IFCC互通性評價更新方案在胱抑素C標準物質互通性評價中的應用*

邵 燕，李 敏，孫江漫，馬 婷，尹顯艷，于洪遠，徐 麗

北京航天總醫院：1.檢驗科；2.科教處，北京 100076

互通性是標準物質的一個重要屬性。有報道指出，標準物質的互通性是“對于給定標準物質的規定量，由兩個給定測量程序所得測量結果之間關系與另一指定物質所得測量結果之間關系一致程度表示的標準物質特性”[1]。標準物質與臨床樣本在測量程序間具有互通性是保證臨床患者結果可溯源的關鍵環節，也是標準物質用于量值傳遞的前提條件。目前標準物質互通性評價方法有兩類，分別是2010年和2014年，美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)發布的文獻[2-3]和2015年、2018年國際臨床化學與檢驗醫學聯合會(IFCC)工作組介紹的互通性評價方案[4]和更新方案[5-7]。目前，國內外尚沒有文件明確規定在進行互通性評價時應選用哪種方案。由于目前沒有胱抑素C參考測量方法，本研究將兩種常規檢測方法組成比較對為例，介紹2018年IFCC工作組介紹的互通性評價新方案。

1 材料與方法

1.1儀器 日本日立7170A全自動生化分析儀，德國賽多利斯 LA120S型電子天平，德國艾本德Eppendorf reference移液器。

1.2兩種血清胱抑素C常規檢測方法基本信息 見表1。

表1 兩種血清胱抑素C常規檢測方法基本信息

1.3實驗樣本

1.3.1臨床樣本 收集42份0.5～8.0 mg/L的無溶血、乳糜、黃疸的單人份人血清樣本，每份樣本分為兩份，置于-80 ℃冰箱保存，文中記為CS1～CS42。

1.3.2標準物質 4個濃度冰凍人血清胱抑素C標準物質，編號為GBW(E)091173～091176,認定值±不確定度分別為(0.89±0.1)、(1.82±0.13)、(3.55±0.28)、(5.25±0.29)mg/L,k=2,文中記為RM1～RM4。

1.4測量方法 在日立7170A全自動生化分析儀上建立2個血清胱抑素C常規檢測系統，所有參數均由廠家提供。使用廠家提供的校準品校準，配套質控品測量結果在控后進行臨床樣本和標準物質的測量。依據方案要求，為了評價標準物質的測量位置對測量結果的影響(位置效應)，將標準物質按RM1～RM4的順序穿插在42例單人份血清標本中測量，每測量2份血清標本后測量1份標準物質，每份實驗樣本重復測量3次，本研究中設置的每個濃度標準物質的位置數量p=4。

1.5統計學處理

1.5.1繪制臨床樣本的測量標準偏差圖與兩種方法之間的偏倚圖 使用Excel 2019軟件分別計算每種方法測量每份臨床樣本的濃度均值、標準偏差及Ln(濃度)的標準偏差，以濃度均值為X軸、濃度的標準偏差或Ln(濃度)的標準偏差為Y軸繪制臨床樣本的測量標準偏差圖；計算兩種方法測量每份臨床樣本的濃度均值、濃度差值及Ln(濃度)差值，以兩種方法濃度均值為X軸、濃度差值或Ln(濃度)差值為Y軸繪制兩種方法之間的偏倚圖；判斷有無離群值，若有，去除離群值，重新作圖。觀察偏倚圖中偏倚的分散寬度或偏倚隨樣本濃度的變化趨勢，初步判斷用濃度值還是Ln(濃度)值用于后續數據處理。偏倚值相對固定、分散寬度較窄、無趨勢性變化或趨勢性變化較小的情況最理想。

1.5.4標準物質和臨床樣本在兩種方法之的間偏倚差值(dRM)計算 標準物質在兩種方法之間的偏倚為BRM，臨床樣本在兩種方法間的平均偏倚為BCS、移動均值記為BMA，則dRM=BRM-BCS或dRM=BRM-BMA。

