2017—2021 年湖南省規模養禽場高致病性禽流感免疫抗體監測

鄧國強，范仲鑫，唐小明，劉道新

（湖南省動物疫病預防控制中心，湖南長沙 410027）

流感是由A 型流感病毒引起的，可導致多種禽類、鳥類、人類感染的一種重要傳染病[1]。高致病性禽流感主要由H5和H7亞型禽流感病毒引起，其發病率和死亡率都很高（50%～89%），在有些雞群中可達100%。世界動物衛生組織將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。用禽流感疫苗對家禽進行免疫預防是防控該病的有效措施。為了解湖南省規模養禽場高致病性禽流感免疫抗體情況，評估免疫效果，2017—2021 年，分別于每年春季（5 月）和秋季（11 月）在湖南省14 個市州隨機抽取規模養禽場采集血清樣品，進行高致病性禽流感免疫抗體檢測，并對檢測數據進行統計和分析，以期為高致病性禽流感防控提供數據支撐。

1 材料和方法

1.1 樣品來源

2017—2021 年，每年5 月和11 月分別從湖南省14 市州各隨機抽取1～2 個縣，共抽取26 個縣（不重復抽樣）進行采樣。每縣隨機抽查3 個規模禽場（2 個養雞場、1 個水禽場，無規模水禽場的用規模雞場代替），每個規模雞場隨機采集血清15 份，每個規模水禽場隨機采集血清20 份，每個縣共采集血清樣本50 份（雞血清30 份、水禽血清20 份）。2017—2021 年，共抽查養禽場785 個、血清樣品12 957 份，樣品采集詳情見表1。

表1 樣品情況統計

1.2 試驗方法

采用《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936—2020）規定的血凝（HA）和血凝抑制試驗（HI）方法，檢測H5 和H7 亞型禽流感抗體[2]。HI 抗體效價不低于1:16（4log2），判定為免疫抗體個體合格；場免疫個體總合格率不低于70%，判定為免疫抗體場合格。

采用卡方（χ2）檢驗分析H5 和H7 亞型高致病性禽流感免疫抗體個體合格率和場合格率在不同禽種、不同季節和不同地區間的差異。

采用公式（1）（2）比較H5 和H7 亞型高致病性禽流感免疫抗體個體合格率和場合格率的依存關系，建立個體免疫合格率為X，場免疫合格率為Y的線性回歸方程，并用F檢驗方法驗證兩者的線性回歸關系[3]。

式中：a代表截距或常數項，b代表回歸系數，n代表調查對象數。

2 結果與分析

2.1 H5 亞型禽流感免疫抗體

2.1.1 個體合格率

2.1.1.1 不同禽種 2017—2021 年，湖南省家禽H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率為93.75%。其中，2018 年春季合格率最高，為99.22%，2019年秋季最低，為87.52%；雞、鴨、鵝樣本的H5亞型禽流感免疫抗體個體合格率分別為95.90%、85.95%、76.70%（表2）。隨著時間變化，雞的個體合格率波動不大，鵝波動最大（圖1）。經查卡方分布臨界值表，按α=0.016 6 檢驗水準，比較不同禽種間H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率差異，得到自由度V=1 的臨界值為5.02～6.63，經差值法得到χ20.0166約等于5.97。任意2 種禽種間的P值比較，結果（表3）顯示，H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率在雞中最高，其次是鴨，鵝最低，不同禽種間H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率差異具有統計學意義（P＜0.01）。

表3 不同禽種間H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率比較

表2 H5 亞型免疫抗體個體合格率情況

2.1.1.2 不同采樣季節 春季H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率為93.27%，秋季為94.22%。比較春、秋兩季免疫抗體個體合格率，經卡方檢驗，χ2=5.034，以V=1 查卡方分布臨界值表，按α=0.05 的水準，P＜0.05。結果顯示：秋季H5亞型禽流感免疫抗體個體合格率明顯高于春季，春、秋兩季H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率存在顯著差異。

2.1.1.3 不同采樣地區 14 個市州H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率由低到高分別是懷化（89.40%）、湘西州（89.85%）、湘潭（90.51%）、益陽（90.57%）、株洲（91.04%）、永州（92.09%）、衡陽（92.29%）、郴州（93.03%）、婁底（94.47%）、邵陽（96.87%）、岳陽（97.02%）、長沙（97.90%）、張家界（98.00%）、常德（98.89%）（圖2）。經卡方檢驗，P＜0.05，說明H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率在不同地區間存在顯著差異。

2.1.2 場合格率

2.1.2.1 不同禽種 2017—2021 年，湖南省H5亞型禽流感免疫抗體場合格率為93.25%。其中，2018 年春季合格率最高，為100%，2019 年秋季最低，為80.77%；雞、鴨、鵝樣本的H5 亞型禽流感免疫抗體場合格率分別為95.41%、82.61%、81.25%（表4）。隨著時間推移，場合格率的變化規律與個體合格率的變化規律基本一致（圖3）。H5 亞型禽流感免疫抗體場合格率在雞中最高，其次是鴨，鵝最低。經卡方檢驗，不同禽種間H5 亞型禽流感免疫抗體場合格率差異具有統計學意義（P＜0.01）。

