胃癌患者免疫治療聯合化療的臨床效果分析

趙鴻鷹

（徐州市腫瘤醫院·徐州市第三人民醫院·江蘇大學附屬徐州醫院腫瘤內科 江蘇 徐州 221000）

胃癌是消化道惡性腫瘤之一，多發于中老年群體，該病在近年來的發生率不斷上升，嚴重影響到患者的日常生活與健康安全。胃癌的形成與炎癥刺激、免疫狀態、遺傳及基因突變等因素有著密切聯系。在胃癌早期，由于癥狀不明顯，大多患者會誤認為胃痛等癥狀只是由簡單胃腸不適或胃炎引起，沒有盡早前往醫院就診，導致延誤了最佳治療時機。我國診斷時便已處于晚期的胃癌患者達到82%左右。針對晚期胃癌患者，手術及放化療等傳統治療方法可獲得一定療效，但術后出現轉移或復發的患者高達58%，其3 年生存率也僅為18%左右。因此，探尋出更為科學有效的治療方法，積極提高胃癌患者的治療效果及生存時間具有重要意義。本研究旨在探討對胃癌患者聯合應用免疫治療與化療的臨床效果，現報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

取2019 年3 月—2021 年3 月徐州腫瘤醫院收治的86 例胃癌患者，根據隨機數字表法分為對照組與觀察組各43 例。納入標準：①所有患者經胃鏡及手術病理等檢查，均符合胃癌的診斷標準；②患者卡氏評分在60 分以上；③重要器官功能均正常，生存期預計＞6 個月；④臨床資料完整。排除標準：①合并嚴重器官功能衰竭或其他惡性腫瘤者；②嚴重感染者；③長期服用免疫抑制劑者；④認知及意識障礙者等；⑤出現不能耐受的不良反應或無法完成治療過程者；⑥處于孕期或哺乳期婦女。對照組男性患者30 例，女性13 例；年齡34 ～78 歲，平均年齡（46.57±6.83）歲；病灶部位：胃竇部12 例，胃體部18 例，胃底部及賁門3 例。觀察組男性患者29 例，女性14 例；年齡35 ～77 歲，平均年齡（46.54±6.80）歲；病灶部位：胃竇部12 例，胃體部17 例，胃底部及賁門14 例。兩組患者的一般資料比較，差異無統計學意義（＞0.05），具有可比性。本做法符合《赫爾辛基宣言》要求。

1.2 方法

對照組采取化療，在第1 天，按照130 mg/（m·d）的劑量標準向患者靜脈滴注奧沙利鉑，在第1 天至第14 天，同時按照2 500 mg/（m·d）的劑量標準向患者應用卡培他濱。1 個療程共28 d，連續治療2 個療程。

觀察組應用免疫治療聯合化療。在化療前2 d 培養樹突狀細胞（dendritic cells, DC）與細胞因子誘導的殺傷細胞（cytokine-induced killer cells, CIK），在第3 天對患者實施化療，并向其皮下注射樹突狀細胞4 次，回輸CIK 細胞2 次。1 個療程共28 d，連續治療2 個療程。其中，DC 細胞的制備、CIK 的體外培養、DC-CIK 細胞共培養的操作步驟如下。（1）DC 細胞的制備：在對患者實施化療前2 d，采集其自身外周血單個核細胞，用淋巴細胞分離液，以密度梯度離心法將單個核細胞進行純化，純度確保超過90%，再用培養基將細胞的密度調節在2.5 ～3.0×10/mL 的范圍內。隨后把細胞接種在6 孔培養板中，并放入到二氧化碳濃度為5%的培養箱中，控制溫度在37 ℃左右，共孵育120 min。待90 min 以后，將未貼壁的外周血淋巴細胞（peripheral blood lymphocyte,PBL）吸取出來，將DC 細胞培養液添加進孔中，再放入到二氧化碳濃度為5%，溫度在37 ℃的培養箱中進行誘導。在第3 天，進行1/3 換液，在第5 天，收獲未成熟的DC 細胞，并將其加入濃度均為20 ng/mL 的細胞腫瘤因子α 與IL-1β 中，以誘導DC 細胞成熟，在第7 天，便可獲得成熟的DC 細胞。（2）CIK 的體外培養：采用無血清培養液，將單個核細胞的濃度調整至2 ～4×10/mL，再放入到二氧化碳濃度為5%的培養箱中，控制溫度在37 ℃，共孵育12 0 min，收集懸浮細胞，借助無血清培養液，調節細胞的濃度在1 ～2×10/mL，再將1 000 U/l 的IFN-γ 加入其中，放入到二氧化碳濃度為5%的培養箱中，控制溫度在37 ℃，共孵育120 min。在第2 天，添加IL-1α（濃度為10 ng/mL）與IL-2（濃度為250 U/mL），并進行培養。（3）DC-CIK 細胞共培養：培養CIK 細胞7 d 后，合并細胞，即在CIK 細胞懸液中加入獲取的成熟DC 細胞，補充10%的自體血漿濃度，再將濃度為250 U/mL 的血清細胞因子2 添加進去并混勻。隨后放入到二氧化碳濃度為5%的培養箱中，控制溫度在37 ℃，共培養2 ～3 d，啟動回輸。

1.3 觀察指標

（1）T 細胞亞群比例：采用流式細胞術方法，記錄患者治療前后CD3、CD4、CD8的比例。（2）白細胞介素水平及中位生存期：采用ELISA 法，檢測患者治療后的血清白介素6（interleukin-6, IL-6）、白介素12（interleukin-12, IL-12）水平，并記錄其中位生存期。（3）療效判定標準：完全緩解為病灶完全消失，并且維持28 d 的時間。部分緩解為病灶有所消失，且總值不超過50%，持續28 d。穩定為病灶減少的幅度不超過50%，或增大的幅度不超過25%。進展為有新的病灶出現。

