血清心肌型肌酸激酶同工酶活性大于肌酸激酶的病例分析*

田 倩，李 環，張 越，張艷敏,4△

1.西安醫學院，陜西西安 710021；2.西安市兒童醫院心內科，陜西西安 710003；3.西安市兒童醫院中心實驗室，陜西西安 710003；4.陜西省兒科疾病研究所/陜西省兒童疾病精準醫學重點實驗室，陜西西安 710003

肌酸激酶(CK)在細胞質和線粒體的能量代謝中起著非常重要的作用，參與細胞內能量轉運、三磷酸腺苷再生及肌肉收縮。CK有3種同工酶：骨骼肌型肌酸激酶同工酶(CK-MM)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、腦型肌酸激酶同工酶(CK-BB)。CK-MM主要分布于骨骼肌，CK-MB主要分布于心肌，CK-BB主要分布于腦組織，在胃腸道、子宮平滑肌、前列腺、肺等組織內也可檢測到，健康人血清CK-BB水平甚微，甚至測不到。當心肌細胞處于炎癥和缺氧狀態時，細胞膜通透性即刻增加，CK-MB由細胞內進入血液，因此CK-MB是反映早期心肌損傷的重要指標之一[1]。但在常規臨床檢測中會出現血清CK-MB活性大于CK的情況，即CK與CK-MB結果倒置。本文對2019年1月至2020年7月在西安市兒童醫院收治的血清CK-MB活性大于CK的103例患兒進行回顧性分析，旨在總結其臨床特點和疾病譜分布，為血清CK、CK-MB結果倒置患兒的臨床診斷提供科學依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 從中聯醫院信息大數據系統中選取2019年1月至2020年7月在西安市兒童醫院收治的血清CK-MB活性大于CK的103例患兒進行回顧性分析。納入本研究的103例患兒中排除標本溶血及數據缺失病例，并且同一患兒多次檢測納入首次檢測結果。本研究經過西安市兒童醫院倫理委員會同意批準。

1.2儀器與試劑 采用北京貝克曼AU 5800生化分析儀完成CK、CK-MB活性檢測，項目試劑、質控品及校準品均由北京利德曼生化股份有限公司提供。采用德國羅氏Cobase E601電化學發光全自動免疫分析儀完成CK-MB質量(CK-MB mass)檢測。

1.3方法

1.3.1標本采集和處理 使用一次性真空促凝采血管采集所有受試患兒空腹靜脈血標本3 mL，4 h內在3 000 r/min的條件下離心10 min分離血清并完成CK、CK-MB活性及CK-MB mass檢測。

1.3.2檢測方法 CK采用磷酸肌酸底物法進行測試，參考范圍：CK男性<190 U/L，CK女性<167 U/L。CK-MB活性檢測采用免疫抑制法，參考范圍：0～24 U/L。CK-MB mass采用免疫化學發光法進行測試，參考范圍：CK-MB mass<6.22 ng/mL。所有操作嚴格按照儀器試劑說明書進行。

1.4統計學處理 采用SPSS26.0統計軟件進行數據分析，計數資料以n(%)表示，兩組間比較采用χ2檢驗，非正態分布的計量資料以M(P25,P75)表示，多個組間比較采用Kruskal-WallisH秩和檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1103例患兒一般資料比較 103例患兒中男性49例(47.57%)，女性54例(52.43%)，年齡為4 d至12歲11個月，根據年齡區間將103例患兒分為新生兒組(0～<28 d)23例、嬰兒組(28 d～<1歲)38例、幼兒組(1～<3歲)24例、學齡前期組(3～<6歲)10例及學齡期組(≥6歲)8例，各組間性別分布比較，差異無統計學意義(χ2=9.221，P=0.056)。見表1。

表1 103例患兒一般資料比較[n(%)]

2.2各年齡組血清CK、CK-MB活性及CK-MB mass檢測結果比較 各年齡組CK、CK-MB活性、CK-MB mass比較,差異有統計學意義(H=39.263、36.867、50.576，P<0.05)。組間兩兩比較，新生兒組CK、CK-MB活性及CK-MB mass明顯高于其他年齡組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 各年齡組血清CK、CK-MB活性及CK-MB mass測定結果比較[M(P25,P75)]

2.3103例患兒疾病譜的分布特征 103例患兒中呼吸系統疾病38例(36.89%)，心血管系統疾病12例(11.65%)，傳染性疾病12例(11.65%)，消化系統疾病11例(10.68%)，血液腫瘤系統疾病10例(9.71%)，神經系統疾病8例(7.77%)，免疫系統疾病4例(3.88%)，皮膚感染2例(1.94%)，泌尿系統疾病2例(1.94%)，原因不明4例(3.88%)。103例患兒疾病譜分布廣泛且無特異性，病例數≥3例的疾病譜如下：先天性心臟病合并下呼吸道感染18例、單純下呼吸道感染10例、新生兒黃疸8例、先天性心臟病7例、急性腹瀉病6例、呼吸道感染合并腹瀉病5例、白血病4例、先天性心臟病合并呼吸道感染及腹瀉病4例、心肌炎4例、川崎病3例、嗜血細胞綜合征3例、頭顱血腫3例。

