血清β2- 微球蛋白、CRP聯(lián)合骨髓涂片檢測(cè)多發(fā)性骨髓瘤的應(yīng)用

彭麗君 ，周仲煜，楊柳華，季沈杰

1.江蘇省啟東市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇啟東 226200；2.山西省太原市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山西太原 030001

多發(fā)性骨髓瘤屬于血液系統(tǒng)疾病，是源于漿細(xì)胞的惡性病變，患者骨髓內(nèi)克隆性漿細(xì)胞惡性增生，且普遍分泌單克隆免疫球蛋白或其片段[1]。患者發(fā)病后，可引起不同程度貧血、骨髓損害、腎功能損害、感染癥狀，疾病發(fā)展過(guò)程中，患者骨骼破壞程度增加，可出現(xiàn)骨折等并發(fā)癥，影響患者肢體活動(dòng)，降低生活質(zhì)量，也可因?yàn)榘殡S感染而伴隨其他合并癥，增加原有疾病復(fù)雜程度，甚至危及患者生命安全[2-3]。骨髓涂片是診斷多發(fā)性骨髓瘤的傳統(tǒng)方式，可對(duì)骨髓造血細(xì)胞增生情況予以反映，也在骨髓結(jié)構(gòu)變化和增生變化中發(fā)揮作用，但易與缺鐵性貧血和白血病混淆，單獨(dú)應(yīng)用診斷價(jià)值并不高[4-5]。臨床尚未明確多發(fā)性骨髓瘤病因，既往研究顯示患者體內(nèi)血清β2-微球蛋白、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein ,CRP)水平明顯異于常人，可能與疾病發(fā)生發(fā)展有關(guān)[6]。為此，本研究納入2019年2月—2022年2月江蘇省啟東市人民醫(yī)院收治的90例多發(fā)性骨髓瘤疑似患者，研究血清β2-微球蛋白、CRP聯(lián)合骨髓涂片的疾病診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的90例多發(fā)性骨髓瘤疑似患者為研究對(duì)象，其中男48例，女42例；年齡48～80歲，平均（64.18±3.24）歲。本研究所選病例經(jīng)過(guò)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬知情同意。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡40～80歲；存在無(wú)法解釋的持續(xù)性骨骼疼痛、蛋白尿、血尿、管型尿等表現(xiàn)；資料完整，患者自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤患者；其他血液系統(tǒng)疾病患者；嚴(yán)重感染者；近期有過(guò)相關(guān)治療者；中途退出者。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè) 于患者晨起空腹?fàn)顟B(tài)下采集5 mL靜脈血，以3 000 r/min的速度離心處理，采集上層清液為待測(cè)標(biāo)本，經(jīng)免疫比濁法檢測(cè)β2-微球蛋白、CRP水平，檢測(cè)儀器為貝克曼AU5800全自動(dòng)生化分析儀。

1.3.2 骨髓涂片 患者均行局部麻醉，待麻醉起效后，常規(guī)消毒鋪巾，于髂后上棘穿刺，抽取0.2 mL骨髓液，制成涂片后晾干，予以染色，取其中200個(gè)染色良好的有核細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，對(duì)漿細(xì)胞的比例進(jìn)行計(jì)算。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 單一指標(biāo)與聯(lián)合指標(biāo)疾病檢出率對(duì)比 比較血清β2-微球蛋白、CRP、骨髓涂片單獨(dú)和聯(lián)合使用對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的檢出率。疾病分期以Durie-Salmon分期體系為依據(jù)[7]：血紅蛋白＞100 g/L，血鈣和X線正常，骨質(zhì)破壞并不明顯或只有孤立的溶骨病變，免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）G(IgG）＜50 g/L，IgA＜30 g/L，尿輕鏈＜4 g/24 h為Ⅰ期；介于Ⅰ期和Ⅲ期間為Ⅱ期；血紅蛋白＜85 g/L，血鈣＞12 mg/dl有貧血癥狀，經(jīng)X線可見(jiàn)骨質(zhì)破壞明顯，IgG＞70 g/L，IgA＞50 g/L，尿輕鏈＞12 g/24 h為Ⅲ期。

1.4.2 疾病診斷價(jià)值對(duì)比 以《中國(guó)多發(fā)性骨髓瘤診治指南(2015年修訂)》[8]中的實(shí)驗(yàn)室和影像學(xué)（PETCT與磁共振成像）檢查為疾病診斷金標(biāo)準(zhǔn)，分析指標(biāo)單一應(yīng)用和聯(lián)合應(yīng)用診斷多發(fā)性骨髓瘤的真陽(yáng)、假陽(yáng)、真陰和假陽(yáng)例數(shù)。

1.4.3 診斷效能對(duì)比 比較單一指標(biāo)和聯(lián)合指標(biāo)對(duì)疾病的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。

