新生兒膿毒癥NLR、HMGB1、PCT水平與炎性因子、臟器功能及預(yù)后的相關(guān)性

劉海紅，楊春光，王鳳東，劉 軍

新生兒膿毒癥主要是由于病原菌侵入血液，并在其中生長、繁殖導(dǎo)致的全身感染性疾病[1]。近年來，臨床對胎膜早破的強化管理以及產(chǎn)前抗生素的應(yīng)用，使新生兒感染發(fā)病率明顯降低，但膿毒癥仍是威脅新生兒生命安全的主要原因之一。據(jù)統(tǒng)計，膿毒癥是導(dǎo)致新生兒死亡的第三大直接原因，病死率可高達19%[2]。因此，早期診斷以及評估新生兒膿毒癥病情是降低病死率的關(guān)鍵。既往研究表明，部分膿毒癥患兒早期缺乏典型癥狀，導(dǎo)致病情評估困難，而影響預(yù)后[3]。免疫狀況及炎癥反應(yīng)在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是一種重要的炎性介質(zhì)，通過與Toll樣受體結(jié)合激活炎癥反應(yīng)[4]。外周血中性粒細胞/淋巴細胞比值(NLR)和身體免疫狀況及炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，其中中性粒細胞可提示非特異性炎癥，而淋巴細胞對炎癥反應(yīng)具有防御和調(diào)控作用[5]。降鈣素原(PCT)通常在人體被細菌感染后顯著升高，在檢測感染性疾病上具有簡單快速、重復(fù)性好的優(yōu)勢，已被納入膿毒癥診斷標(biāo)準[6]。目前國內(nèi)已有研究證實，NLR、HMGB1、PCT可用于膿毒癥的診斷，但在新生兒膿毒癥預(yù)后評估價值方面尚需進一步研究。本研究旨在探討NLR、HMGB1、PCT水平與新生兒膿毒癥炎性因子、臟器功能及預(yù)后的相關(guān)性，以期明確NLR、HMGB1、PCT水平在評估病情和預(yù)后方面的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年6月—2021年3月我院確診為膿毒癥的61例新生兒作為研究組。納入標(biāo)準：①符合膿毒癥診斷標(biāo)準[7]：血液非特異性檢查≥2項陽性，腦脊液檢查異常，血液檢出特種細菌的DNA或抗原，滿足上述任一條件即可確診；②出生3～28 d的新生兒；③產(chǎn)婦分娩前血常規(guī)檢查無異常；④母嬰臨床資料完整，家屬對研究知情同意。排除標(biāo)準：①合并妊娠期高血壓、糖尿病等可能影響NLR、HMGB1、PCT水平的產(chǎn)婦；②存在染色體異常、先天畸形、遺傳代謝性疾病的新生兒；③合并血液或免疫系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤的產(chǎn)婦。選擇同期在我院出生的健康新生兒65例作為對照組。研究組男32例，女29例；胎齡36～40(38.15±0.73)周；早產(chǎn)兒17例，足月兒44例。對照組男37例，女28例；胎齡36～40(38.23±0.81)周；早產(chǎn)兒21例，足月兒44例。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準執(zhí)行。

1.2方法 所有新生兒均于納入研究時抽取外周血2～3 ml，分為兩份，一份標(biāo)本肝素抗凝后，采用全自動生化分析儀檢測天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平，采用血細胞分析儀檢測中性粒細胞和淋巴細胞，計算NLR；另一份標(biāo)本靜置30 min，3000 r/min離心分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測PCT、HMGB1、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、尿素(BUN)、血肌酐(Scr)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平，試劑盒均由北京豪邁生物工程有限公司提供。

1.3觀察指標(biāo) 比較研究組和對照組NLR、HMGB1、PCT、炎性因子及臟器功能指標(biāo)水平；分析NLR、HMGB1、PCT與炎性因子及臟器功能指標(biāo)的相關(guān)性。所有新生兒膿毒癥治療后隨訪28 d，根據(jù)預(yù)后情況分為死亡組和存活組，比較NLR、HMGB1、PCT水平，并分析上述指標(biāo)對新生兒膿毒癥預(yù)后預(yù)測價值。

2 結(jié)果

2.1研究組和對照組NLR、HMGB1、PCT水平比較 研究組NLR、HMGB1、PCT水平高于對照組(P<0.01)。見表1。

表1 新生兒膿毒癥和健康新生兒兩組NLR、HMGB1、PCT水平比較

2.2研究組和對照組炎性因子和臟器功能指標(biāo)比較 研究組TNF-α、hs-CRP、AST、ALT、BUN、Scr、cTnI和CK-MB水平均高于對照組(P<0.01)。見表2。

表2 新生兒膿毒癥和健康新生兒兩組炎性因子和臟器功能指標(biāo)比較

2.3NLR、HMGB1、PCT與炎性因子及臟器功能指標(biāo)相關(guān)性 NLR、HMGB1、PCT分別與TNF-α、hs-CRP、AST、ALT、BUN、Scr、cTnI、CK-MB呈正相關(guān)(P<0.01)。見表3。

