阿膠產品的質量控制方法研究進展

張金龍 杜攀 張玉瑋 李廣華 張明娟

摘 要：本文對阿膠產品的質量控制方法研究進展進行了文獻整理和分析，從驢皮成分鑒定和重金屬及有害元素2個風險點考察質量控制方法研究的動態。通過綜述為提升阿膠控制標準、降低產品風險和加強市場監管手段提供新的思路，促進阿膠產業的良性發展。

關鍵詞：阿膠產品;質量控制;研究進展

Research Progress of Quality Control Methods for Ejiao Products

ZHANG Jinlong， DU Pan， ZHANG Yuwei， LI Guanghua*， ZHANG Mingjuan

（Liaocheng Inspection and Testing Center， Liaocheng 252000， China）

Abstract： In this paper， the research progress of quality control methods of Donkey-hide gelatin products was reviewed and analyzed. The research trends of quality control methods were investigated from two risk points of donkey skin composition identification and heavy metals and harmful elements. The review provides new ideas for improving the control standard of ejiao， reducing product risks and strengthening market supervision means， and promotes the benign development of ejiao industry.

Keywords： Ejiao products; quality control; research progress

1 阿膠產品概述

阿膠始載于《神農本草經》，列為上品[1]。2020年版《中國藥典》規定：“阿膠為馬科動物驢（Equus asinus L.）的干燥皮或鮮皮經煎煮、濃縮制成的固體膠”[2]。阿膠味甘、性平，歸肺、肝、腎經，具有補血滋陰、潤燥、止血的功效。阿膠作為補血潤燥的上品，己有2 500多年的藥用歷史，現收載于《中國藥典》2020年版一部。2002年，衛生部公布阿膠既是食品又是藥品，為藥食同源。阿膠作為中藥材應用于臨床疾病的治療，能制成食品、保健品，增強人體免疫力。

目前，市場上的阿膠產品有阿膠塊、阿膠粉、阿膠糕、阿膠膏、阿膠口服液和阿膠棗等，阿膠產品因其特有的養生保健功效而深受人們歡迎。但隨著我國經濟的發展，機械化進程加速，驢的農用功能逐漸被代替，驢的存欄量急劇減少。國家統計局發布的數據顯示，截至2019年末，國內毛驢存欄量260.07萬頭;中國驢聯網監測數據顯示，2019年驢屠宰量約為30萬頭。目前，國內驢皮產量遠不能滿足阿膠行業生產需求，中國成為世界最大的驢皮進口國。2020年，國際活驢和驢皮運輸流通變得困難，同時我國多地活驢流通不暢，產銷環節脫節加劇，驢皮成本進一步上漲。不法分子看到阿膠市場存在的巨大原料缺口，為謀求暴利，通過縮減驢皮使用量或添加牛皮、豬皮甚至工業皮革下腳料代替驢皮[3]，造成阿膠產品風險居高不下，不利于行業良性發展。基于阿膠特殊的制作工藝，驢皮分子結構被破壞、成分發生改變，導致阿膠鑒定困難。準確測定產品中驢皮成分和重金屬等風險指標成為阿膠質量控制的重點和難點[4]。

2 驢皮成分鑒別

驢皮成分的鑒別工作早期主要應用生物學分離技術進行鑒定。例如，李峰等[5]通過聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒別7種膠類;陳萍紅等[6]通過柱前衍生法測定阿膠氨基酸的種類及含量以區分阿膠和其他膠類。后期慢慢形成以高精密儀器分析鑒定驢皮成分，主要包括光譜法、色譜法和質譜法。光譜法主要用于快速檢測;液相色譜串聯質譜分析成為目前我國測定阿膠制品中驢皮成分的標準方法;以聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction，PCR）技術為代表的多重PCR、熒光實時定量PCR、DNA條形碼等技術可通過特定靶標分子的定位實現物種溯源，為驢皮成分的檢測提供新的方向。

2.1 光譜法

通過光譜技術依次獲取綜合信息，結合多變量數據分析手段處理光譜數據，可獲得更高效和直觀的效果。許長華等[7]借助傅立葉變換處理紅外光譜數據，通過提高譜圖分辨率，獲取目標物的微觀結構信息，可直觀、有效地鑒別阿膠。陳棟華等[8]通過分析差示掃描量熱法在不同溫度下4種膠的特征曲線，可鑒別驢、黃牛、水牛和豬皮膠4種膠。高鳳偉等[9]通過近紅外光譜技術結合Fisher判別對驢皮膠、豬皮膠、牛皮膠進行了識別研究，并構建識別模型，可實現100%識別3種膠材，對阿膠產品的快速識別與鑒別摻雜有積極意義。

2.2 色譜法

翟乙娟等[10]通過圓二色譜分析法測定阿膠、鹿角膠和龜甲膠的蛋白質二級結構，建立標準圖譜區分3種膠劑。王曉坤等[11]通過高效液相色譜法構建阿膠水溶性成分的指紋圖譜作為阿膠的評價指標。王翠芬等[12]采用柱前衍生化-高效液相色譜法測定阿膠中L-羥脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸、谷氨酸和精氨酸的含量，該方法操作簡單高效、結果準確。

