊亂和CD4+、CD3+具有相關性，患者病情越嚴重，CD8+水平越低。

本研究結果顯示，觀察組患者結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗中，結核感染T 細胞斑點試驗陽性患者2 例，陽性率為6.67%；對照組患者結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗中，結核感染T 細胞斑點試驗陽性患者11 例，陽性率為36.67%。觀察組的結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗陽性率低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），與李芹等[17]的研究結果一致，提示檢測T 淋巴細胞亞群水平對肺結節病的鑒別診斷有重要的臨床價值。

綜上所述，在肺結節病和肺結核診斷過程中，采用結核分枝桿菌T 細胞斑點試驗、肺泡灌洗液T 細胞亞群檢測，能對上述疾病有效鑒別，值得在臨床中推廣運用。