1.4 統計學方法

2.結果

2.1 兩組T 細胞亞群比例比較

治療前，觀察組、對照組的CD3、CD4、CD8比例比較，差異無統計學意義（＞0.05），具有可比性；治療后，觀察組的CD3、CD4、CD8比例顯著高于對照組，差異有統計學意義（＜0.05），見表1。

表1 兩組T 細胞亞群比例比較（±s，分）

2.2 兩組血清白細胞介素水平及中位生存期比較

治療后，觀察組血清IL-6、IL-12 水平及中位生存期顯著高于對照組，差異有統計學意義（＜0.05），見表2。

表2 兩組血清IL 水平及中位生存期比較（±s）

2.3 兩組治療總有效率比較

觀察組治療總有效率（76.74%）高于對照組（58.14%），差異有統計學意義（＜0.05），見表3。

表3 治療總有效率對比[n（%）]

3.結論

胃癌是出現在胃黏膜上皮組織的一種常見惡性腫瘤，多發于中老年群體，近年來隨著人們飲食結構的改變、工作壓力的增大以及HPV 感染等多種因素的影響，該病的發病呈年輕化的趨勢。早期胃癌癥狀不明顯，主要表現為噯氣、胃痛等，癥狀與胃潰瘍、胃炎等胃部疾病類似，導致不容易察覺。近年來，隨著手術、放療及化療等傳統療法在胃癌治療中的規范化、綜合化應用，大大提高了胃癌的治療有效率，同時也在一定程度上延長了患者的生存期。術后輔助化療等療法雖然能夠有效減少胃癌的復發，但仍難以完全清除體內殘留的微小病灶，病灶局部復發率和遠處轉移率依舊比較高，并且部分患者化療依從性較差，免疫力減退，易出現多種化療并發癥和較高的毒副反應發生率，影響患者的生存質量。因此，臨床應探尋更為安全、高效的治療方案，以促進胃癌患者治療效果及生活質量的提高。

近年來，隨著分析細胞生物學以及免疫學研究的不斷深入，人們也愈發關注基因治療、細胞因子治療等新型治療手段在惡性腫瘤疾病中的應用。其中，惡性腫瘤細胞可以表達許多不同的蛋白質，這些蛋白質可能被免疫系統識別，成為抑制癌癥發生的靶點，然而腫瘤可以通過免疫抑制作用創造利于癌癥細胞生長的腫瘤微環境，干擾機體的抗腫瘤反應。免疫細胞療法在腫瘤治療中能夠調節宿主免疫功能，特定的過繼性免疫細胞能夠靶向識別腫瘤細胞，具有特異性的殺傷腫瘤細胞的作用。

通過展開DC 細胞與CIK 細胞的共培養，可促進CIK細胞的大量增殖及成熟，增強CIK 細胞毒活性，促進樹突狀細胞的成熟。（1）在細胞因子治療中，采用DC 細胞可起到誘導、殺傷細胞的功能，通過將這些免疫細胞輸入到胃癌患者的體內，可發揮出治療惡性腫瘤的作用。經實驗研究得知，腫瘤的發生、發展，與樹突狀細胞均存在緊密聯系。作為一種專職抗原遞呈細胞，成熟的DC 細胞在與T 細胞接觸以后，會激發免疫應答反應，而對于未成熟的DC 細胞，其抗原吞噬能力極強。（2）細胞因子有著非常強的誘導殺傷細胞增殖能力，在體外便可被誘導及繁殖，免疫特性比較強。作為一群使用多種細胞因子誘導的殺傷細胞，CIK 細胞兼有T 淋巴細胞和自然殺傷（natural killer, NK）細胞的特性。（3）CIK 細胞治療指從患者外周血中采集的單個核細胞在體外經CD3 單抗、干擾素-γ 及IL-2 等多種細胞因子的修飾、刺激、培養以及增殖以后，再回輸到患者體內，從而達到迅速殺傷腫瘤，緩解放化療毒性的作用。CIK 細胞具有較強的增殖活性及殺傷活性，其主要釋放的細胞因子包括干擾素和腫瘤壞死因子，對身體的不良反應小，可以很好地增強人體的免疫功能，在化療后回輸CIK 細胞可以明顯提高患者的免疫功能。

相關研究表明，CD3能夠較好地反映CD4與CD8水平。CD4作為人體免疫系統中一種不可或缺的免疫細胞，可啟動身體來對抗微生物，其數量變化還可將人體免疫功能的變化情況反映出來，一旦機體免疫系統受到損害，CD4的水平就會降低。CD8能夠對T 淋巴細胞起殺傷性作用，這表明其能起到很好的殺死腫瘤細胞及抗病毒感染等功效。作為一種多功能細胞因子，IL-6 主要是由腫瘤細胞自分泌產生的，受到腫瘤細胞壞死因子的影響，其水平高低能夠調節胃癌患者的免疫狀態。IL-12 對T細胞的增殖及分化可起到促進作用，經動物實驗研究得知，IL-12 對腫瘤細胞的轉移可起到明顯的抑制作用。本文給予觀察組胃癌患者免疫治療聯合化療，結果顯示，觀察組患者治療后的CD3、CD4、CD8等T 細胞亞群比例，血清IL-6、IL-12 水平，中位生存期，均高于單純接受化療的對照組患者，差異有統計學意義（＜0.05）。這一結果進一步證實了免疫治療聯合化療對胃癌患者的治療效果及價值優于單純化療。

綜上所述，通過對胃癌患者聯合應用免疫治療與化療，可獲得較為理想的療效，提高其T 細胞亞群比例及血清白細胞介素水平，進一步延長患者的中位生存期，在臨床中有著較高的應用價值。