胃癌患者免疫治療聯(lián)合化療的臨床效果分析

趙鴻鷹

（徐州市腫瘤醫(yī)院·徐州市第三人民醫(yī)院·江蘇大學(xué)附屬徐州醫(yī)院腫瘤內(nèi)科 江蘇 徐州 221000）

胃癌是消化道惡性腫瘤之一，多發(fā)于中老年群體，該病在近年來(lái)的發(fā)生率不斷上升，嚴(yán)重影響到患者的日常生活與健康安全。胃癌的形成與炎癥刺激、免疫狀態(tài)、遺傳及基因突變等因素有著密切聯(lián)系。在胃癌早期，由于癥狀不明顯，大多患者會(huì)誤認(rèn)為胃痛等癥狀只是由簡(jiǎn)單胃腸不適或胃炎引起，沒有盡早前往醫(yī)院就診，導(dǎo)致延誤了最佳治療時(shí)機(jī)。我國(guó)診斷時(shí)便已處于晚期的胃癌患者達(dá)到82%左右。針對(duì)晚期胃癌患者，手術(shù)及放化療等傳統(tǒng)治療方法可獲得一定療效，但術(shù)后出現(xiàn)轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的患者高達(dá)58%，其3 年生存率也僅為18%左右。因此，探尋出更為科學(xué)有效的治療方法，積極提高胃癌患者的治療效果及生存時(shí)間具有重要意義。本研究旨在探討對(duì)胃癌患者聯(lián)合應(yīng)用免疫治療與化療的臨床效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

取2019 年3 月—2021 年3 月徐州腫瘤醫(yī)院收治的86 例胃癌患者，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組與觀察組各43 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者經(jīng)胃鏡及手術(shù)病理等檢查，均符合胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者卡氏評(píng)分在60 分以上；③重要器官功能均正常，生存期預(yù)計(jì)＞6 個(gè)月；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重器官功能衰竭或其他惡性腫瘤者；②嚴(yán)重感染者；③長(zhǎng)期服用免疫抑制劑者；④認(rèn)知及意識(shí)障礙者等；⑤出現(xiàn)不能耐受的不良反應(yīng)或無(wú)法完成治療過(guò)程者；⑥處于孕期或哺乳期婦女。對(duì)照組男性患者30 例，女性13 例；年齡34 ～78 歲，平均年齡（46.57±6.83）歲；病灶部位：胃竇部12 例，胃體部18 例，胃底部及賁門3 例。觀察組男性患者29 例，女性14 例；年齡35 ～77 歲，平均年齡（46.54±6.80）歲；病灶部位：胃竇部12 例，胃體部17 例，胃底部及賁門14 例。兩組患者的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05），具有可比性。本做法符合《赫爾辛基宣言》要求。

1.2 方法

對(duì)照組采取化療，在第1 天，按照130 mg/（m·d）的劑量標(biāo)準(zhǔn)向患者靜脈滴注奧沙利鉑，在第1 天至第14 天，同時(shí)按照2 500 mg/（m·d）的劑量標(biāo)準(zhǔn)向患者應(yīng)用卡培他濱。1 個(gè)療程共28 d，連續(xù)治療2 個(gè)療程。

