單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉聯(lián)合亞低溫對(duì)新生兒HIE血清炎癥因子、神經(jīng)損傷及神經(jīng)行為的影響

曹 娟，王紅怡，霍開明，吳振奎，陳慧玉

(1.海南現(xiàn)代婦女兒童醫(yī)院兒科，海南 海口 571100；2.海南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院兒科，海南 海口 570311)

新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic ischemic encephalopathy，HIE)具有高致殘率等特點(diǎn)，是造成新生兒后期神經(jīng)功能障礙和死亡的一個(gè)主要原因[1]。既往研究指出，采用全身亞低溫療法進(jìn)行治療不僅可有效降低患兒全身溫度，而且可有效調(diào)節(jié)患兒腦部耗氧量，從而具有保護(hù)神經(jīng)元的作用[2]。單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉為含有唾液酸的鞘糖脂，由神經(jīng)酰胺和寡糖鏈組成，能輕易透過血腦屏障，下調(diào)興奮性氨基酸水平，減輕機(jī)體神經(jīng)毒性，促進(jìn)神經(jīng)元生長(zhǎng)分化，有助于治療HIE。為此，本文通過前瞻性隨機(jī)對(duì)照研究，分析單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉聯(lián)合亞低溫對(duì)HIE患兒血清炎癥因子、神經(jīng)損傷及神經(jīng)行為的影響，旨在探究單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉聯(lián)合亞低溫在HIE患兒中的治療效果。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1月至2019年6月于海南現(xiàn)代婦女兒童醫(yī)院收治的HIE新生兒84例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①1min Apgar評(píng)分≤3分；②足月兒；③獲得患兒家屬知情同意；④具有全身亞低溫治療的適應(yīng)證。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他先天性疾病；②宮內(nèi)感染；③顱內(nèi)出血者；④母親伴有藥物依賴史、吸毒史；⑤中途退出研究。將所有研究對(duì)象隨機(jī)分為對(duì)照組和聯(lián)合組各42例。對(duì)照組男24例、女18例，孕周(39.78±1.85)周，剖宮產(chǎn)15例、陰道分娩27例，1min Apgar評(píng)分(2.92±0.23)分，出生體重(3 002.13±346.75)g，出生時(shí)間(7.63±1.27)h，臍動(dòng)脈血pH(6.53±1.37)。聯(lián)合組男16例、女26例，孕周(39.95±2.13)周，剖宮產(chǎn)19例、陰道分娩23例，1min Apgar評(píng)分(2.86±0.26)分，出生體重(2 976.58±364.36)g，出生時(shí)間(7.54±1.31)h，臍動(dòng)脈血pH(6.64±1.32)。兩組患兒男女比例、孕周等非研究臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)海南現(xiàn)代婦女兒童醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。

1.2治療方法

兩組首先均行常規(guī)對(duì)癥治療，包括控制血壓，限制液體輸入量，糾正水、電解質(zhì)失衡，維持動(dòng)脈血?dú)猓档惋B內(nèi)壓，營(yíng)養(yǎng)支持治療，呼吸支持等。對(duì)照組采取單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉治療，將20mg單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉(國(guó)藥準(zhǔn)字H20050184)溶于50mL 0.9% NaCl溶液內(nèi)靜脈滴注治療10d，每天1次，間隔15d為1個(gè)療程，共治療3個(gè)療程。聯(lián)合組采取單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉+全身亞低溫治療，其中單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉的用法、用量與對(duì)照組相同；全身亞低溫療法：將患兒置于26℃的空調(diào)房，行全身亞低溫26～28℃的遠(yuǎn)紅外輻射，將探頭置于患兒鼻咽部，控制患兒皮膚溫度為33.0～34.5℃，鼻咽部溫度控制在33.5～34.5℃，直腸溫度為34.0～35.0℃，亞低溫維持治療3d。

1.3觀察指標(biāo)

分別于治療前和治療結(jié)束后，取兩組患兒清晨空腹外周靜脈血3mL，3 000r/min離心10min，分離血清，置于-80℃冰箱內(nèi)保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)患兒血清神經(jīng)損傷標(biāo)志物和炎癥因子的水平進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司。血清神經(jīng)損傷標(biāo)志物包括S100β蛋白、髓磷脂堿性蛋白(myelin basic protein，MBP)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)，血清炎癥因子包括白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)。神經(jīng)行為的改善狀況采用神經(jīng)行為測(cè)定評(píng)分量表(neonatal behavioral neurological assessment，NBNA)評(píng)價(jià)，該量表由一般反應(yīng)、原始反射、主動(dòng)肌張力、被動(dòng)肌張力和行為能力5個(gè)項(xiàng)目組成，總分40分，以37～40分判為正常，反之為異常[3]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1治療前后兩組患兒血清炎癥因子的比較

治療后兩組患兒血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均低于治療前(P<0.05)，且治療后聯(lián)合組患兒血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為4.982、5.894、5.791，P<0.05)，見表1。

表1 兩組患兒治療前后血清炎癥因子水平比較Table 1 Comparison of serum inflammatory factor levels before and after treatment in the two groups of

2.2兩組患兒治療前后血清神經(jīng)損傷標(biāo)志物的比較

治療后，兩組患兒血清S100β蛋白、NSE及MBP的含量均降低(P<0.05)，且治療后聯(lián)合組血清S100β蛋白、NSE及MBP含量均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為6.736、7.626、7.942，P<0.05)，見表2。

