姬松茸飲品的制備工藝研究

◎ 黃 蕭，陳巧芬

（福州大學至誠學院，福建 福州 350002）

姬松茸（Agaricus blazeiMurill.），屬擔子菌門，層菌綱，傘菌目，蘑菇科，蘑菇屬，其味道鮮美，含有豐富的蛋白質、不飽和脂肪酸、維生素和礦物質等[1]。另外，還含有多種活性物質，如多糖[2]、多肽[3]、酚類物質[4]、甾醇[5]等，具有抗癌、增強免疫、降糖、降壓和抗氧化等多種生理功效。目前姬松茸產品主要以鮮品、干品為主，缺少深加工產品。傳統食用菌水解的方法是高溫水煮或強酸、強堿水解，其水解效果差，產品得率低，風味差，成本高、時間長；而且強酸強堿能腐蝕生產設備，造成環境污染，存在食品安全隱患，因此在應用的廣泛性上受到很大限制。而與傳統方法相比較，酶解法特異性強，毒副作用小，副產物少。食用菌經酶水解后，產生的酶水解液與特定物質發生反應還可產生特殊風味，能更好地維持甚至提升食用菌的營養價值。以姬松茸為主要原料，利用風味蛋白酶、纖維素酶、果膠酶的作用，將菌體中的多肽、氨基酸、核苷酸、多糖和酚類等活性物質溶出制成酶解液，保留原料所具備的營養功能價值，具有良好的滋補功能，具有調味增效之功效，可以開發為食用菌飲品[6-7]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

姬松茸，福建古田； 食品級風味蛋白酶 （100 000 U·g-1）、食品級果膠酶（100 000 U·g-1）、食品級纖維素酶（10 000 U·g-1），鑫泰食化；蔗糖，廈門太古有限公司；無水檸檬酸，河南萬邦化工科技有限公司；食鹽，中國鹽業集團有限公司。

1.2 儀器與設備

STX1202ZH 電子天平，奧豪斯儀器（常州）有限公司；DK-S26 恒溫水浴鍋，上海森信實驗儀器有限公司；DHG-9055A 電熱鼓風干燥箱，上海一恒科技有限公司；YXQ-LB-50SII 高壓蒸汽滅菌鍋，上海博訊實業有限公司；FJ200-S 均質機，上海滬析實業有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 姬松茸酶解工藝

姬松茸子實體→50 ℃烘干→粉碎過60 目篩→加20 倍蒸餾水→調pH 至6.0 →加酶→50 ℃保溫酶解 4 h →90 ℃滅酶10 min →過濾→酶解液。

1.3.2 姬松茸飲品基礎配方設計

按照酶解液添加量為20%、蔗糖添加量為6%、檸檬酸添加量為0.15%、黃原膠添加量為0.010%的比例添加各配料，進行調配后，均質殺菌，裝罐封蓋，冷卻至室溫得成品。10 名學生組成感官評定小組對不同配方的產品進行感官評價，每個樣品重復3 次，取平均值作為最終結果。根據產品的香味、口感、色澤、酸甜度制定感官評價標準，進行感官評定得出最佳飲品配方。姬松茸飲品感官評分標準見表1。

表1 姬松茸飲品感官評分標準表

1.3.3 配方優化設計試驗方案

設計單因素試驗，考察不同添加量的酶解液、蔗糖、檸檬酸、黃原膠對姬松茸飲品感官評分的影響。根據單因素試驗結果，設計4 因素3 水平正交試驗，以感官評分為指標，確定姬松茸飲品的最優 配方。

1.3.4 姬松茸飲品蛋白質含量的測定

采用福林酚法，測定姬松茸飲品中的蛋白質含量。取1 mL 飲品稀釋液溶液，分別加入試劑福林酚試劑甲5 mL，混勻后放置10 min，再各加福林酚試劑乙 0.5 mL，迅速混勻，室溫放置30 min，于650 nm 波長下測定光密度。用牛血清白蛋白繪制標準曲線，根據回歸方程計算蛋白質含量。取1 mL 稀釋酶溶液，分別加入試劑甲5 mL，混勻后放置10 min，再各加試劑乙0.5 mL，迅速混勻，室溫放置30 min，于650 nm 波長下測定光密度，并記錄結果。

1.3.5 姬松茸飲品多糖含量的測定

參考文獻[7]，采用苯酚-硫酸法測定。多糖能被酸溶液水解為還原糖的性質，脫去水分子生成能與苯酚反應使溶液變為橙黃色的物質。取2.0 mL 飲品稀釋液，先后加入1.0 mL 的5%苯酚和5.0 mL 的濃硫酸，充分搖晃均勻，靜置26 min。同樣的操作方法，用2.0 mL蒸餾水代替飲品稀釋液作為空白對照，用紫外分光光度計測定490 nm 波長處的吸光值。以葡萄糖為標準品，建立葡萄糖濃度和吸光值的線性關系，并繪制出葡萄糖標準曲線，進而對飲品稀釋液樣品定量。

