HCY、AST/ALT、GGT、MCV與酒精性肝硬化的相關性研究

鐘紅梅，朱金朋，韓遵文，田蕾

（錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院 消化內(nèi)科，遼寧 錦州 121000）

本世紀初，有研究報道，截至2003 年酒精性肝硬化患者已占據(jù)我國肝硬化患者的24.0%，現(xiàn)全球因酒精性肝硬化死亡患者人數(shù)已接近與因肝硬化死亡人數(shù)的一半［1］，而酒精性肝硬化的預后與早期發(fā)現(xiàn)及干預密切相關，戒酒者的5 年存活率為63%，而繼續(xù)飲酒者只有40%［2］，但是迄今為止尚缺乏高度敏感性和特異性的診斷指標。為了能更好地早期發(fā)現(xiàn)、優(yōu)化臨床診治、改善患者預后，本研究主要分析臨床實用性和可操作性高的同型半胱氨酸（HCY）、谷草轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶（AST/ALT）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、平均紅細胞體積（MCV）這四項指標作為檢測指標，單獨檢測及聯(lián)合檢測這四項指標在酒精性肝硬化中的診斷價值及其在病情評估中的應用價值。

1 資料和方法

1.1 一般資料

收集錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院2019 年9 月至2020 年9 月期間住院的肝硬化患者共300 例，將符合條件的酒精性肝硬化患者82 例及符合條件并排除酒精性肝硬化的其他肝硬化患者95 例納入研究，并收集錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院門診不飲酒的健康體檢者88 例為健康對照組納入研究。本研究通過錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院倫理委員會批準，經(jīng)過患者及家屬同意并簽署同意書。

納入標準：實驗組：①符合2018 年修訂版的《酒精性肝病防治指南》［1］中酒精性肝病診斷標準；②有肝硬化的臨床表現(xiàn)和肝硬化的影像學特點或肝活檢病理結果。非酒精性肝硬化對照組：已明確診斷為肝硬化并已排除酒精因素所致的患者。

排除標準：①年齡<15 歲組或>75 歲組；②合并腦血管疾病、心血管疾病、腎功能衰竭、呼吸衰竭、惡性腫瘤等；③因轉(zhuǎn)院、死亡、拒絕抽血化驗等導致數(shù)據(jù)不足或丟失的患者；④近2 月曾補充維生素B6、B12 及葉酸的患者。

1.2 檢查指標和方法

住院患者住院次日清晨、門診健康體檢者當日空腹采血，無菌管靜脈抽血2 mL 室溫靜置30 min，3 000 r/min 離心10 min，分離血清，應用貝克曼AU-480 全自動生化分析儀速率法測定血漿中HCY；AST/ALT、GGT 檢測由AU5800 全自動分析儀（日本）及配套試劑盒完成；血常規(guī)采用Sebia 公司的Hemalaser 全自動血液分析儀（法國）及配套試劑盒檢測，從而獲得MCV。

1.3 方法

1.3.1 分組 將酒精性肝硬化患者設為實驗組，并根據(jù)第15 版《實用內(nèi)科學》［3］中肝功能Child-Pugh 分級將其分為A、B、C 三組，將健康不飲酒體檢者及非酒精性肝硬化者設為對照組，前者為對照組1，后者為對照組2。

1.3.2 觀察指標 收集實驗組及對照組的一般及檢驗資料：年齡、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、吸煙史、HCY、GGT、AST/ALT、MCV。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析：通過單樣本K-S（1）檢驗，符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標準差（）表示，不符合正態(tài)分布的計量資料用中位數(shù)和四分位數(shù)間距M（P25,P75）表示；多樣本計量資料間的比較采用克魯斯卡爾-沃利斯單因素ANOVA 檢驗，組間比較時對P值進行Bonferroni 校正；通過繪制受試者工作特征曲線（receiver operating curve,ROC），計算各指標單獨及聯(lián)合診斷的敏感度、特異度和曲線下面積（area under ROC curve,AUC），以此分析診斷效能。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 實驗組與對照組檢驗資料比較

實驗組血清HCY、AST/ALT、GGT、MCV 指標高于非酒精性肝硬化對照組及健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但在非酒精性肝硬化對照組及健康對照組間HCY、AST/ALT、MCV，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），非酒精性肝硬化對照組GGT 高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。上述結果提示血清HCY、AST/ALT、MCV與酒精性肝硬化的發(fā)生有關，血清GGT 升高與酒精性肝硬化、非酒精性肝硬化均相關。

表1 各檢測指標在實驗組及對照組比較 ［M（P25,P75）］

注：HCY：實驗組與兩個對照組比較，P均<0.05；兩個對照組間比較，P=0.429。AST/ALT：實驗組與兩個對照組比較，P均<0.05；兩個對照組間比較，P=0.04。GGT：實驗組與對照組間兩兩比較，P均<0.05。MCV：實驗組與兩個對照組比較，P均<0.05；兩個對照組間比較，P=1.00。

2.2 HCY、AST/ALT、GGT、MCV 單獨檢測及四項指標聯(lián)合檢測診斷酒精性肝硬化

HCY、AST/ALT、GGT、MCV 單獨檢測診斷酒精性肝硬化ROC 曲線下的面積分別為0.909、0.892、0.758、0.816，四項指標聯(lián)合檢測時可升至0.972。見圖1。

