血清HMGB1及PCT水平檢測對新生兒壞死性小腸結腸炎診斷和病情評估的價值

付彬彬，王文芳，葉婷婷，韓燕媚，邱小翠（海口市婦幼保健院檢驗科，海口 570100）

壞死性小腸結腸炎（necrotizing enterocolitis, NEC）是常見的新生兒嚴重疾病，其病情進展迅速、預后較差、病死率較高[1-2]。尋找一種早期診斷、準確評估新生兒NEC 預后的生物學指標對患兒的救治具有重大幫助。高遷移率族蛋白B1（high mobility protein B1, HMGB1）是一種重要的炎癥遞質和致炎細胞因子，在炎癥性腸病患兒中明顯升高，能夠反映腸道黏膜上皮損傷情況[3]。降鈣素原（procalcitonin，PCT）是降鈣素的前體蛋白，對消化道穿孔及感染性疾病具有較好的診斷價值和預警作用，在NEC 的變化有重要臨床意義[4]。本研究檢測血清HMGB1 及PCT 水平在NEC 患兒中的情況，分析HMGB1，PCT 對新生兒NEC 診斷及預后的價值。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取海口市婦幼保健院在2017～2020年收治的新生兒NEC 75 例，其中男性47 例，女性28 例，胎齡33～40（36.30±1.40）周。

納入標準：新生兒NEC 的診斷符合《實用新生兒學》（4 版）標準[5]；排除標準：并發其他消化系統疾病。另選取60 例健康足月新生兒作為對照組，其中男性36 例，女性24 例，胎齡37～41（38.20±1.70）周。各組性別、胎齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究與患兒家屬簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑 Getein1100 免疫熒光定量分析儀，PCT 試劑為基蛋生物科技股份有限公司，HMGB-1 水平試劑為美國R&D 公司。

1.3 方法 根據修正Bell 分期[5]，將75 例NEC患兒分為Ⅰ期28 例，Ⅱ期37 例，Ⅲ期10 例。根據75 例患兒30 天的預后情況，分為存活組58 例和死亡組17 例。采用酶聯免疫吸附法檢測血清HMGB-1 水平，干式免疫熒光法檢測血清PCT 水平。

1.4 統計學分析 采用SPSS 20.0 統計，計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間比較采用方差分析，組間比較采用t檢驗。計數資料采用χ2檢驗。HMGB1 及PCT 對新生兒NEC 診斷及預后的價值應用受試者工作特征（ROC）曲線分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組血清HMGB1 及PCT 水平與對照組比較 見表1。與對照組比較，病例組血清HMGB1 及PCT水 平明顯升 高（t=13.628，10.427，P<0.05）。死亡組血清HMGB1 及PCT 水平明顯高于存活組（t=16.217，12.308，P＜0.05），差異均有統計學意義。

表1 三組血清HMGB1 及PCT 水平比較（±s）

表1 三組血清HMGB1 及PCT 水平比較（±s）

項目 對照組（n=60） 病例組（n=75） 存活組（n=58） 死亡組（n=17） F P HMGB1（μg/L） 3.18±1.14 15.60±4.85 9.24±3.18 24.50±7.13 11.720 <0.001 PCT（ng/ml） 0.03±0.01 1.74±0.92 0.85±0.38 3.02±1.35 9.852 <0.001

2.2 各期NEC 患兒血清HMGB1 及PCT 水平比較 與Ⅰ期比較，Ⅱ～Ⅲ期血清HMGB1（10.54±3.20μg/L vs 20.16±6.37μg/L） 及PCT（0.94±0.42ng/ml vs 2.85±1.30ng/ml）水平明顯升高，差異有統計學意義（t=8.263，7.624，均P＜0.05）。

2.3 HMGB1 及PCT 對新生兒NEC 的診斷價值 見表2 和圖1。HMGB1 及PCT 兩項聯合診斷新生兒NEC 的曲線下面積（0.872，95%CI：0.814～0.930）明顯高于單項HMGB1（0.808，95%CI：0.751～0.870）及PCT（0.717，95%CI：0.655～0.774），其敏感度和特異度分別為87.4%和83.5%。

