急性腦梗死患者血清miR-151a-3p、miR-210水平變化及與炎癥因子的關系

姜 艷，徐 娟，胡臻華

上海楊思醫院神經內科，上海 200126

急性腦梗死屬于臨床較為常見的腦血管疾病，其臨床表現主要是語言障礙、運動障礙等。急性腦梗死具有致死率、致殘率高等特點，若患者發病后未采取及時有效的治療措施，則可嚴重影響患者生活質量及身體健康。微小RNA(miRNA)具有在外周血中難降解、易檢測等特點，被用于臨床多種疾病的診斷，已逐漸成為重要的生物標志物[1]。微小RNA-151a-3p(miR-151a-3p)、微小RNA-210(miR-210)是較為常見的兩種miRNA，其中miR-151a-3p具有激活機體氧化應激反應的作用；miR-210是一種缺氧激活因子，其在機體缺氧狀態下表達上調。血清白細胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-10(IL-10)及白細胞介素-17(IL-17)均為炎癥因子，其可較為敏感地反映出機體的炎性反應水平[2]。本研究旨在探討急性腦梗死患者血清miR-151a-3p、miR-210水平變化情況及其與炎癥因子的關系，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性選擇2019年3月至2021年3月本院收治的急性腦梗死患者102例作為觀察組，并選取同期體檢健康者102例作為對照組。對照組年齡51～77歲，平均(65.31±2.23)歲；男60例，女42例。觀察組年齡50～78歲，平均(65.52±2.17)歲；男58例，女44例；發病至入院時間1～25 h，平均(6.52±1.17)h；梗死區域：中央支15例，皮質支35例，分水嶺區4例，動脈主干48例；腦梗死體積：<5 cm3者55例，5～15 cm3者20例，>15 cm3者27例。兩組性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。納入標準：觀察組符合急性腦梗死相關診斷標準[3]；病歷資料齊全；無其他心血管疾病等。排除標準：合并惡性腫瘤；合并血液疾?。缓喜⒚庖吖δ苷系K；合并嚴重肝、腎功能異常；合并感染性疾病。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準。

1.2方法 于對照組體檢當日、觀察組入院時抽取空腹肘靜脈血約8 mL，并將其分為兩份。炎癥因子水平檢測：取其中一份血液標本，待其凝固后置于德國Hermle公司生產的微量高速型離心機中進行離心(3 000 r/min，10 min)，收集血清進行檢測，血清IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17檢測方法為酶聯免疫吸附法，試劑盒由上?？菩律锛夹g股份有限公司提供。血清miR-151a-3p、miR-210水平檢測：取另一份血液標本，離心分離血清(方法同上)，使用TRIzol Reagent RNA提取試劑盒(美國Invitrogen公司)提取血清總RNA，隨后使用紫外分光光度計(美國Thermo公司，NanoDrop ND-1000N型)及反轉錄-聚合酶鏈反應對血清miR-151a-3p、miR-210水平進行檢測，使用2-ΔΔCt法計算。

1.3觀察指標 比較兩組血清miR-151a-3p、miR-210及炎癥因子水平。比較不同腦梗死體積患者血清miR-151a-3p、miR-210及炎癥因子水平。分析血清miR-151a-3p和miR-210水平與炎癥因子水平的相關性。

2 結 果

2.1兩組血清miR-151a-3p、miR-210及炎癥因子水平比較 觀察組血清miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平高于對照組，血清miR-210水平低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清miR-151a-3p、miR-210及炎癥因子水平比較

2.2不同腦梗死體積患者血清miR-151a-3p、miR-210及炎癥因子水平比較 與腦梗死體積<5 cm3的患者相比，腦梗死體積5～15、>15 cm3的患者血清miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平較高，血清miR-210水平較低，與腦梗死體積5～15 cm3的患者相比，腦梗死體積>15 cm3的患者血清miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平較高，血清miR-210水平較低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同腦梗死體積患者血清miR-151a-3p、miR-210及炎癥因子水平比較