圖1 HCY、AST/ALT、GGT、MCV 單獨檢測及四項指標聯(lián)合檢測的ROC 曲線

2.3 HCY、AST/ALT、GGT、MCV 對酒精性肝硬化的診斷價值

分別分析血清HCY、AST/ALT、GGT、MCV單獨檢測對酒精性肝硬化的診斷效能，各檢測指標。見表2。

表2 各檢測指標對酒精性肝硬化的診斷價值

2.4 酒精性肝硬化患者不同Child-Pugh 分級血清HCY、AST/ALT、GGT、MCV 比較

血清HCY 水平在各期酒精性肝硬化中，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），隨著Child-Pugh 增高，血清HCY 呈逐漸升高趨勢。血清MCV 僅在Child-Pugh 分級A 級及C 級間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），血清AST/ALT、GGT 水平在各期酒精性肝硬化中比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表3。

表3 各檢測指標與酒精性肝硬化患者Child-Pugh 分級的相關性 ［M（P25,P75）］

3 討論

酒精是世界范圍內(nèi)肝病的主要原因，進入機體的酒精90%以上在肝臟代謝，對肝臟有明顯的毒性作用，酒精性肝病（ALD）包括從酒精性脂肪變性到肝硬化的各種疾病，酒精性肝硬化為酒精性肝病的終末階段，美國ALD 死亡居第10位［4-5］。近年來，我國酒精性肝硬化患者逐漸增多，已成為肝硬化的主要病因之一，而酒精性肝硬化的預后與早期發(fā)現(xiàn)及干預密切相關，HOLDER 等［6］檢查了北卡羅來納州每月的肝硬化死亡率數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)酒精濫用治療與肝硬化死亡率有顯著的短期滯后關系，治療增加3 個月后，肝硬化死亡率下降。并且目前酒精性肝硬化的確診主要通過肝活檢，雖然此方法相對安全，但畢竟是有創(chuàng)操作，仍存在一定的風險性及并發(fā)癥，且患者的接受度差，因此，建立無創(chuàng)的、簡單易行的、易被患者接受的診斷方法具有重要意義。

HCY 是蛋氨酸代謝產(chǎn)生的含硫氨基酸，是甲基化反應的關鍵中間體，肝臟在蛋氨酸代謝中起著中心作用，因為每天攝入的蛋氨酸有近一半在肝臟中代謝［7］。本研究中，筆者測定了酒精性肝硬化患者HCY，結果較正常值明顯升高，比較分析實驗組和對照組的HCY 發(fā)現(xiàn)酒精性肝硬化患者HCY 高于健康對照組及非酒精性肝硬化對照組（P<0.05），表明酒精性肝硬化患者HCY 呈高表達狀態(tài)，可能有以下機制參與：乙醇的攝入主要抑制體內(nèi)一種重要的細胞酶——蛋氨酸合酶（MS）的活性，MS 參與了HCY 的再甲基化，并且乙醇的攝入減少了人體對維生素B6、維生素B12、葉酸等物質(zhì)的攝入和吸收［8-10］。研究表明，HCY 的升高抑制對肝臟正常功能至關重要的各種甲基轉(zhuǎn)移酶來減少必要的甲基化反應，以及上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)依賴性凋亡和脂質(zhì)合成途徑的激活。這些后果的最終結果是增加脂肪沉積、增加細胞凋亡、損傷蛋白的積累和各種信號通路的改變，有這些最終都會導致肝臟的進行性損傷［8］。在本研究中，HCY 對于酒精性肝硬化診斷的敏感度、特異度分別為85%、95%，且Child-Pugh 分級越高，HCY越高（P<0.05），這與GARCíA-TEVIJANO 等［11］的研究是一致的。綜上所述，HCY 對于酒精性肝硬化的診斷及病情評估存在重要的臨床意義。

AST 和ALT 主要存在于肝臟中，是反應肝功能的兩種重要的酶，AST 是一種線粒體酶，酒精攝入易損壞線粒體，可能與乙醇代謝導致氧化應激、脂質(zhì)過氧化反應等相關，進而導致血清AST升高［12］，眾多研究表示酒精的攝入對ALT 的影響不如AST 明顯，進而導致AST/ALT 比值升高。本研究中，酒精性肝硬化患者與對照組比較AST/ALT 比值升高，差異具有統(tǒng)計學意義，AST/ALT檢測酒精性肝硬化的敏感度與特異度分別達84%和79%；GGT 是一種膜結合糖蛋白酶，它催化谷胱甘肽的-谷氨酰胺部分轉(zhuǎn)移到各種肽受體。慢性乙醇攝入已知會導致血清GGT 升高［9］，國外曾有研究［13］報道，GGT 檢測酒精性肝硬化的敏感度與特異度分別達65%和83%，本研究與該報道結果基本一致；MCV 是衡量紅細胞大小的有用指標，本研究表明，酒精性肝硬化患者MCV 比值較對照組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義，這可能與酒精攝入影響葉酸及維生素B12 吸收、血液中的乙醇損壞紅細胞膜的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)成分以及乙醇對骨髓的毒性作用等相關［14］，綜上所述，AST/ALT、GGT、MCV 對于酒精性肝硬化均有一定的臨床診斷意義，但其敏感度及特異度均低于HCY，且HCY 越高，Child-Pugh 分級越高，患者病情越重（P<0.05），故HCY 是酒精性肝硬化的一個良好輔助診斷指標，且四項指標聯(lián)合可將敏感度提高至93%。

本文研究不足：樣本量較小，且酒精性肝硬化患者基本都是男性，無法排除性別因素本身對于各指標的影響，且來錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院住院治療的患者大部分已進入肝硬化失代償期，代償期患者量較少，可能對于研究各指標對于肝硬化分級造成干擾。