METTL3調(diào)控SPRING1促進(jìn)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積

賈波，楊宙，喻廣力，呂運(yùn)成，彭田紅

1.南華大學(xué)衡陽(yáng)醫(yī)學(xué)院應(yīng)用解剖與生殖研究所，湖南 衡陽(yáng) 421001；2.桂林醫(yī)學(xué)院廣西糖尿病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 桂林 541001

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是一種慢性血管炎性病理過程，世界范圍內(nèi)與其相關(guān)的心腦血管疾病發(fā)病率居首位[1,2]。巨噬細(xì)胞是AS損害過程中最為重要和豐富的免疫細(xì)胞，泡沫細(xì)胞形成是AS的標(biāo)志性病理表現(xiàn)[3,4]。甲基轉(zhuǎn)移酶3（methyltransferaselike 3，METTL3）作為重要的N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine modification，m6A）修飾的寫入蛋白，催化反應(yīng)性甲基化合物中的甲基基團(tuán)并轉(zhuǎn)移到其第6個(gè)位置N原子上形成m6A修飾[5]，進(jìn)而影響底物RNA的穩(wěn)定性、剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)、定位和翻譯[6,7]。研究證實(shí)，METTL3催化的m6A修飾通過調(diào)控脂代謝相關(guān)基因表達(dá)影響胞內(nèi)脂質(zhì)含量：METTL3修飾可上調(diào)硬脂酰輔酶a去飽和酶1（SCD-1）mRNA水平，促進(jìn)脂質(zhì)合成，從而升高肝脂質(zhì)水平[8]。SPRING1是一種新型的脂質(zhì)生成調(diào)節(jié)因子，有文獻(xiàn)報(bào)道，SPRING1通過調(diào)節(jié)SREBPs表達(dá)，加速細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的合成及攝取，促進(jìn)肝細(xì)胞的脂質(zhì)蓄積[9,10]。但目前對(duì)SPRING1表達(dá)的調(diào)控研究鮮有報(bào)道。鑒于m6A修飾可廣泛影響脂代謝相關(guān)基因的表達(dá)，而SPRING1是調(diào)控脂質(zhì)代謝的重要因子，與肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)水平密切相關(guān)，因而探討METTL3是否可以調(diào)控SPRING1表達(dá)則顯得十分必要。本研究探討METTL3對(duì)SPRING1的調(diào)控作用及機(jī)制，觀察其通過SPRING1對(duì)THP-1細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響，以期為揭示METTL3介導(dǎo)的甲基化影響巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的作用及潛在機(jī)制提供新的研究思路，為維持巨噬細(xì)胞膽固醇平衡和抗動(dòng)脈粥樣硬化的治療策略提供以METTL3為靶點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理

THP-1細(xì)胞購(gòu)自美國(guó)模式菌種收集中心ATCC。……