2.3血清miR-151a-3p和miR-210水平與炎癥因子水平的相關性 血清miR-151a-3p水平與IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平呈正相關(r=0.570、0.596、0.626、0.581，P<0.05)，血清miR-210水平與IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平呈負相關(r=-0.641、-0.613、-0.664、-0.596，P<0.05)。

3 討 論

急性腦梗死主要是指機體中腦部的供血動脈出現粥樣硬化，形成血栓，進而致使腦血管管腔變得狹窄或閉塞，引發腦內急性局灶型缺血、缺氧，從而發生腦組織壞死或軟化的一種病癥。近年來，急性腦梗死的發病率呈逐年升高趨勢，且趨向年輕化，對患者的健康造成了嚴重威脅。對急性腦梗死相關的生物標志物進行早期檢測，在選擇后續治療方案以及改善預后效果中發揮著重要的作用。

血清miR-151a-3p、miR-210是診斷急性腦梗死較為敏感的生物標志物，其與腦梗死的發生有密切關系，其中血清miR-151a-3p可激活機體的氧化應激反應，并可參與核因子κB(NF-κB)通路的信號傳導，故其水平升高可加重患者腦缺血再灌注損傷，進而損傷腦神經[4]。血清miR-210可隨機體的缺氧程度變化敏感地調節自身表達水平，其水平越低表明患者的缺氧程度越重，腦部損傷情況越嚴重[5]。血清IL-1β主要是由內皮細胞、成纖維細胞等合成、釋放，其可誘導機體發生炎性反應，促進炎癥介質水平的升高，故IL-1β水平在機體發生感染的過程中升高，可加重機體炎癥損傷，加速病情進展[6]；血清IL-10可參與機體的免疫炎性反應過程，其水平升高表明機體炎性反應加劇[7]；血清TNF-α是一種促炎細胞因子，其可參與機體的炎性反應及促進其他促炎因子水平的升高，血清TNF-α水平升高表明機體的炎癥狀態較重[8]；血清IL-17主要是由輔助性T淋巴細胞亞群所分泌，其具有誘導中性粒細胞自身趨化的作用，可加劇機體炎性反應，同時還可參與調節調控因子，進而促進動脈粥樣硬化形成[9]。本研究結果顯示，觀察組血清miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平高于對照組，血清miR-210水平低于對照組，且腦梗死面積越大，患者血清miR-151a-3p、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-17水平越高，血清miR-210水平越低，提示與健康者相比，急性腦梗死患者血清miR-151a-3p、炎癥因子水平較高，miR-210水平較低，且隨著病情的加重，血清miR-151a-3p、炎癥因子水平逐漸升高，miR-210水平逐漸降低，與郜樂樂等[10]的研究結果相符。相關研究表明，miR-210聯合miR-151a-3p診斷急性腦梗死的靈敏度、特異度等均高，具有較高的臨床應用價值，通過二者的聯合檢測能更加全面地掌握患者的實際病情，對其預后作出準確判斷[11]。此外，在急性腦梗死時，腦部的免疫炎性反應與NF-κB通路的信號傳導致使氧化應激反應異常等因素有關；同時，miRNA通過一系列的信號傳導機制及免疫調節過程最終引起機體的炎性反應，并且通過互相調節的作用，循環往復，使患者病情惡化。本研究結果顯示，血清miR-151a-3p水平與炎癥因子水平呈正相關，血清miR-210水平與炎癥因子水平呈負相關，與江鈺等[12]的研究結果相符。結合上述研究結果，提示臨床可通過檢測血清miR-151a-3p、miR-151a-3p及炎癥因子水平來評估急性腦梗死患者的病情變化。但本研究樣本量較少，且為單中心研究，研究結果可能具有局限性，后期會進行多中心、大樣本量的研究對結果進行進一步驗證。