1.3.6 姬松茸飲品氨基酸態氮含量的測定

參考GB 5009.235—2016 中測定氨基酸態氮含量的甲醛滴定法測定[8]。準確吸取5 mL 姬松茸飲品，置于100 mL 容量瓶中，加入蒸餾水至刻度線，混勻。吸取20 mL 飲品稀釋液加入60 mL 水，用0.05 mol·L-1NaOH 標準溶液滴定直至酸度計顯示pH 為8.2，記錄用去的NaOH 標準溶液體積（V3）。向上述溶液里加入中性甲醛溶液10 mL，混合后用NaOH 繼續滴定至pH 為9.2，記錄消耗的NaOH 標準溶液的體積（V1）。同樣的方法取80 mL 水代替飲品稀釋液做空白試驗，記錄消耗NaOH 標準溶液的體積（V2）。NaOH 標準溶液標定濃度為C，mol·L-1。飲品中氨基酸態氮含量X（g/100 mL）的計算公式為

2 結果與分析

2.1 單因素試驗結果分析

2.1.1 姬松茸酶解液添加量對飲品感官評分的影響

在基礎配方上改變姬松茸酶解液添加量，設置8%、16%、24%、32%、40% 5 個水平，將各原料混合，均質殺菌，以感官評分為指標進行單因素試驗，結果如圖1 所示。隨著酶解液添加量的增加，感官評分先升高再降低。姬松茸酶解液具有杏仁香味，如果添加量過少，姬松茸味道較淡，不能突出飲料的主要風味。添加量過高，使得飲品中的姬松茸味道過于濃郁，產生不悅的感官。當添加量為24%時，感官評分達到最大值，飲品中的姬松茸香味適中，味道鮮美。因此，選擇姬松茸酶解液添加量16%、24%、32%做下一步優化試驗。

圖1 姬松茸酶解液對感官評分的影響圖

2.1.2 蔗糖添加量對飲品感官評分的影響

基礎配方上改變蔗糖添加量，設置蔗糖濃度2%、4%、6%、8%、10% 5 個水平，將各原料混合，均質殺菌，以感官評分為指標進行單因素試驗，結果如圖2 所示。從圖2 可以看出，隨著蔗糖添加量的增加，姬松茸飲品的品質逐步改善。但蔗糖添加量大于10%時，飲品口感較甜膩。甜味是飲品中最常見的味感，可以平衡姬松茸酶解液中的少量苦味。根據試驗結果，選擇蔗糖添加量為6%、8%、10%做下一步優化試驗。

圖2 蔗糖添加量對感官評分的影響圖

2.1.3 檸檬酸添加量對飲品感官評分的影響

在基礎配方上改變檸檬酸添加量，選擇0.08%、0.10%、0.12%、0.14%、0.16% 5 個濃度梯度，添加檸檬酸進行單因素試驗。檸檬酸是一種酸味調節劑，可以中和甜味劑帶來的甜膩感，具有抗氧化、防止動脈硬化、降壓等功效。從圖3 看出，檸檬酸濃度為0.12%時，感官評分最高，選擇0.10%、0.12%、0.14%做下一步優化試驗。

圖3 檸檬酸添加量對感官評分的影響圖

2.1.4 黃原膠添加量對飲品感官評分的影響

在基礎配方中改變黃原膠添加量，選擇0.005%、0.010%、0.015%、0.020%、0.025% 5 個不同濃度添加黃原膠，進行單因素試驗，如圖4 所示。黃原膠具有高水溶性和高黏性，可以增加飲品稠度和黏度，當濃度達到0.010%時，飲品口感細膩順滑，感官評分最高。當黃原膠添加量大于0.010%時，飲品開始變得黏稠，影響口感，因此選擇0.005%、0.010%、0.015%做下一步優化試驗。

圖4 黃原膠添加量對感官評分的影響圖

2.2 正交試驗結果分析

根據單因素感官評定結果，酶解液添加量、蔗糖添加量、檸檬酸添加量、黃原膠添加量各因素分別選取3 個水平，進行L9(34)正交試驗設計，試驗結果及分析見表2。

通過表2 極差分析可知，在姬松茸飲品的研制中，影響感官評分的主次因素順序為A＞B＞C＞D，即姬松茸酶解液的添加量對飲品的感官評分影響最大，蔗糖添加量次之，檸檬酸添加量再次之，黃原膠添加量影響最小。最佳試驗組合為A1B2C2D2，剛好出現在正交試驗組合當中，其感官評分為93.2。即最佳配方為姬松茸酶解液的添加量16%，蔗糖添加量8%，檸檬酸添加量0.12%，黃原膠添加量0.010%。該配方制得的姬松茸飲品，具有姬松茸風味，酸甜適宜，入口順滑，濃稠適中，無雜質。

表2 姬松茸飲品配方正交試驗結果及極差分析表

2.3 姬松茸飲品基本營養成分測定結果

由表3 可知，姬松茸經酶解后制得的飲品，蛋白質含量、氨基酸態氮含量及多糖含量較高，保留了食用菌中的主要營養物質成分，具有營養價值。

表3 姬松茸飲品中基本營養成分含量表

3 結論

姬松茸細胞壁含有纖維素、果膠等成分，導致細胞中的蛋白質、多糖、氨基酸等不易溶解釋放，利用纖維素酶、果膠酶、風味蛋白質酶處理，破壞姬松茸的細胞壁結構，將蛋白質水解成多肽、氨基酸，降低酶解液的苦味[9]。以姬松茸酶解液為主要原料，添加蔗糖、檸檬酸和黃原膠，設計單因素試驗和正交試驗，優化姬松茸飲品的配方。最佳配方制得的姬松茸飲品，既保留了姬松茸特有的食用菌風味，又增加了酸甜適宜的口感，保留了姬松茸的營養價值，該產品具有一定的經濟價值和應用價值。