1.4.4 不同分期患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平 對(duì)比Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期患者血清β2-微球蛋白、CRP水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，采用F檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同診斷方式的疾病檢出率比較

90例疑似患者中，68例經(jīng)實(shí)驗(yàn)室和影像學(xué)（PET-CT與磁共振成像）檢查確診為多發(fā)性骨髓瘤，28例為Ⅰ期患者，22例為Ⅱ期患者，18例為Ⅲ期患者，15例為意義未明的單克隆免疫球蛋白病，7例為華氏巨球蛋白血癥；血清β2-微球蛋白與CRP和骨髓涂片對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的檢出率兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.049、0.216，P=0.824、0.641）；CRP和骨髓涂片對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.470，P=0.492）；血清β2-微球蛋白、CRP和骨髓涂片聯(lián)合疾病檢出率高于單一指標(biāo)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.962、9.066、5.849，P=0.004、0.002、0.015），見(jiàn)表1。

表1 不同診斷方式疾病檢出率對(duì)比（%）

2.2 不同診斷方式的診斷價(jià)值分析

金標(biāo)準(zhǔn)顯示，90例疑似患者中，68例確診，血清β2-微球蛋白、CRP聯(lián)合骨髓涂片診斷多發(fā)性骨髓瘤的真陽(yáng)、假陽(yáng)、真陰和假陰例數(shù)分別為66例、2例、21例和1例，見(jiàn)表2。

表2 不同診斷方式的診斷價(jià)值分析

2.3 不同診斷方式的診斷效能比較

血清β2-微球蛋白和CRP診斷多發(fā)性骨髓瘤的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.049、0.096、0.124、0.068、0.077，P＞0.05）；血清 β2-微球蛋白和骨髓涂片診斷多發(fā)性骨髓瘤的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.217、0.376、0.000、0.136、0.002，P＞0.05）；CRP和骨髓涂片診斷多發(fā)性骨髓瘤的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.471、0.093、0.124、0.011、0.099，P＞0.05）；血清β2-微球蛋白、CRP和骨髓涂片聯(lián)合診斷多發(fā)性骨髓瘤的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值高于單項(xiàng)指標(biāo)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.963、6.844、14.406、6.199、8.391、9.067、8.282、16.769、7.335、9.802、5.849、9.818、14.406、7.873、7.769，P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同診斷方式的診斷效能對(duì)比（%）

2.4 不同分期患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平比較

Ⅱ期多發(fā)性骨髓瘤患者血清β2-微球蛋白、CRP水平高于Ⅰ期患者，Ⅲ期患者指標(biāo)水平明顯高于Ⅰ期、Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 不同分期患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平對(duì)比[(±s)，mg/L]

表4 不同分期患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平對(duì)比[(±s)，mg/L]

分期Ⅰ期（n=28）Ⅱ期（n=22）Ⅲ期（n=18）F值P值β2-微球蛋白4.12±0.45 7.36±1.21 12.92±2.44 200.804＜0.001 CRP 7.78±1.12 12.48±2.60 23.27±1.54 399.433＜0.001

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤為惡性腫瘤病變，也被稱(chēng)作是漿細(xì)胞骨髓瘤，骨髓中惡性克隆性漿細(xì)胞異常克隆增殖，可對(duì)患者骨骼造成不同程度的破壞，單克隆免疫球蛋白增生明顯[9]。疾病發(fā)生早期，癥狀不明顯，進(jìn)展慢，發(fā)病過(guò)程中可有骨痛、貧血、感染癥狀，降低患者生活質(zhì)量，影響生命安全。疾病在中老年群體中較為多發(fā)，其發(fā)生率隨年齡增長(zhǎng)而上升，可對(duì)骨細(xì)胞造成破壞，導(dǎo)致溶骨病變，易與骨質(zhì)增生性疾病混淆，影響疾病早期診斷，耽誤最佳治療時(shí)機(jī)。因此，應(yīng)重視疾病早期診斷工作，以準(zhǔn)確診斷，為治療方案的制訂提供依據(jù)。

