不同分期胃癌患者Survivin 和Caspase-3 表達(dá)差異分析

樸海超，王春艷

（吉林市中心醫(yī)院 內(nèi)鏡診療中心，吉林 吉林 132013）

0 引言

胃癌是發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一，在各種惡性腫瘤中，胃癌的發(fā)病率位居第2位，位列肺癌之后，死亡率居第3位，僅次于肺癌和肝癌[1]。胃癌患者發(fā)病后，早期癥狀多不明顯。隨著病情進(jìn)展，后期可出現(xiàn)嘔吐、嘔血、黑便和疼痛等。此時(shí)治療難度大，且效果并不十分理想。因此早發(fā)現(xiàn)，早治療，是提高胃癌患者生存率和生存時(shí)間的根本前提[2-3]。以此為出發(fā)點(diǎn)，以不同分期胃癌患者為研究對(duì)象，采用免疫組織化學(xué)法，比較患者Survivin和Caspase-3蛋白表達(dá)的差異，以為胃癌患者的早期診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2019年12月-2020年12月選擇在我院治療的72例胃癌患者為研究對(duì)象。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核和患者知情同意后開(kāi)展研究。納入標(biāo)準(zhǔn)包括符合胃癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；采取手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)包括術(shù)前行放化療治療的患者等。根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟制定的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，將Ⅰ期和Ⅱ期胃癌患者納入早期組，將Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者納入晚期組。早期組患者31例，晚期組患者41例。在早期組中，男17例，女14例，平均年齡（52.26±5.89）歲。在晚期組中，男24例，女17例，平均年齡（53.10±5.12）歲。2組患者基本情況無(wú)差異（P＞0.05）。

1.2 標(biāo)本制備及實(shí)驗(yàn)方法

取患者胃癌組織制備標(biāo)本。同時(shí)為了進(jìn)一步比較Survivin和Caspase-3的表達(dá)情況，取距患者腫瘤組織邊緣10cm以上正常胃組織20例為對(duì)照。采用免疫組織化學(xué)法，檢測(cè)胃癌組織和正常組織的Survivin和Caspase-3的表達(dá)。免抗人多克隆抗體Survivin和免抗人多克隆抗體Caspase-3均購(gòu)自上海信裕生物科技有限公司。免疫組織化學(xué)法試劑盒購(gòu)自武漢賽培生物科技有限公司。按免疫組織化學(xué)法試劑盒說(shuō)明書(shū)操作要求染色。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

按Kawasake方法判斷Survivin和Caspase-3蛋白的表達(dá)情況。具體標(biāo)準(zhǔn)為染色強(qiáng)度分為不著色、淡黃、黃和棕黃4種，分別積0、1、2和3分。陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比為5%為0分，6%～25%為1分，以上每累加25%增加1分。染色強(qiáng)度評(píng)分與陽(yáng)性百分比評(píng)分相乘的結(jié)果作為最終判定結(jié)果，即0、1～4、5～8、9～12，分別表示-、+、++和+++。其中+、++和+++均表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。

1.4 數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)

采用SPSS 20.0分析結(jié)果，計(jì)數(shù)資料以（n，%）表示，行卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2 結(jié)果

2.1 Survivin和Caspase-3蛋白在胃癌組織和正常組織的表達(dá)比較

Survivin和Caspase-3蛋白在胃癌組織和正常組織的表達(dá)比較如表1所示。可見(jiàn)在Survivin蛋白方面，其在72例胃癌組織標(biāo)本中，總計(jì)46例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率63.89%。在20例正常組織中，0例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為0.00%。胃癌組織標(biāo)本陽(yáng)性率高于正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；在Caspase-3蛋白方面，其在72例胃癌組織標(biāo)本中，總計(jì)28例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為38.89%。在20例正常組織中，17例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為85.00%。胃癌組織標(biāo)本陽(yáng)性率低于正常組織（P＜0.05）。

