胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3表達水平及其與臨床病理特征的相關性研究

米彩鋒 余儒桓 李亞利 余守雅

河南省平頂山市第一人民醫院消化內科，平頂山市 467000

胃癌是較為常見的消化系統惡性腫瘤，隨著醫學技術發展，患者生存率不斷提高。胃癌起病隱匿，不易發現，多數患者在出現明顯癥狀時已錯過最佳手術時機，只能選擇化療治療[1]。故及早發現胃癌并評估患者預后具有重大現實意義。血清DKK-1、淋巴細胞活化基因(lymphocyte activation gene，LAG)-3參與多種腫瘤的發生和發展過程，且研究發現DKK-1在肺癌、乳腺癌診療中具有重要的臨床價值[2-3]。人附睪蛋白(human epididymis protein，HE)4主要分布于人生殖系統中，并且與多種腫瘤(如卵巢癌、肺癌等)的原發腫瘤-區域淋巴結-遠處轉移(tumor-node-metastasis，TNM)、預后緊密相關。多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose) polymerase，PARP]-1存在于真核細胞中，近年有研究發現其在乳腺癌、子宮內膜癌、胰腺癌等篩查、治療中具有重要意義[4]。當前關于胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3與臨床病理特征的相關性的研究報告較少。本研究探討胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3表達水平及其與患者臨床病理特征的相關性，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2020年1月我院收治的60例胃癌患者作為研究組。納入標準：(1)經胃鏡活檢確診為胃癌；(2)癌組織浸潤黏膜與黏膜下層；(3)患者及其家屬簽署研究知情同意書。排除標準：(1)合并心肝腎功能障礙；(2)合并免疫性疾病；(3)合并其他惡性腫瘤；(4)存在既往精神疾病史；(5)存在全身急慢性感染。研究組患者TNM分期Ⅰ期6例、Ⅱ期22例、Ⅲ期27例、Ⅳ期5例；印戒細胞癌15例、管狀細胞癌25例、低分化腺癌14例、乳頭狀腺癌6例；胃癌細胞分化程度高32例、中15例、低13例；淋巴結轉移33例、無轉移27例。

另選同期在我院進行健康體檢的體檢者60例作為對照組。對照組納入標準：(1)無消化系統疾病；(2)簽署研究知情同意書。排除標準：(1)合并心肝腎功能障礙；(2)合并免疫性疾病；(3)合并精神疾病。兩組研究對象性別、年齡、體質量指數差異均無統計學意義(均P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 兩組患者的基本資料比較

1.2 方法 采兩組研究對象空腹靜脈血2 mL，3 500 r/min離心15 min，取上層清液。采用酶聯免疫吸附法檢測血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平，操作步驟按照試劑盒和儀器操作說明書進行。DKK-1試劑盒購自Biomedical company，PARP-1試劑盒購自默沙克生物，HE4試劑盒購自上海酶聯生物科技有限公司，LAG-3試劑盒購自上海法默生物科技有限公司。

1.3 統計學處理 采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析。計量資料以x±s表示，兩間組均數比較采用t檢驗；多組間均數比較采用F檢驗，兩兩比較采用LSD-t檢驗。計數資料以n(%)表示，組間比較比較采用χ2檢驗。對影響胃癌患者預后的因素進行多因素logistic回歸分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組研究對象的血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平的比較 研究組胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均高于對照組研究對象(均P<0.05)。見表2。

表2 兩組研究對象的血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平的比較 (x±s，μg/L)

2.2 不同臨床病理特征胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平的比較 TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者，血清LAG-3水平低于Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者(均P<0.05)。胃癌細胞分化程度越高，患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1表達水平越高，血清LAG-3表達水平越低。伴有淋巴結轉移胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均高于無淋巴結轉移患者(均P<0.05)。見表3。

表3 不同臨床病理特征胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平的比較 (x±s，μg/L)

2.3 胃癌患者預后影響因素的單因素分析 不同TNM分期和不同血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平的胃癌患者預后比較，差異均有統計學意義(均P<0.05)。見表4。

表4 胃癌患者預后影響因素的單因素分析 [n(%)]

2.4 胃癌患者預后影響因素的多因素logistic回歸分析 將胃癌患者死亡設為因變量(存活賦值為0，死亡為1)，TNM分期和血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平設為自變量，對胃癌患者預后的影響因素進行多因素logistic回歸分析，結果顯示：TNM分期和血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均是胃癌患者死亡的獨立危險因素(均P<0.05)。見表5和表6。

表5 自變量賦值

表6 胃癌患者預后影響因素的多因素logistic回歸分析

3 討 論

胃癌是常見消化系統惡性腫瘤，起病隱匿，患者出現明顯癥狀時，通常已失去手術最佳時機[5]。近年來，臨床上對胃癌的發生、發展和轉移過程機制的研究不斷深入。胃癌早期發現可提高手術切除率，對改善患者預后具有重要意義。研究[6-7]發現，LAG-3、DKK-1與腫瘤的發生、發展密切相關。其中LAG-3屬于負性刺激分子蛋白，其具有阻斷T淋巴細胞分化、增殖的作用，導致T淋巴細胞無法清除癌細胞，使其免疫逃逸[8]。DKK-1具有阻斷Wnt信號通路和促進癌細胞增殖、遷移的作用，是促進腫瘤生長、轉移的重要因子[9]。有研究[10-12]報告，HE4可促進胃癌細胞的增殖、浸潤[12]。PARP-1屬于一種催化酶，具有催化聚二磷酸腺苷核糖化的作用，參與細胞損傷修復、周期調整、代謝和凋亡的過程，其呈高表達時可促進癌細胞的增殖、遷移、浸潤[13]。

本研究結果顯示，胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均高于健康體檢者，這與一些研究[14-15]的結果相似。本研究結果顯示，TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者，血清LAG-3水平低于Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者；胃癌細胞分化程度越高，患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1表達水平越高，血清LAG-3水平越低；伴有淋巴結轉移胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均高于無淋巴結轉移患者。胃癌患者TNM分期、胃癌細胞分化程度、淋巴結轉移或與血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均有相關性。以上提示血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平與惡性腫瘤的發生、腫瘤遷移、浸潤緊密相關。多因素logistic回歸分析結果顯示，TNM分期和血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均是胃癌患者死亡的獨立危險因素，提示檢測血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平對胃癌篩查、病情監測和預后判斷具有重要的價值。

綜上所述，胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3呈高表達水平，并與胃癌的臨床TNM分期、淋巴結轉移、癌細胞分化程度密切相關，均為胃癌患者死亡的獨立危險因素。