腎移植術后淋巴細胞亞群變化在評價腎功能中的臨床價值*

高云龍，郭小軍，李泉源，瞿叢新，武倫，魏澗

（1.錦州醫科大學國藥東風總醫院 研究生培養基地，湖北 十堰 442000；2.湖北醫藥學院附屬國藥東風總醫院 普外科，湖北 十堰 442000）

腎移植術是目前器官移植方面最易被患者接受的，也是治療終末期腎臟病的最佳方法。術后常規使用三聯免疫抑制劑（他克莫司、嗎替麥考酚酯、激素）影響患者的免疫應答和免疫調節，目前淋巴細胞亞群的測定是免疫狀態最為客觀的指標。免疫抑制劑的大量使用，患者出現肺部細菌、病毒感染的并發癥，甚至更嚴重的后果；免疫抑制劑的劑量不足導致移植物宿主排斥或移植物失功，導致患者需要再次透析治療。有報道顯示機體出現感染或排斥時淋巴細胞亞群會發生相應的變化，因此研究腎移植術后患者淋巴細胞亞群的變化與腎功能之間的相關性極其重要。收集腎移植術后淋巴細胞亞群絕對計數及比值，分析與腎功能間的相關性，為臨床醫師更進一步明確診斷，為患者打造個體化治療方案提供有力的理論依據。

1 資料與方法

1.1 相關標準

1.1.1 納入標準 ①順利完成腎移植患者；②住院期間均明確診斷，未發生移植物功能延遲恢復、感染、排斥反應、移植腎功能不全、術后移植腎功能喪失等；③術后群體反應性抗體（PRA）陰性。

1.1.2 排除標準 ①受者在術前出現明顯的肝功能不全；②病歷資料不全者；③合并傳染性疾病。

1.2 研究對象

收集2019 年7 月到2020 年11 月湖北醫藥學院附屬國藥東風總醫院收治的首次腎移植患者39 例。其中男31 例，女8 例；年齡（43.21±9.48）歲。腎移植受者淋巴細胞亞群絕對計數及比值、腎功能、他克莫司濃度均由錦州醫科大學國藥東風總醫院測定，住院系統查詢獲得，腎小球濾過率為ECT 檢測獲得，淋巴細胞亞群絕對計數及百分比由流式細胞儀測得。腎移植受者術前均進行誘導治療，術后口服他克莫司、嗎替麥考酚酯、激素組成主要抗排斥治療方案。本研究得到醫院倫理委員會的批準。

1.3 研究方法

研究腎移植受者手術前后尿素氮、肌酐、補體C1q、胱抑素C、腎小球濾過率（GFR）動態變化，分析淋巴細胞亞群絕對數值及百分比與腎功能、他克莫司濃度相關性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 23.0 軟件進行統計學分析。符合或近似正態分布的計量資料以均數±標準差（）表示，組內不同時間點相同指標比較采用配對樣本t檢驗；計數資料以百分率（%）表示，采用Pearson 相關性分析。P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 受者住院期間腎功能動態變化

分析受者手術前后不同時間點腎功能變化，尿素氮、肌酐、胱抑素C 及補體C1q 水平均逐漸降低，差異有統計學意義（P<0.05）；GFR 逐漸升高，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 受者手術前后腎功相關指標變化（）

表1 受者手術前后腎功相關指標變化（）

2.2 受者住院期間淋巴細胞亞群動態變化

受者住院期間125 次淋巴細胞亞群絕對計數及比值淋巴細胞亞群動態變化數值見表2。

表2 受者住院期間淋巴細胞亞群動態變化（）

表2 受者住院期間淋巴細胞亞群動態變化（）

2.3 淋巴細胞亞群絕對值計數與腎功能的相關分析

分析我院淋巴細胞亞群絕對值計數與肌酐、尿素、胱抑素C、GFR、補體C1q 之間的相關性，具體情況見表3。淋巴細胞亞群絕對計數腎功能相關性分析如圖1。

圖1 淋巴細胞數、總T 淋巴細胞數與胱抑素C 相關性

表3 淋巴細胞亞群絕對值計數與腎功能的相關分析

2.4 淋巴細胞亞群百分比與腎功能的相關分析

分析我院淋巴細胞亞群百分比與肌酐、尿素、胱抑素C、GFR、補體C1q 之間的相關性，具體情況見表4。淋巴細胞亞群百分比與腎功能相關性分析如圖2。

圖2 淋巴細胞百分比、總T 淋巴細胞百分比與胱抑素C 相關性

表4 淋巴細胞亞群百分比與腎功能的相關分析

2.5 淋巴細胞亞群與他克莫司濃度相關分析

研究發現淋巴細胞數百分比與他克莫司濃度成負相關（r=-0.20,P=0.029），B 淋巴細胞百分比與他克莫司濃度正相關（r=0.24,P=0.007），其余淋巴細胞亞群與他克莫司濃度沒有發現相關性。