表1 Survivin和Caspase-3蛋白在胃癌組織和正常組織的表達(dá)比較（n，%）

2.2 不同分期胃癌患者Survivin和Caspase-3蛋白的表達(dá)比較

不同分期胃癌患者Survivin和Caspase-3蛋白的表達(dá)比較如表2所示。可見(jiàn)在Survivin蛋白方面，其在31例早期胃癌患者的胃癌組織標(biāo)本中，總計(jì)14例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為45.16%。在41例晚期胃癌患者中，32例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為78.05%。晚期胃癌組織標(biāo)本陽(yáng)性率高于早期胃癌組織（P＜0.05）；在Caspase-3蛋白方面，其在31例早期胃癌患者的胃癌組織標(biāo)本中，19例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為61.29%。在41例晚期胃癌患者中，9例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為21.95%。晚期胃癌組織標(biāo)本陽(yáng)性率低于早期胃癌組織（P＜0.05）。

表2 不同分期胃癌患者Survivin和Caspase-3蛋白的表達(dá)比較（n，%）

3 討論

胃癌是發(fā)病于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，據(jù)第12屆胃癌大會(huì)統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)表明，我國(guó)每年新發(fā)胃癌患者約為68萬(wàn)例，發(fā)病率僅次于肺癌。胃癌除具有發(fā)病率較高的特點(diǎn)，由于其早期癥狀輕微，導(dǎo)致患者往往對(duì)病情加以忽視[4-5]，而一旦進(jìn)入中晚期，治療難度較大，中晚期胃癌患者五年內(nèi)生存率低于30%。而若早期發(fā)現(xiàn)，如以早期胃癌患者為例，五年內(nèi)生存的幾率將＞90%。由此可見(jiàn)，早發(fā)現(xiàn)和早治療，對(duì)提高胃癌患者治療效果和延長(zhǎng)生存時(shí)間，起著重要作用[6-8]。

Survivin蛋白具有腫瘤特異性，通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，Survivin蛋白與癌細(xì)胞的分化增殖關(guān)系較為密切[9-10]，在胃癌、乳腺癌和肝癌等多種癌癥的癌細(xì)胞組織中，Survivin蛋白均分布于其中[11-13]。如帕爾哈提·沙依木等采用免疫組織化學(xué)法，對(duì)300例胃癌石蠟組織標(biāo)本進(jìn)行研究分析，發(fā)現(xiàn)Survivin蛋白陽(yáng)性率高達(dá)72.00%，而在120例正常組織的標(biāo)本中，Survivin蛋白陽(yáng)性率僅為5.00%[14]。Caspase-3是存在于胞質(zhì)溶膠中結(jié)構(gòu)上相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶。Caspase-3是細(xì)胞凋亡的主要因素之一，Caspase-3活化后，可酶解細(xì)胞外基質(zhì)和骨架蛋白，進(jìn)使細(xì)胞功能發(fā)生改變和破裂，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。而癌細(xì)胞形成后，抑制細(xì)胞凋亡基因和促進(jìn)細(xì)胞凋亡基因表達(dá)會(huì)上調(diào)和下調(diào)，導(dǎo)致癌細(xì)胞逃避細(xì)胞凋亡的過(guò)程而繼續(xù)存活，即Caspase-3蛋白檢測(cè)結(jié)果與癌細(xì)胞增值呈負(fù)相關(guān)。如劉小敏等在實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，在36例正常胃黏膜組織中，Caspase-3蛋白陽(yáng)性率高達(dá)83.33%。而在80例胃癌組織中，Caspase-3陽(yáng)性率僅為32.50%[15]。

在本次實(shí)驗(yàn)研究中，免疫組織化學(xué)法首先檢測(cè)胃癌組織和正常組織的Survivin和Caspase-3蛋白的表達(dá)。發(fā)現(xiàn)胃癌組織標(biāo)本Survivin蛋白陽(yáng)性率高于正常組織，Caspase-3蛋白陽(yáng)性率低于正常組織，與帕爾哈提·沙依木等人研究結(jié)果基本一致。另以胃癌組織標(biāo)本為研究對(duì)象，根據(jù)患者胃癌分期的不同，分為早期組和晚期組進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。通過(guò)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，晚期癌組織標(biāo)本Survivin蛋白陽(yáng)性率高于早期胃癌組織樣本，Caspase-3蛋白陽(yáng)性率低于早期胃癌組織樣本。提示，Survivin和Caspase-3蛋白表達(dá)，可在一定程度上作為判定胃癌患者病情發(fā)展的依據(jù)。