氣相色譜法測定有機磷類農殘毛細管色譜柱的選擇

都麗莉，王云衢

（遼寧省鞍山市檢驗檢測認證中心，遼寧鞍山 114000）

在農業生產中，農藥的使用量較大，目前市場上被果農菜農廣泛應用的殺蟲劑主要是有機磷、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯類[1]。為了滿足人們對于果蔬高品質的需求，農藥、抗生素以及食品添加劑被大量使用，這些物質的超標使用會嚴重損害人們的身體健康。氣相色譜法是一種常用的檢驗有機磷類農殘的檢測方法，建立科學準確的農殘檢驗方法成為保障居民飲食安全的重要屏障[2]。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

正己烷（色譜純4 L/ 瓶），丙酮（分析純，500 mL/瓶），國藥集團化學試劑有限公司；農殘標準溶液（敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、樂果、水胺硫磷和毒死蜱）（濃度均為100 μg/mL），農業部農殘標樣；HP-1 毛細管色譜柱、DB-WAX 毛細管色譜柱、DB-1701P 毛細管色譜柱，安捷倫公司；比色管，離心管。

1.2 儀器與設備

7890B 氣相色譜儀，美國安捷倫公司；ME204E電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；KQ-300DE超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司；Allera64R 離心機，貝克曼庫爾特商貿（中國）有限公司；NS-10 氮吹儀，上海屹堯儀器科技發展有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品前處理

分別將蘋果、黃瓜切碎，充分混勻，放入食品加工器粉碎，準確稱取各樣品25.0 g 于100 mL 離心管中，加入50.0 mL 乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min 后，用濾紙過濾，濾液收集到裝有6 g 氯化鈉的100 mL 具塞比色管中，收集濾液40 ～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層[3]。

1.3.2 樣品凈化

從比色管中吸取上清液，放入加有凈化包的50 mL 離心管中，超聲5 min，8 000 r/min 離心5 min，取上清液10.00 mL 于比色管中，40 ℃水浴氮吹至近干。用正己烷定容至5.0 mL，再渦旋混勻，過濾膜移入樣品瓶中，供色譜測定。

1.3.3 標準工作液制備

取出冷藏的敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、樂果、水胺硫磷及毒死蜱農藥標準品，配制7種有機磷農藥的混合標準溶液。將標準品在室溫環境中靜置20 min，分別準確移取1 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷和丙酮的混合溶液4 ∶1 定容，搖勻，得到10 μg/mL 混標中間液。將中間逐級稀釋，最終配制出濃度為0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.40 μg/mL、0.60 μg/mL、0.80 μg/mL 和1.00 μg/mL 的混合標準曲線系列溶液。

2 結果與分析

2.1 柱溫箱升溫程序及進樣方式

程序升溫在氣相色譜檢驗中是至關重要的一個環節，升溫程序的設定直接決定了待測組分是否能夠有效分離，尤其是沸點相近的組分分離的難度高。為了更好地分離沸點相近的組分，不同型號的毛細管柱會添加不同的固定相，或者搭配不同比例。根據混合標準品的沸點來設置程序升溫的初始溫度以及進樣口溫度。程序升溫的初始溫度要低于混合標準品的最低沸點，進樣口溫度應高于或等于混合標準品中最高沸點的溫度。檢測器的溫度不低于200 ℃，不高于色譜柱的最高使用溫度，兼顧各組分的沸點及熱穩定性[4]。

農殘檢測屬于痕量檢測，待測組分濃度較小，進樣方式采取不分流進樣，進樣量1 μL；選用不分流進樣方式的優點是進樣量大，樣品幾乎全部進入色譜柱中，色譜峰絕對響應值高；氣化室溫度：250 ℃；檢測器溫度：250 ℃；程序升溫條件：初始溫度120 ℃，保持1.0 min，以20 ℃/min 升至185 ℃，保 持5.0 min， 以10 ℃/min 升 至235 ℃， 保 持10.0 min；流速：7.0 mL/min；進樣量：1 μL；尾吹氣流量為3 mL/min。

2.2 色譜柱的選擇

毛細管色譜柱具有分離效率高、分析速度快、柱容量小、靈敏度高等優點，已經逐步取代填充柱成為主流[5]。本試驗選擇不同類型的3 種毛細管色譜柱在相同色譜條件下進行分析。3 種毛細管色譜柱為弱極性色譜柱HP-1（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）；中等極性色譜柱DB-1701P（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；強極性色譜柱DB-WAX 毛細管色譜柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）。

選取1.0 μg/mL 的混合標準溶液用上述3 種毛細管色譜柱在上述升溫程序的條件下進行分析，得到3 組7 種農殘混標的氣相色譜圖。從分離情況來看，HP-1 毛細管柱與DB-WAX 色譜柱分離情況相似，其中組分水胺硫磷與毒死蜱出峰重合，見圖1、圖2；由圖3 可知，DB-1701P 毛細管柱分離7 種農藥種類，分離度、峰型、響應值均為3 根色譜柱中最好，由此得出結論，DB-1701P（30 m× 0.250 mm×0.25 μm）毛細管色譜柱分離效果最好，可作為試驗用色譜柱。

圖1 HP-1 毛細管柱色譜圖

圖2 DB-WAX 毛細管柱色譜圖

圖3 DB-1701P 毛細管柱色譜圖

2.3 驗證試驗

2.3.1 加標回收試驗

選取蘋果為空白基質，理論加標濃度為0.10 μg/mL進行重復6 次的加標回收和精密度試驗，結果見表1。

表1 7 種有機磷農殘加標回收率和相對標準偏差（n=6）

2.3.2 7 種農藥組分的線性范圍、回歸方程、相關系數

濃度在0.02 ～1.00 μg/mL 線性范圍內，7 種組分的回歸方程以及相關系數見表2。

表2 7 種農藥組分的回歸方程及相關系數

3 結論與討論

選取DB-1701P（30 m×0.32 mm×0.25 μm）毛細管柱，分離效果比較理想。在0.02 ～1.00 μg/mL，線性關系良好（相關系數為0.998 4 ～0.999 5），能滿足定量檢測相關要求，7 種有機磷農藥的加標回收率為88.2%～109.1%，精密度為0.20 ～0.41，實驗結果比較理想。