觀察組應(yīng)用免疫治療聯(lián)合化療。在化療前2 d 培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞（dendritic cells, DC）與細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells, CIK），在第3 天對(duì)患者實(shí)施化療，并向其皮下注射樹突狀細(xì)胞4 次，回輸CIK 細(xì)胞2 次。1 個(gè)療程共28 d，連續(xù)治療2 個(gè)療程。其中，DC 細(xì)胞的制備、CIK 的體外培養(yǎng)、DC-CIK 細(xì)胞共培養(yǎng)的操作步驟如下。（1）DC 細(xì)胞的制備：在對(duì)患者實(shí)施化療前2 d，采集其自身外周血單個(gè)核細(xì)胞，用淋巴細(xì)胞分離液，以密度梯度離心法將單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行純化，純度確保超過(guò)90%，再用培養(yǎng)基將細(xì)胞的密度調(diào)節(jié)在2.5 ～3.0×10/mL 的范圍內(nèi)。隨后把細(xì)胞接種在6 孔培養(yǎng)板中，并放入到二氧化碳濃度為5%的培養(yǎng)箱中，控制溫度在37 ℃左右，共孵育120 min。待90 min 以后，將未貼壁的外周血淋巴細(xì)胞（peripheral blood lymphocyte,PBL）吸取出來(lái)，將DC 細(xì)胞培養(yǎng)液添加進(jìn)孔中，再放入到二氧化碳濃度為5%，溫度在37 ℃的培養(yǎng)箱中進(jìn)行誘導(dǎo)。在第3 天，進(jìn)行1/3 換液，在第5 天，收獲未成熟的DC 細(xì)胞，并將其加入濃度均為20 ng/mL 的細(xì)胞腫瘤因子α 與IL-1β 中，以誘導(dǎo)DC 細(xì)胞成熟，在第7 天，便可獲得成熟的DC 細(xì)胞。（2）CIK 的體外培養(yǎng)：采用無(wú)血清培養(yǎng)液，將單個(gè)核細(xì)胞的濃度調(diào)整至2 ～4×10/mL，再放入到二氧化碳濃度為5%的培養(yǎng)箱中，控制溫度在37 ℃，共孵育12 0 min，收集懸浮細(xì)胞，借助無(wú)血清培養(yǎng)液，調(diào)節(jié)細(xì)胞的濃度在1 ～2×10/mL，再將1 000 U/l 的IFN-γ 加入其中，放入到二氧化碳濃度為5%的培養(yǎng)箱中，控制溫度在37 ℃，共孵育120 min。在第2 天，添加IL-1α（濃度為10 ng/mL）與IL-2（濃度為250 U/mL），并進(jìn)行培養(yǎng)。（3）DC-CIK 細(xì)胞共培養(yǎng)：培養(yǎng)CIK 細(xì)胞7 d 后，合并細(xì)胞，即在CIK 細(xì)胞懸液中加入獲取的成熟DC 細(xì)胞，補(bǔ)充10%的自體血漿濃度，再將濃度為250 U/mL 的血清細(xì)胞因子2 添加進(jìn)去并混勻。隨后放入到二氧化碳濃度為5%的培養(yǎng)箱中，控制溫度在37 ℃，共培養(yǎng)2 ～3 d，啟動(dòng)回輸。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）T 細(xì)胞亞群比例：采用流式細(xì)胞術(shù)方法，記錄患者治療前后CD3、CD4、CD8的比例。（2）白細(xì)胞介素水平及中位生存期：采用ELISA 法，檢測(cè)患者治療后的血清白介素6（interleukin-6, IL-6）、白介素12（interleukin-12, IL-12）水平，并記錄其中位生存期。（3）療效判定標(biāo)準(zhǔn)：完全緩解為病灶完全消失，并且維持28 d 的時(shí)間。部分緩解為病灶有所消失，且總值不超過(guò)50%，持續(xù)28 d。穩(wěn)定為病灶減少的幅度不超過(guò)50%，或增大的幅度不超過(guò)25%。進(jìn)展為有新的病灶出現(xiàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2.結(jié)果

2.1 兩組T 細(xì)胞亞群比例比較

治療前，觀察組、對(duì)照組的CD3、CD4、CD8比例比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05），具有可比性；治療后，觀察組的CD3、CD4、CD8比例顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），見表1。

表1 兩組T 細(xì)胞亞群比例比較（±s，分）

2.2 兩組血清白細(xì)胞介素水平及中位生存期比較

治療后，觀察組血清IL-6、IL-12 水平及中位生存期顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），見表2。

表2 兩組血清IL 水平及中位生存期比較（±s）

2.3 兩組治療總有效率比較

觀察組治療總有效率（76.74%）高于對(duì)照組（58.14%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），見表3。

表3 治療總有效率對(duì)比[n（%）]

3.結(jié)論

胃癌是出現(xiàn)在胃黏膜上皮組織的一種常見惡性腫瘤，多發(fā)于中老年群體，近年來(lái)隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的改變、工作壓力的增大以及HPV 感染等多種因素的影響，該病的發(fā)病呈年輕化的趨勢(shì)。早期胃癌癥狀不明顯，主要表現(xiàn)為噯氣、胃痛等，癥狀與胃潰瘍、胃炎等胃部疾病類似，導(dǎo)致不容易察覺。近年來(lái)，隨著手術(shù)、放療及化療等傳統(tǒng)療法在胃癌治療中的規(guī)范化、綜合化應(yīng)用，大大提高了胃癌的治療有效率，同時(shí)也在一定程度上延長(zhǎng)了患者的生存期。術(shù)后輔助化療等療法雖然能夠有效減少胃癌的復(fù)發(fā)，但仍難以完全清除體內(nèi)殘留的微小病灶，病灶局部復(fù)發(fā)率和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率依舊比較高，并且部分患者化療依從性較差，免疫力減退，易出現(xiàn)多種化療并發(fā)癥和較高的毒副反應(yīng)發(fā)生率，影響患者的生存質(zhì)量。因此，臨床應(yīng)探尋更為安全、高效的治療方案，以促進(jìn)胃癌患者治療效果及生活質(zhì)量的提高。