2.3 質譜法

張貴鋒等[13]通過高效液相色譜質譜聯用技術比較酶切處理后的阿膠、牛皮膠和豬皮膠中多肽組成的差異，檢測樣品膠中特征多肽的序列可鑒別樣品膠的種類，此方法可用于追溯樣品膠的來源。沙小梅等[14]通過高效液相色譜串聯質譜技術研究阿膠的特征性多肽在經酶催化的18O上的標記情況，18O標記聯合液質聯用技術可用于明膠的含量檢測。程顯隆等[15]采用串聯四級桿質譜的多反應檢測法結合統計學方法尋找阿膠、黃明膠、新阿膠、龜甲膠和鹿角膠的特征離子，確定各膠類的專屬性特征肽，建立不同膠類的鑒別方法。

2.4 蛋白組學及其他方法

房芳等[16]結合shotgun蛋白質全譜分析對阿膠、新阿膠、黃明膠的熱穩定特征肽進行篩查和鑒定，找到3種膠類的特征肽段，并發現了其中不含羥脯氨酸的熱穩定特異性肽段分布規律。此外，通過該方法還發現了馬皮特征肽，可鑒定阿膠中是否加入馬皮膠，為阿膠驢皮成分鑒別提供技術支持。王若光等[17]通過激光解析/離子化-飛行時間質譜技術研究阿膠水溶性蛋白/肽，獲得可用蛋白及多肽9個，可生成阿膠蛋白質/肽成分質量指紋圖，有望作為阿膠數字化質控標準。葛正華[18]采用分級過濾分離法用濾紙、半透膜對膠劑中大分子蛋白質、還原糖、氨基酸和無機鹽及不溶性物質進行分離，并進行含量測定，得到不同樣品各組分含量有較大差異的結論，為膠劑質量標準提供思路。汪冰等[19]采用空間排阻色譜法對40批阿膠樣品圖譜主成分進行分析，發現不同企業的產品中蛋白質及多肽的相對分子質量分布有規律性，可為分析阿膠中蛋白質及多肽提供依據。王一村等[20]采用微滴式數字PCR方法測定DNA含量與DNA絕對拷貝數間，發現這2種參數與阿膠質量均呈線性關系，可用來評價阿膠產品質量，并進行純度鑒定和定量檢測。

3 重金屬元素分析

阿膠元素的分析測定方法主要包括原子吸收分光光度法、X射線熒光光譜法、等離子體發射光譜法等。電感耦合等離子質譜法（Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry，ICP-MS）因元素覆蓋范圍廣泛、靈敏度高、定量和半定量分析快及精度和準確度好等優點成為元素分析的首選。該技術既可用于阿膠中常量元素的分析，又可用于微量重金屬有害元素的分析。籍國霞等[21]用微波消解串聯電感耦合等離子體質譜法測定阿膠中14種元素，測定了阿膠中鐵、鋅、錳、鋇和鍶5種微量元素及鍶、砷、鎘、鈀、銅和汞6種重金屬元素;其中，鍶元素由皮革處理過程中引入，該元素的的確定有助于反查煉膠用皮的來源。孫大贏[22]采用微波消解和電感耦合等離子體質譜法檢測阿膠中鉛、鎘、砷、汞、銅和鉻6種元素的含量，此方法準確、靈敏，可快速檢測阿膠中的有害元素。徐清等[23]采用電感耦合等離子體質譜法對多批次龜甲及混偽品、龜甲膠藥材中鉻、砷、鎘、汞、鉛和銅6種元素進行檢測，結果顯示鉻和鉛元素超過限量標準，為重金屬元素的污染情況提供了依據。此外，YANG等[24]建立離子色譜法（Ion Chromatography，IC）通過在線預處理-富集元素的方法，測定了阿膠中六價鉻離子的含量，該方法有助于溯源煉膠用皮。

4 藥品阿膠質量控制方法研究現狀

隨著國家對藥品質量標準把控越來越嚴格，阿膠藥材標準也在不斷完善。1977年版《中國藥典》將阿膠收錄在中草藥及其制品部分;1985年版《中國藥典》將阿膠收錄在藥材部分，均只有性狀、鑒別、水分、灰分和重金屬及砷鹽的檢查項目;2000年版《中國藥典》將阿膠收錄在“成方及單味制劑”，新增檢查項“測定揮發性堿性物質”;2005年版《中國藥典》將其調整到藥材及飲片部分;增加了薄層鑒別、水不溶物、總氮含量測定項，2010年版《中國藥典》修訂了薄層色譜鑒別和水不溶物的測定，增加重金屬及有害元素檢測及阿膠中L-羥脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸的含量測定;2015年版《中國藥典》中的檢驗項目增加高效液相色譜質譜聯用法鑒別驢皮源成分，對阿膠進行定性鑒別;2020年版《中國藥典》中新增高效液相色譜質譜聯用法定量測定驢皮源特征多肽的含量。但由于膠類中藥的基質復雜、外觀性狀與內在質量的相關性不夠明確、活性成分不夠清晰等原因，檢驗方法復雜、成本高昂，但隨著技術的進步，藥典方法還會有進一步完善及提高。

5 結語

阿膠基于藥食同源的特性，越來越受消費者和市場的喜愛，人們對其生產工藝和質量要求也越來越嚴格。阿膠作為驢皮水解加工形成的復雜多元體系，質控難度主要是成分組成和分子質量分布范圍廣，導致其質量評價難度較大。目前，我國缺少簡單、高效的阿膠質量評價方法，因此應用多種分析技術和方法對阿膠產品質量進行分析，以保障阿膠產品的功效和安全成為亟待解決的難題。在驢皮成分的定性鑒別和定量分析上，目前采用的特征性肽的鑒別方法可行，有較強的專屬性。隨著2020版《中國藥典》的實施，阿膠市場的混亂現狀會有較大改觀，整個阿膠產業會更規范，實現良性發展。

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