3 討論

腎移植術后免疫抑制劑的治療導致腎功能及機體免疫狀態發生動態變化，用藥劑量過大易導致患者出現感染、長期移植失敗、惡性腫瘤［1］，甚至死亡［2-3］，不足易致腎功能喪失［4］。相關報道［5］顯示患者術后感染或排斥反應T 淋巴細胞亞群表現不同，甚至有報道淋巴細胞亞群的數量可能與移植開始人類白細胞抗原（HLA）抗體的發生和同種異體移植腎發生排斥相關［6-7］。因此，迫切需要找到一個平衡點對腎功能進行早期的評估及干預。目前淋巴細胞表現是反映免疫功能的重要策略之一。

有報道［8］發生感染的患者CD4+，CD8+T 細胞或NK 細胞數量和功能不同程度降低，經抗感染治療后CD4+、CD8+T 細胞和NK 細胞的數量和功能恢復到感染前水平。在沒有發現其他更好的腎功能評估方法之前，淋巴細胞亞群在免疫檢測中仍有著重要的作用。免疫抑制劑的應用對自然殺傷細胞具有明顯的抑制作用，他克莫司主要是抑制T細胞的活化和增殖［9］。有學者發現CD8+T 細胞亞群可能對檢測急性同種異體移植排斥有用［10］。上述研究認為腎移植術后淋巴細胞亞群在移植中有著重要作用。

目前移植中心考慮腎功能時主要觀察血尿素氮、肌酐及GFR，胱抑素C 與補體C1 的報道較少，本研究發現淋巴細胞亞群不僅與血尿素、肌酐及GFR 有相關性，也發現與胱抑素C、補體C1q 也有相關性。補體C1q 促進免疫耐受、清除凋亡細胞有重要地位［11］。有兩個方面解釋：①補體C1q 與其受體結合促進影響樹突狀細胞的吞噬作用；②通過特異性細胞因子誘導TH1 細胞應答［12］。

胱抑素C 有核細胞產生，是近端腎小管損傷的標志物，通過腎小球過濾［13］，在腎小管代謝不被重復吸收，產生相對恒定，比腎小球壞死的肌酐水平接近腎小球濾過率［13-17］。肌酐是一種常見的腎功標志物，不僅反映腎功能［18］，還反映肌肉質量。而腎GFR 胱抑素C 比肌酐的評估能力更可靠［19-21］，并且不受性別年齡或肌肉質量的影響［22-23］，相關研究表明胱抑素C 比肌酐更能體現腎功能［24］。以上研究認為，腎功能的評估中血清胱抑素C 好于血清肌酐值。筆者的研究也發現淋巴細胞亞群與胱抑素C 的相關性明顯優于肌酐，這可能與胱抑素C 更好的代表了腎功能相關。

在淋巴細胞亞群與他克莫司濃度研究發現，只有淋巴細胞數百分比、B 淋巴細胞百分比與他克莫司濃度發現了相關性，這一點另筆者感到意外，但在肝移植發現類似的結果，他克莫司濃度確實影響淋巴細胞亞群的變化，但藥物濃度并不反映淋巴細胞亞群受影響的程度［25］。

綜上所述，淋巴細胞亞群在腎移植術后呈動態變化，與腎功能有相關性。意外發現了胱抑素C與淋巴細胞亞群的相關性較好，這可能在更早地預測腎功與淋巴細胞亞群的平衡起著重要的作用。當然，由于本中心開展淋巴細胞測定及收集到資料有限，隨訪時間較短，其結論仍然需要更大樣本及多中心進行研究論證。本研究論證了淋巴細胞亞群與腎功能、他克莫司濃度的關系。因此，淋巴細胞亞群檢測可以為術后腎移植患者管理及治療提供理論依據。