表3 NLR、HMGB1、PCT與新生兒膿毒癥炎性因子及臟器功能指標(biāo)相關(guān)性

2.4不同預(yù)后新生兒膿毒癥NLR、HMGB1、PCT水平比較 隨訪28 d后，61例新生兒膿毒癥中死亡10例。死亡組NLR、HMGB1、PCT水平高于存活組(P<0.01)。見表4。

表4 不同預(yù)后新生兒膿毒癥NLR、HMGB1、PCT水平比較

2.5NLR、HMGB1、PCT對新生兒膿毒癥預(yù)后預(yù)測價值 ROC曲線分析顯示，NLR、HMGB1、PCT均對新生兒膿毒癥預(yù)后具有較好的預(yù)測價值，但三者聯(lián)合預(yù)測的曲線下面積為0.845，敏感度為83.00%，均最高。見表5和圖1。

表5 NLR、HMGB1、PCT及三者聯(lián)合預(yù)測新生兒膿毒癥預(yù)后的ROC曲線結(jié)果

3 討論

膿毒癥是新生兒時期的危重癥，臨床癥狀和體征隱匿且缺乏特異性，目前仍缺乏理想的實驗室指標(biāo)協(xié)助其病情評估。近年來多種生化標(biāo)志物應(yīng)用于臨床檢測感染性疾病，并表現(xiàn)出良好的診斷效能。新生兒受胎齡、應(yīng)激反應(yīng)、自身免疫力低等因素影響，導(dǎo)致實驗室檢驗指標(biāo)的判讀與成人存在一定差異，給新生兒疾病的診療帶來了一定的困難。

PCT在檢測新生兒感染性疾病方面表現(xiàn)出較好的優(yōu)勢，其水平高低可判斷感染程度，也能作為監(jiān)測抗菌藥物治療時間的有效指標(biāo)。PCT是降鈣素的初級代謝產(chǎn)物，細菌感染時，促炎因子會促使全身多種細胞釋放PCT，引起血液中PCT水平升高[8]。HMGB1由活化的單核或巨噬細胞、壞死細胞釋放，通過相關(guān)受體信號傳導(dǎo)通路刺激多種炎性介質(zhì)的產(chǎn)生和釋放，從而增強機體炎癥反應(yīng)[9]。NLR是系統(tǒng)性炎癥生物標(biāo)志物，可反映機體免疫平衡失調(diào)和全身炎癥反應(yīng)情況。近年研究發(fā)現(xiàn)，NLR與心血管疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病等的發(fā)生密切相關(guān)[10-11]。國外研究證實，膿毒癥患兒體內(nèi)PCT、NLR水平高于健康新生兒[12-13]。本研究顯示，研究組NLR、HMGB1、PCT水平高于對照組，提示NLR、HMGB1和PCT水平的異常變化與膿毒癥密切相關(guān)。分析其原因為膿毒癥會使骨髓內(nèi)成熟中性粒細胞迅速動員，引起循環(huán)中性粒細胞明顯增加，從而導(dǎo)致NLR水平升高；膿毒癥是病原菌產(chǎn)生的毒素入血后導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)，細菌感染時肝臟內(nèi)巨噬細胞、腸道淋巴細胞大量釋放PCT和HMGB1，導(dǎo)致二者水平升高[14]。

病原菌入侵機體產(chǎn)生的毒素以及炎癥反應(yīng)，會對膿毒癥患兒的臟器功能造成損傷，嚴重者會因多臟器功能障礙而死亡[15-16]。本研究結(jié)果顯示，研究組炎性因子和臟器功能指標(biāo)水平均高于對照組，提示新生兒膿毒癥存在明確的炎癥反應(yīng)和臟器功能損傷。本研究通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，NLR、HMGB1、PCT分別與TNF-α、hs-CRP、AST、ALT、BUN、Scr、cTnI、CK-MB呈顯著正相關(guān)，提示NLR、HMGB1、PCT水平的變化可客觀反映機體炎癥反應(yīng)和臟器功能損傷程度，有利于輔助評估患兒病情進展。膿毒癥的發(fā)生會導(dǎo)致機體非特異性免疫功能紊亂，隨著病情進展，感染以及免疫功能紊亂加劇，進而導(dǎo)致肝細胞壞死、腎功能損傷[17]；同時炎癥反應(yīng)還會導(dǎo)致心肌組織損傷，引起cTnI、CK-MB等釋放。此外，本研究還顯示死亡組NLR、HMGB1、PCT水平高于存活組，NLR、HMGB1、PCT均對新生兒膿毒癥預(yù)后具有較好的預(yù)測價值，但三者聯(lián)合預(yù)測的曲線下面積及敏感度最高，提示PCT、NLR和HMGB1對預(yù)測新生兒膿毒癥的不良預(yù)后具有重要意義。

綜上所述，PCT、NLR和HMGB1水平與新生兒膿毒癥炎癥反應(yīng)程度以及臟器功能損傷密切相關(guān)，同時對不良預(yù)后具有較好的預(yù)測價值，可為臨床病情進展和預(yù)后評估提供客觀依據(jù)。但本研究為單中心回顧性研究，樣本量少，后期可進一步通過多中心、大樣本數(shù)據(jù)論證本研究結(jié)果。