1.5.6標準物質的互通性評價 互通性評價標準設為C，可參考臨床允許總誤差制定。若dRM±U(dRM)在0±C范圍內則表示有互通性，超出這個范圍則沒有互通性，若范圍有重合則表示無法判斷。為了更直觀地觀察互通性評價結果，以兩種方法測量標準物質或臨床樣本的濃度均值為X軸，標準物質和臨床樣本在兩種方法間偏倚差值dRM為Y軸做圖，并在圖中標出0±C范圍及每種標準物質dRM±U(dRM)。

2 結 果

2.1臨床樣本的測量標準偏差圖與兩種方法之間的偏倚圖 兩種方法測量臨床樣本的濃度和Ln(濃度)的標準偏差圖所示沒有明顯的離群值，見圖1、2；兩種方法測量臨床樣本的濃度偏倚和Ln(濃度)偏倚沒有明顯的離群值，分散寬度較大，肉眼觀察均有趨勢性，但Ln(濃度)偏倚相對濃度偏倚分散寬度小，所以初步判斷采用Ln(濃度)用于后續數據處理，見圖3。

圖1 A方法臨床樣本結果標準偏差圖

圖2 B方法臨床樣本結果標準偏差圖

圖3 兩種方法臨床樣本測量結果偏倚圖

2.2標準物質和臨床樣本在兩種方法之間的偏倚差值(dRM) 根據42份臨床樣本在兩種方法之間的Ln(濃度)偏倚Bi計算平均偏倚BCS為0.029 mg/L，Bi的標準偏差SB為0.037 mg/L，均方遞差的標準差SMSSD為0.015 mg/L，Q為0.155。設定顯著性水平α=0.05，查詢Q分布表，Q0.05=0.75,Q

表2 標準物質和臨床樣本在兩種方法之間的偏倚差值

2.3標準物質和臨床樣本在兩種方法之間偏倚的不確定度U(dRM)評估結果 標準物質RM1～RM4和臨床樣本在兩種方法之間偏倚的不確定度分別為0.029、0.028、0.028及0.028 mg/L，k=1.9,見表3。

表3 標準物質和臨床樣本在兩種方法之間偏倚的不確定度結果(mg/L)

2.4標準物質互通性評價結果 4個濃度胱抑素C標準物質RM1～RM4的dRM±U(dRM)分別為(0.012±0.029)、(0.004±0.028)、(0.015±0.028)、(-0.005±0.028)mg/L，k=1.9,均在互通性評價標準(0.000±0.118)mg/L范圍內。見圖4。

圖4 胱抑素C標準物質互通性評價圖

3 討 論

互通性是標準物質、正確度驗證品或校準品的重要屬性，通過互通性評價不僅可以評價互通性，而且可以同時進行方法學比較、探究不同方法間的結果偏倚；測量項目有參考測量方法時可以同時進行常規測量結果的量值溯源，因此進行互通性評價是必要的。

根據既往研究報道，互通性評價方法大致分為兩類[8-14]。一類是EP30-A和EP14-A3的方法,二者均是基于方法學比較的方法，常以Y預測值的±95%置信區間來判斷互通性，評價過程方便快捷，但其受評價方法間一致性的影響較大，兩種方法的一致性越好，標準物質越不可能具有互通性，因此導致標準物質的互通性評價結論不可靠；另一類是IFCC工作組2015年和2018年介紹的方法，均是基于被評價標準物質在兩種方法之間的偏倚與臨床樣本平均偏倚的一致關系判斷的。2018年的更新方案更細致、具體，利用標準物質在兩種方法之間的偏倚與臨床樣本偏倚的差值是否符合醫學預期需求判斷互通性。

通過研究發現，IFCC更新方案評價過程較繁瑣，但切實、可行，更符合醫學預期用途。不同待評價物質對應的偏倚模型、數據轉換及不確定度計算公式可能稍有不同，但評價過程和數據處理方法相似，可供讀者參考。在使用標準物質作為校準品時，應使用不同的方法對標準物質的互通性進行評價，以保證互通性評價結果的可靠性。當不同方法的互通性評價結果有差異時，應分析差異原因，選擇合適的互通性評價方案。