基于QuEChERS結合氣相色譜-質譜測定新會柑（陳皮）及其制品中8種擬除蟲菊酯殘留

◎ 梁偉華，張健玲，伍長春，彭曉俊

（1.新會海關綜合技術服務中心，廣東 江門 529100；2.江門海關技術中心，廣東 江門 529100）

新會柑，學名茶枝柑，其最大特色是皮肉兼用，藥食同源，已有700多年的種植歷史，因其果皮有藥用和食療價值而聞名海內外[1]。新會柑干燥成熟果皮即廣陳皮是我國著名的中藥材，具有理氣健脾、燥濕化痰、降氣止嘔等功效[2-3]。擬除蟲菊酯農藥是一類能防治多種害蟲的廣譜殺蟲劑，具有高效、低毒、低殘留和對作物安全等特點，在新會柑的種植過程中被廣泛使用[4]。有文獻指出[5]擬除蟲菊酯類農藥據有蓄積性，長期接觸會引起神經毒性、生殖毒性和免疫毒性等疾病。隨著新會柑（陳皮）及其制品行業發展，消費者食品安全意識的提高，農藥殘留及快速檢測的問題愈發受到重視。因此，建立簡單、快速、高效的分析方法檢測新會柑（陳皮）及其制品中擬除蟲菊酯殘留，對于保障新會柑（陳皮）其及制品質量安全具有重大意義。

目前擬除蟲菊酯殘留檢測的方法主要有液相色譜法[6]、液相色譜-串聯質譜法[7]、氣相色譜法[8]、氣相色譜-質譜聯用儀[9]以及氣相色譜-串聯質譜法[10]。其中氣相色譜-質譜聯用儀法具有選擇性好、靈敏度高等特點，是擬除蟲菊酯常用的分析方法。本文根據QuEChERS凈化方法，結合氣相色譜-質譜聯用儀建立新會柑（陳皮）及其制品中8種擬除蟲菊酯快速、準確、高效的檢測方法，為新會柑（陳皮）及其制品的擬除蟲菊酯農殘檢測提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新會柑、陳皮、陳皮果脯以及陳皮普洱茶等實驗樣品，購于江門茶之柑陳皮茶業有限公司。

聯苯菊酯（Bifenthrin）、甲氰菊酯（Fenpropathion）、氯氟氰菊酯（Lambda-cyhalothrin）、氯菊（Permethrin）、氯氰菊酯（Cypermethin）、氟氰戊菊酯（Flucythrinate）、氰戊菊酯（Fenvalerate）及溴氰菊酯（Tralomethrin）8種擬除蟲菊酯（1 mL，100 μg·mL-1，農業部環境保護科研監測所）；正己烷、乙酸、乙酸乙酯及乙腈均為色譜純；實驗室用水均為去離子水。

1.2 儀器與設備

GCMS-QP2010 Ultra氣相色譜-質譜聯用儀；AOC-20si自動進樣系統（日本島津）；2-16型通用臺式高速離心機（德國Sigma公司）；LAB DANCER渦旋混合器（德國IKA公司）；DN-12W氮吹儀（上海比郎公司）；BAS124S電子天平（德國Sartorius公司）；Milli-Q型超純水系統（德國默克密理博公司）。

1.3 儀器條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：Shimadzu Rtx-1701（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純氦氣（純度大于99.999%）；進樣量：1 μL；流速：1 mL·min-1；進樣口溫度：285 ℃；進樣方式：不分留進樣；升溫程序：初始溫度50 ℃，保持1 min；以15 ℃·min-1升到200 ℃，保持8 min；以 5 ℃·min-1升到 275 ℃，保持 12 min。

1.3.2 質譜條件

電離方式：EI；離子源溫度：230 ℃；接口溫度：275 ℃；電離能量：70 eV；測定方式：選擇離子監測模式（Selected Ion Monitoring，SIM），質譜條件參數見表1。

表1 8種擬除蟲菊酯的CAS號、保留時間及質譜參數表

1.4 樣品提取

分別稱取粉碎的新會柑、陳皮、陳皮普洱茶、陳皮果脯和陳皮醬試樣各2.000 0 g放置于50 mL具塞塑料離心管中，加入水（陳皮、普洱茶加4 mL，其他加2 mL），用移液槍準確加入乙腈10 mL，擰好瓶蓋，渦旋振蕩混勻2 min，以9 000 r·min-1離心5 min。

1.5 提取液凈化

用移液槍準確吸取上述提取液2 mL于QuECh ERS凈化管中，渦旋振蕩2 min，以9 000 r·min-1離心5 min，吸取上清液過0.22 μm有機濾膜，進氣相色譜-質譜聯用儀（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）分析。