103例患兒中，CK-MB mass正常的患兒80例，提示可能為CK-MB活性假性升高。CK-MB mass升高的患兒23例(22.33%)，其中新生兒及嬰幼兒22例，疾病譜分布為先天性心臟病5例、先天性心臟病合并下呼吸道感染4例、新生兒黃疸3例、壞死性小腸結腸炎 2例、新生兒肺炎 2例、腎病綜合征1例、肝功能異常 1例、新生兒腹瀉病1例、心肌炎1例、頭顱血腫1例，原因不明2例。

3 討 論

CK、CK-MB是診斷心肌損傷、急性心肌梗死的重要生物標志物。CK-MB主要有3種檢測方法，分別為免疫抑制法、質量法及瓊脂糖凝膠電泳法。臨床廣泛應用的是免疫抑制法。其原理是在試劑中加入特異性的抗 CK-M 亞單位的抗體，抑制CK-MM和CK-MB中 M 亞單位活性，因健康人血清CK-BB水平極微，故測得結果乘以2即相當于 CK-MB活性，而實際上測定的結果是CK-MB+2CK-BB活性。當血液中CK-BB水平異常增高或存在由CK-BB與免疫球蛋白IgG或IgA形成的大分子復合物巨CK1，或出現由線粒體衍生的CK聚合物巨CK2等均可引起CK-MB檢測活性增高，甚至超過總CK活性，出現CK、CK-MB結果倒置現象[2-3]。

CK-MB mass測定采用基于化學免疫發光技術的雙抗體夾心法，以納米磁微粒為固相載體包被單克隆抗體，以堿性磷酸酶(ALP)抗體為標記物，實現對CK-MB的定量分析。質量法有較高的專一性、特異度及靈敏度，能排除CK-MM、CK-BB和免疫球蛋白等因素的干擾[4]。

瓊脂糖凝膠電泳法是檢測巨CK的首選技術。根據相對分子質量的大小及電荷對CK、巨CK進行分離，從陰極到陽極依次為巨CK2、CK-MM、巨CK1、CK-MB和CK-BB。檢測方法較免疫抑制法操作復雜，所需時間更長，且電泳試劑難以購得，臨床應用有限。

本研究103例患兒中主要為新生兒及嬰幼兒。新生兒組CK-MB活性明顯高于其他年齡組。分析可能有的原因如下。(1)生理因素影響。胎兒在母體內以富含CK-BB的胎盤供給營養，所以新生兒體內CK-BB水平高，造成免疫抑制法測得的CK-MB活性升高。(2)血腦屏障因素。CK-BB主要存在于腦內神經元和星形膠質細胞中。當發生顱腦損傷、中樞神經系統感染[5]、缺氧缺血性腦病時，腦細胞膜及血腦屏障的通透性增加，外周血CK-BB升高，且CK-BB升高的程度與病情輕重呈正相關性[6]。同時嬰幼兒血腦屏障未發育完全，研究發現輪狀病毒可通過胃腸道到達血液循環，導致抗原血癥，最常累及中樞神經系統(如熱性驚厥、癲癇發作、急性腦膜炎等)，造成血清CK-MB活性升高[7]。

血清中巨CK1和巨CK2也可造成血清CK、CK-MB活性倒置。巨CK1是由CK-BB和免疫球蛋白IgG或IgA形成的免疫復合物，相對分子質量大且不被M亞基抗體抑制，造成血清CK-MB活性大于CK。研究發現，巨CK1與甲狀腺功能減退、自身免疫性疾病、肌炎和心血管疾病等有關，也可出現在健康人[8-10]。有報道指出，潰瘍性結腸炎患兒血清中可出現巨CK1[11]。巨CK2由線粒體衍生的CK聚合物組成，成人的相關報道多見，在肺癌、乳腺癌、肝癌等患者的血清中呈高表達，在預后不良的癌癥患者中表達水平更高[12-13]。

血清CK-MB活性大于CK的病例研究主要以成人為主，疾病譜分布廣泛，如惡性腫瘤、自身免疫系統疾病、白血病、急性腦血管病等[14-16]。兒童疾病譜以炎性疾病為主，包括小兒肺炎、小兒輪狀病毒性腸炎等[17]。本研究報道顯示，103例患兒疾病譜前3位依次為先天性心臟病合并下呼吸道感染、單純下呼吸道感染及新生兒黃疸。

綜上所述，患兒血清CK-MB活性大于CK可見于多種疾病，采用免疫抑制法測定CK-MB活性易受年齡、血清CK-BB及巨CK等因素的影響，存在CK-MB活性假性增高現象。因此，這類患兒需進行CK-MB mass檢測來明確CK-MB的真實水平，必要時需結合瓊脂糖凝膠電泳法排除血清CK-BB、巨CK的干擾，以防誤診。