骨髓涂片是診斷該疾病的重要方式，可為檢查人員提供與骨髓細(xì)胞形態(tài)有關(guān)的信息，操作簡(jiǎn)便，可在短時(shí)間內(nèi)迅速獲得檢查結(jié)果，可明確漿細(xì)胞形態(tài)。一般來(lái)講，漿細(xì)胞異常越明顯，提示患者病情惡性程度越高，細(xì)胞形態(tài)油脂、數(shù)量增加明顯提升病情惡性程度高、治療難度大、預(yù)后不良；經(jīng)骨髓涂片檢查發(fā)現(xiàn)漿母細(xì)胞時(shí)，提示疾病侵襲風(fēng)險(xiǎn)高[10-11]。但該檢查方式易為人為因素影響，檢查人員操作不規(guī)范時(shí)，可導(dǎo)致骨髓濃度下降，也可因?yàn)槟[瘤細(xì)胞增生或骨髓纖維化而出現(xiàn)“干抽”，無(wú)法順利抽取骨髓進(jìn)行檢查；此外，骨髓基質(zhì)細(xì)胞上可產(chǎn)生粘附分子，加上M蛋白的分泌，可導(dǎo)致基質(zhì)上大量粘附異常增殖漿細(xì)胞，增加診斷難度；骨髓中骨髓瘤細(xì)胞聚集增生明顯，疾病發(fā)生早期，骨髓內(nèi)瘤細(xì)胞局灶性分布，涂片取材較少時(shí)，無(wú)法抽取到病變骨髓或是不能采集到病灶，影響疾病準(zhǔn)確診斷。

β2-微球蛋白是小分子蛋白，由淋巴細(xì)胞和血小板分泌所得，存在于除紅細(xì)胞和胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞中的有核細(xì)胞中，是人類(lèi)白細(xì)胞抗原的組成部分，組織抗原分解和代謝作用可分離β2-微球蛋白，使其于細(xì)胞外液中游離。血清β2-微球蛋白于腎小球毛細(xì)血管壁濾過(guò)，為近端腎小球吸收與分解。其水平關(guān)系著腎臟負(fù)荷，可直接反映腫瘤負(fù)荷，與患者預(yù)后關(guān)系密切。該蛋白是免疫應(yīng)答和腫瘤病變發(fā)生發(fā)展的重要參與者，其水平變化可對(duì)骨髓瘤細(xì)胞增殖與克隆予以反映[12]。骨髓瘤細(xì)胞合成并分泌β2-微球蛋白，發(fā)病后，免疫系統(tǒng)被破壞，經(jīng)激活活化，可增加淋巴細(xì)胞生物學(xué)活性，進(jìn)而增加血清β2-微球蛋白水平。多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)生可對(duì)患者腎功能造成不同程度的損傷，導(dǎo)致腎小球?yàn)V過(guò)率下降，也可使得血清β2-微球蛋白水平超出正常范圍[13]。

CRP由肝臟分泌，可結(jié)合肺炎雙球菌C多糖模式機(jī)體免疫調(diào)節(jié)的重要參與者，是非特異性炎癥指標(biāo)，可在微生物入侵、組織損傷、炎癥刺激下產(chǎn)生，其水平上升與白細(xì)胞介素-6增長(zhǎng)過(guò)多有關(guān)，后者既是刺激因子，可刺激肝臟合成CRP，間接反映其水平，進(jìn)而反映腫瘤負(fù)荷分期和預(yù)后，也可促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增長(zhǎng)，無(wú)感染因素影響時(shí)，CRP與腫瘤分布與預(yù)后相關(guān)[14]。

本研究顯示，聯(lián)合血清β2-微球蛋白、C反應(yīng)蛋白和骨髓涂片診斷多發(fā)性骨髓瘤的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為97.06%、95.45%、96.67%、98.57%和91.30%，明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)（P＜0.05），可見(jiàn)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的診斷效能更高，表明綜合3項(xiàng)指標(biāo)的價(jià)值，敏感性高，特異性強(qiáng)，可減少假陽(yáng)性與假陰性結(jié)果的出現(xiàn)，對(duì)疾病予以準(zhǔn)確診斷與預(yù)測(cè)。

Durie-Salmon分期是多發(fā)性骨髓瘤的基本分期方法，它根據(jù)血紅蛋白、血鈣、免疫球蛋白、M蛋白和溶骨性病灶等指標(biāo)將疾病分為Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期。患者疾病分期不同時(shí)，血清β2-微球蛋白和CRP水平之間也存在明顯差別，患者分期增加，疾病越嚴(yán)重，血清β2-微球蛋白和CRP水平也就越高[15]。文中數(shù)據(jù)顯示，Ⅱ期患者血清β2-微球蛋白（7.36±1.21）mg/L和CRP水平高于Ⅰ期，兩者水平均低于Ⅲ期患者，與上述觀點(diǎn)一致，證實(shí)β2-微球蛋白和CRP可用于判定多發(fā)性骨髓瘤臨床分期。學(xué)者王洪波[16]的研究結(jié)果顯示，Ⅲ期患者β2-微球蛋白水平為（12.98±1.14）mg/L，白細(xì)胞介素-6水平為（25.20±2.33）mg/L，明顯高于Ⅰ期、Ⅱ期患者，再次驗(yàn)證了文中觀點(diǎn)。

綜上所述，血清β2-微球蛋白、CRP聯(lián)合骨髓涂片可準(zhǔn)確診斷多發(fā)性骨髓瘤，也可在疾病分期中發(fā)揮作用。