表2 兩組患兒治療前后血清神經(jīng)損傷標(biāo)志物比較Table 2 Comparison of serum nerve injury markers before and after treatment in the two

2.3兩組患兒治療前后神經(jīng)行為測(cè)定評(píng)分及不良反應(yīng)的比較

治療后兩組患兒神經(jīng)行為測(cè)定評(píng)分均明顯增高(P<0.05)，且治療后聯(lián)合組的神經(jīng)行為測(cè)定評(píng)分高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.191，P<0.05)，見表3。兩組治療期間均未發(fā)生藥物及亞低溫不耐受或其他不良反應(yīng)。

表3 治療前后兩組患兒神經(jīng)行為測(cè)定評(píng)分比較分)Table 3 Comparison of neurobehavioral measurement scores of the two groups of children before

3討論

既往研究報(bào)道，亞低溫療法可阻滯多種炎性介質(zhì)的釋放，從而可有效減輕機(jī)體炎癥狀態(tài)，改善腦缺血再灌注損傷[4]。另有研究指出，亞低溫療法可有效抑制腦細(xì)胞凋亡途徑，減輕反應(yīng)基因抑制缺氧缺血的作用，從而在一定程度上具有保護(hù)神經(jīng)功能的效果[5]。既往研究發(fā)現(xiàn)，新生兒HIE炎癥反應(yīng)與機(jī)體內(nèi)不同炎性細(xì)胞因子及患兒腦組織受損的過程存在顯著關(guān)系，特別是IL-1β、IL-6、TNF-α等均可引起機(jī)體發(fā)熱甚至休克等不同病理反應(yīng)[6]。

3.1聯(lián)合治療對(duì)炎癥狀態(tài)的影響

IL-1β、IL-6、TNF-α均與HIE患兒的病理過程密切相關(guān)[7-9]。既往研究表明，IL-6作為重要的促炎癥反應(yīng)因子之一，其對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)不僅有著神經(jīng)保護(hù)的作用，而且有著神經(jīng)毒性的作用；TNF-α作為重要的細(xì)胞因子之一，是經(jīng)單核巨噬細(xì)胞分泌而成，其在不同人體生理過程中發(fā)揮著顯著的調(diào)節(jié)作用[10]。本研究結(jié)果表明，在單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉靜脈滴注治療的同時(shí)，聯(lián)合應(yīng)用全身亞低溫療法可有效抑制IL-1β、IL-6、TNF-α等多種炎性介質(zhì)的釋放，從而有效改善HIE患兒血清促炎因子的水平，抑制機(jī)體炎癥狀態(tài)。兩者聯(lián)合治療，可減輕神經(jīng)毒性，增加腦血流量，減少腦組織氧耗，保護(hù)神經(jīng)元，緩解HIE患兒腦部炎癥狀況。

3.2聯(lián)合治療對(duì)氧化應(yīng)激和神經(jīng)行為的影響

S100β蛋白、NSE、MBP均為神經(jīng)氧化應(yīng)激因子，亦是臨床常用于反映神經(jīng)損傷的主要標(biāo)志物。其中，S100β蛋白主要處于雪旺細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞中，可有效調(diào)節(jié)細(xì)胞形態(tài)，且在神經(jīng)細(xì)胞分化方面具有重要作用，同時(shí)對(duì)神經(jīng)可塑性具有一定影響。已有研究表明，外周血中S100β蛋白水平越高，預(yù)示著神經(jīng)受損程度越嚴(yán)重，提示二者具有顯著正相關(guān)關(guān)系[11]。NSE是一種糖酵解過程中產(chǎn)生的催化酶，分布于中樞神經(jīng)組織中，具有良好的穩(wěn)定性，在維持神經(jīng)細(xì)胞生理功能方面具有重要的作用[12]。研究表明，在發(fā)生腦病后，因神經(jīng)漿膜功能及結(jié)構(gòu)受損，使得NSE自神經(jīng)元胞內(nèi)釋放并入腦脊液，進(jìn)而滲入外周血，使得其在外周血中的水平明顯升高，這亦是判斷腦損傷的一項(xiàng)重要標(biāo)志[13]。本研究顯示單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉靜脈滴注+全身亞低溫療法可有效改善HIE患兒神經(jīng)行為，減輕神經(jīng)損傷，對(duì)患兒神經(jīng)功能具有一定的保護(hù)作用。原因可能為神經(jīng)節(jié)苷脂能輕易透過血腦屏障，下調(diào)興奮性氨基酸水平，減輕機(jī)體神經(jīng)毒性，促進(jìn)神經(jīng)元生長(zhǎng)分化[14-15]。神經(jīng)節(jié)苷脂可增加腦血流量，保護(hù)腦細(xì)胞膜，促進(jìn)軸突生長(zhǎng)，增強(qiáng)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)及重構(gòu)[16]；亞低溫可減少腦組織氧耗，保護(hù)神經(jīng)元，緩解鐵介導(dǎo)的神經(jīng)毒性作用。兩者聯(lián)合可有效緩解HIE患兒腦部炎癥狀況，對(duì)其神經(jīng)元細(xì)胞起到良好的保護(hù)作用，進(jìn)而有助于改善患兒腦部神經(jīng)功能，最終能夠促進(jìn)疾病的康復(fù)[17]。

綜上所述，在單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉靜脈滴注治療的同時(shí)，聯(lián)合應(yīng)用全身亞低溫療法可有效改善新生兒HIE血清促炎因子的水平，改善神經(jīng)行為，減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷，因此該聯(lián)合療法具有潛在的臨床應(yīng)用前景。