近年來(lái)，隨著分析細(xì)胞生物學(xué)以及免疫學(xué)研究的不斷深入，人們也愈發(fā)關(guān)注基因治療、細(xì)胞因子治療等新型治療手段在惡性腫瘤疾病中的應(yīng)用。其中，惡性腫瘤細(xì)胞可以表達(dá)許多不同的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)可能被免疫系統(tǒng)識(shí)別，成為抑制癌癥發(fā)生的靶點(diǎn)，然而腫瘤可以通過(guò)免疫抑制作用創(chuàng)造利于癌癥細(xì)胞生長(zhǎng)的腫瘤微環(huán)境，干擾機(jī)體的抗腫瘤反應(yīng)。免疫細(xì)胞療法在腫瘤治療中能夠調(diào)節(jié)宿主免疫功能，特定的過(guò)繼性免疫細(xì)胞能夠靶向識(shí)別腫瘤細(xì)胞，具有特異性的殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。

通過(guò)展開DC 細(xì)胞與CIK 細(xì)胞的共培養(yǎng)，可促進(jìn)CIK細(xì)胞的大量增殖及成熟，增強(qiáng)CIK 細(xì)胞毒活性，促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的成熟。（1）在細(xì)胞因子治療中，采用DC 細(xì)胞可起到誘導(dǎo)、殺傷細(xì)胞的功能，通過(guò)將這些免疫細(xì)胞輸入到胃癌患者的體內(nèi)，可發(fā)揮出治療惡性腫瘤的作用。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究得知，腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，與樹突狀細(xì)胞均存在緊密聯(lián)系。作為一種專職抗原遞呈細(xì)胞，成熟的DC 細(xì)胞在與T 細(xì)胞接觸以后，會(huì)激發(fā)免疫應(yīng)答反應(yīng)，而對(duì)于未成熟的DC 細(xì)胞，其抗原吞噬能力極強(qiáng)。（2）細(xì)胞因子有著非常強(qiáng)的誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞增殖能力，在體外便可被誘導(dǎo)及繁殖，免疫特性比較強(qiáng)。作為一群使用多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞，CIK 細(xì)胞兼有T 淋巴細(xì)胞和自然殺傷（natural killer, NK）細(xì)胞的特性。（3）CIK 細(xì)胞治療指從患者外周血中采集的單個(gè)核細(xì)胞在體外經(jīng)CD3 單抗、干擾素-γ 及IL-2 等多種細(xì)胞因子的修飾、刺激、培養(yǎng)以及增殖以后，再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而達(dá)到迅速殺傷腫瘤，緩解放化療毒性的作用。CIK 細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖活性及殺傷活性，其主要釋放的細(xì)胞因子包括干擾素和腫瘤壞死因子，對(duì)身體的不良反應(yīng)小，可以很好地增強(qiáng)人體的免疫功能，在化療后回輸CIK 細(xì)胞可以明顯提高患者的免疫功能。

相關(guān)研究表明，CD3能夠較好地反映CD4與CD8水平。CD4作為人體免疫系統(tǒng)中一種不可或缺的免疫細(xì)胞，可啟動(dòng)身體來(lái)對(duì)抗微生物，其數(shù)量變化還可將人體免疫功能的變化情況反映出來(lái)，一旦機(jī)體免疫系統(tǒng)受到損害，CD4的水平就會(huì)降低。CD8能夠?qū) 淋巴細(xì)胞起殺傷性作用，這表明其能起到很好的殺死腫瘤細(xì)胞及抗病毒感染等功效。作為一種多功能細(xì)胞因子，IL-6 主要是由腫瘤細(xì)胞自分泌產(chǎn)生的，受到腫瘤細(xì)胞壞死因子的影響，其水平高低能夠調(diào)節(jié)胃癌患者的免疫狀態(tài)。IL-12 對(duì)T細(xì)胞的增殖及分化可起到促進(jìn)作用，經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究得知，IL-12 對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移可起到明顯的抑制作用。本文給予觀察組胃癌患者免疫治療聯(lián)合化療，結(jié)果顯示，觀察組患者治療后的CD3、CD4、CD8等T 細(xì)胞亞群比例，血清IL-6、IL-12 水平，中位生存期，均高于單純接受化療的對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05）。這一結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了免疫治療聯(lián)合化療對(duì)胃癌患者的治療效果及價(jià)值優(yōu)于單純化療。

綜上所述，通過(guò)對(duì)胃癌患者聯(lián)合應(yīng)用免疫治療與化療，可獲得較為理想的療效，提高其T 細(xì)胞亞群比例及血清白細(xì)胞介素水平，進(jìn)一步延長(zhǎng)患者的中位生存期，在臨床中有著較高的應(yīng)用價(jià)值。