1.6 標準曲線的繪制

分別取1 mL的8種擬除蟲菊酯標準溶液配制成20 μg·mL-1的混合標準溶液，稀釋成 1 μg·mL-1，然后分 別 吸 取 10 μL、20 μL、50 μL、100 μL、500 μL 和1 000 μL，正己烷定容到1 mL，配制濃度為0.010 mg·L-1、0.020 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.50 mg·L-1和1.0 mg·L-1的標準工作曲線。

2 結果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

根據農藥的極性，在農藥殘留檢測中，常用的提取溶劑為正己烷、丙酮、乙酸乙酯和乙腈等。本實驗分別考察了上述有機溶劑作為提取液的提取效率。正己烷易于揮發；丙酮易于提取樣品中的色素，易溶于水，不利于萃取凈化；乙酸乙酯易于提取蠟質，不利于凈化；乙腈作為提取溶劑，不容易受脂溶性雜質的影響，提取效率較理想。綜合考慮，本實驗選擇乙腈作為提取溶劑。

2.2 提取方式的選擇

在提取前，加入水有利于增加樣品的浸濕，提高有機溶劑對擬除蟲菊酯的提取效率。本實驗分別在空白新會柑、陳皮樣品的前處理過程中加水和不加水，加入10 mL乙腈，旋渦振蕩提取2 min，以9 000 r·min-1離心5 min，然后吸取2 mL提取液進行凈化。在8種擬除蟲菊酯添加水平0.5 mg·kg-1時，不加水和加水前處理的回收率分別為81.2%～109.6%、89.4%～112.5%，結果表明加水處理對提取的效率有一定的提升。綜合考慮，本實驗選擇前處理加水、乙腈提取。

2.3 質譜條件的選擇

本實驗考察在標準電壓70 eV EI，離子源溫度分別使用200 ℃、230 ℃。結果表明離子源230 ℃時8種擬除蟲菊酯的響應更高，因此本實驗選擇離子源溫度230 ℃；配制8擬除蟲菊酯的混合標準溶液，以全掃描方式得到總離子流圖見圖1，確認保留時間，根據譜庫對每個物質的碎片離子、豐度比進行確認，選擇響應最高的離子為定量離子，選擇響應次高的離子作為定性離子。

圖1 8種擬除蟲菊酯混合標準溶液的總離子流圖

2.4 基質效應

由于新會柑、陳皮等樣品富含有機酸、色素等物質，在提取階段與目標物質共提取，在進入色譜柱后，直接影響目標物的電離，從而影響目標物的重復性和準確性。

本實驗配制濃度分別為 0.02 mg·L-1、0.50 mg·L-1的基質標準溶液和純有機試劑標準溶液，重復測定6次，考察8種擬除蟲菊酯在新會柑、陳皮、陳皮果脯、陳皮普洱茶中的基質效應，基質效應（Matrix Effect，ME）計算為：

結果表明，新會柑、陳皮、陳皮果脯和柑普茶作為基質，8種擬除蟲菊酯的基質效應在92.3%～106.2%，表明基質效應對定量結果影響不明顯，本實驗選擇純有機溶劑配制標準曲線。

2.5 線性范圍與檢出限

按1.6中方法繪制標準工作曲線，以質量濃度為橫坐標，對面物質的定量離子峰面積為縱坐標，考察8種擬除蟲菊酯的線性關系。結果表明，8種擬除蟲菊酯的線性關系良好，R2均大于0.998 5，以3倍信噪比（S/N）計算方法的檢出限，見表2。

表2 8種擬除蟲菊酯的線性參數和檢出限表

2.6 回收率與精密度

選擇空白新會柑、陳皮、陳皮普洱茶樣品分別添加濃度水平為 0.010 mg·kg-1、0.050 mg·kg-1、0.100 mg·kg-1的混合標準溶液進行回收率實驗，每個設置6個平行樣品。由表3可知，8種擬除蟲菊酯的回標回收率為88.4%～110.8%，相對標準偏差在3.6%～8.9%，表明該方法準確度高、穩定性好，能夠滿足檢測要求。

表3 8種擬除蟲菊酯的加標回收率和相對標準偏差表（n=6）

2.7 樣品分析

按上述實驗方法對新會柑、陳皮、陳皮普洱茶、陳皮果脯和陳皮醬等100批次樣品進行檢測，其中有2份陳皮普洱茶的聯苯菊酯有檢出，其余樣品均未檢出擬除蟲菊酯，根據國家食品中農藥最大殘留限量，檢出的聯苯菊酯未有超過限量值。

3 結論

本文針對新會柑、陳皮、陳皮普洱茶、陳皮果脯和陳皮醬等基質特點，以乙腈作為提取溶劑，經QuEChERS凈化，采用氣相色譜-質譜聯用儀法建立新會柑（陳皮）及其制品中8種擬除蟲菊酯的定性定量分析方法，該法操作簡單、快速高效，能夠為新會柑（陳皮）及其制品的擬除蟲菊酯農殘檢測提供參考。