圖1 HMGB1 及PCT 診斷新生兒NEC 的ROC 曲線

表2 HMGB1 及PCT 對新生兒NEC 的診斷價值（%）

2.4 HMGB1 及PCT 預測新生兒NEC 死亡的價值 見表3 和圖2。HMGB1 及PCT 兩項聯合預測新生兒NEC 死亡的曲線下面積（0.893，95%CI：0.836～0.952）明顯高于單項HMGB1（0.816，95%CI：0.755～0.874）及PCT（0.735，95%CI：0.673～ 0.793），其敏感度和特異度分別為89.0%和86.4%。

圖2 HMGB1 及PCT 預測新生兒NEC 死亡的ROC 曲線

表4 HMGB1 及PCT 預測新生兒NEC 死亡的價值（%）

3 討論

新生兒NEC 是新生兒期常見的嚴重消化系統疾病，其發生與腸道菌群失調、免疫應答異常、缺血缺氧等多種因素的綜合作用相關，是導致新生兒死亡的重要病因之一[6-7]。當前，如何早期準確的診斷及評估新生兒NEC的預后是研究的重點問題。HMGB1 作為一種促炎性細胞因子新型指標，與腸道受損的發生有關[8]。PCT 是降鈣素的前肽物質，在機體受到細菌感染后顯著升高，其升高程度與感染的嚴重程度密切相關，是臨床上診斷炎癥感染性疾病的常用指標[9]。有研究指出，血清PCT 水平可在新生兒出生后出現生理性升高，其升高持續時間較短，很快降低到正常水平，而NEC 患兒血清PCT 水平表現出長時間的升高，因此血清PCT 水平檢測對鑒別診斷NEC 具有較好的幫助[10]。

本研究中血清HMGB1 及PCT 水平病例組明顯高于對照組，提示NEC 患兒血清HMGB1 及PCT水平較高，在NEC的發生發展中具有重要作用。本研究顯示，血清HMGB1 及PCT 水平Ⅱ～Ⅲ期明顯高于Ⅰ期，HMGB1 及PCT 水平死亡組較存活組明顯升高，提示HMGB1 及PCT 水平高的NEC患兒，病情較重，死亡發生的可能性越大。黃玲等[11]研究顯示，NEC 患兒血清PCT 水平明顯高于對照組，且隨著病情進展，血清PCT 水平上升越明顯，PCT 對NEC 的早期診斷、病情演變、隨訪治療效果有一定的價值。鄭澤兵等[12]研究發現，新生兒NEC 發病后1，6 和12 h 血清PCT 水平呈現出逐漸升高的趨勢，血清PCT 水平對新生兒NEC 手術時機的判斷具有一定意義，但應結合臨床表現和其他輔助檢查結果綜合考慮。本研究ROC 曲線顯示，HMGB1 及PCT 聯合診斷和預測NEC 患兒死亡的效能最大，說明HMGB1 及PCT 是新生兒NEC 診斷及病情評估的良好指標，兩項聯合檢測對新生兒NEC 診斷及病情評估具有較大的幫助。羅若谷等[13]研究發現，HMGB1 作為一種晚期重要炎癥因子，隨著NEC 患兒病情惡化，HMGB1 含量逐漸增高，HMGB1 在NEC 早期診斷及評估病情嚴重程度方面具有一定的臨床價值。汪莉等[14]研究顯示，Ⅱ～Ⅲ期NEC 患兒血清PCT 水平高于對照組，血清PCT水平變化監測有助于Ⅱ～Ⅲ期NEC 的早期診斷，可作為預測NEC 病情嚴重程度的輔助指標。另有研究表明，血清PCT 水平在NEC 早期即升高，且與NEC 患兒嚴重程度有關，PCT 對NEC 診斷及病情判斷具有較好的指導價值[15]。但本研究也存在不足，單中心研究且樣本量較少，將在今后的研究中進行探討。

總之，NEC 患兒血清HMGB1 及PCT 水平明顯升高，其高水平與患兒病情嚴重程度相關，兩項聯合診斷及預測對新生兒NEC 病情具有很好的幫助，可能是新生兒NEC 診斷及病情評估的生物學指標。