表4 H5 亞型免疫抗體場合格率情況

2.1.2.2 不同采樣季節 春季H5 亞型禽流感免疫抗體場合格率為93.32%，秋季為93.18%。比較春、秋兩季H5 亞型禽流感免疫抗體場合格率，經卡方檢驗，按α=0.05 的水準，P＞0.05，說明春、秋兩季H5亞型禽流感免疫抗體場合格率差異不顯著。

2.1.3 個體合格率與場合格率依存關系 利用1.2中的公式（1）（2）建立以H5 亞型禽流感個體免疫合格率為X，場合格率為Y的回歸方程：Y=1.224 1X-0.216 5。經卡方檢驗，P＞0.01，說明H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率與場合格率之間不存在線性回歸關系。

2.2 H7 亞型禽流感免疫抗體

2.2.1 個體合格率

2.2.1.1 不同禽種 2017—2021 年，湖南省家禽H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率為80.62%。其中，2021 年秋季合格率最高，為98.15%，2017年春季最低，為5.93%；雞、鴨、鵝樣本的H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率分別為82.45%、78.26%、45.45%（表5）。隨著時間推移，雞、鴨、鵝樣的個體合格率整體呈升高趨勢（圖4）。H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率在雞中最高，其次是鴨，鵝最低。經卡方檢驗，不同禽種間H7亞型禽流感免疫抗體個體合格率差異具有統計學意義（P＜0.01）。

表5 H7 亞型免疫抗體個體合格率情況

2.2.1.2 不同采樣季節 春季H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率為70.91%，秋季為90.34%。比較春、秋兩季免疫抗體個體合格率，經卡方檢驗，P＜0.05，說明免疫抗體合格率秋季明顯高于春季。

2.2.1.3 不同采樣地區 14 個市州H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率由低到高分別是湘潭（71.72%）、益陽（73.02%）、湘西州（75.01%）、懷化（75.42%）、株洲（75.48%）、永州（75.84%）、岳陽（79.82%）、衡陽（84.59%）、郴州（85.17%）、張家界（85.50%）、婁底（85.83%）、長沙（86.50%）、邵陽（86.67%）、常德（87.83%）（圖5）。經卡方檢驗，P＜0.05，說明H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率在不同地區間存在顯著差異，其差異情況與H5 亞型相似。

2.2.2 場合格率

2.2.2.1 不同禽種 2017—2021 年，湖南省H7亞型禽流感免疫抗體場合格率為79.49%。其中，2021 年秋季合格率最高，為97.50%，2017 年春季最低，為1.28%；雞、鴨、鵝樣本的H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率分別為81.19%、75.65%、37.50%（表6）。隨時間變化，H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率有整體升高趨勢（圖6）。H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率在雞中最高，其次是鴨，鵝最低。經卡方檢驗，不同禽種間H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率差異具有統計學意義（P＜0.01）。

2.2.2.2 不同采樣季節 春季H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率為68.38%，秋季為90.40%。比較春、秋兩季H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率，經卡方檢驗，P＜0.05，說明春、秋兩季H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率差異顯著。

2.2.3 個體合格率與場合格率依存關系 利用1.2中的公式（1）（2）建立以H7 亞型禽流感個體免疫合格率為X，場合格率為Y的回歸方程：Y=1.038 7X-0.041 9。用F檢驗驗證回歸系數，P＜0.01，說明H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率與場合格率之間存在線性回歸關系。R2=0.99，說明99%H7 亞型禽流感場合格率可以由個體合格率解釋。

3 討論

禽流感免疫抗體個體合格率在雞中最高，其次是鴨，鵝最低，與石芳等[4]研究結果一致。不同禽群間高致病性禽流感免疫抗體個體合格率差異大，可能是因為與接受相同疫苗免疫的雞相比，水禽的抗體滴度更低，維持時間短，抗體水平下降速度更快[5]。秋季禽流感免疫抗體個體合格率高于春季，可能與湖南省2017 年春季有些養禽場設有免疫H7 亞型禽流感疫苗，拉低了春季的平均合格率有關；且有些抽樣場在春季免疫1 次，秋季未出欄時實行再次免疫，加強免疫也提高了禽流感免疫抗體合格率。

湖南省規模養禽場H5 亞型禽流感免疫抗體個體合格率和場合格率相對較高，常年比較穩定，H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率和場合格率呈整體上升趨勢，與湖南省對高致病性禽流感采取強制免疫有關，且H5 亞型禽流感疫苗比H7 亞型使用時間更早，所以抗體水平表現更加穩定。不管是H5 亞型禽流感免疫抗體還是H7 亞型免疫抗體，在不同地區、不同場群間存在較大差異的原因：一是有些地區的養禽場主對高致病性禽流感的防疫意識不強，認為所養家禽存欄時間短，出欄快，不會發生高致病性禽流感，從而放棄了免疫；二是有些地區對禽流感疫苗的運送、保存管理不到位，造成疫苗失效；三是個別縣（區）使用了不同廠家生產的針對不同毒株的禽流感疫苗，且存在去年未使用完的疫苗，在今年已換新的情況下，仍繼續使用的現象。因此，各地職能部門需要加大宣傳力度，提高養禽場主對高致病性禽流感防控的認識，加強對禽流感疫苗運送、保存的管理，強化冷鏈措施，選擇合適的疫苗，并進一步加強對高致病性禽流感免疫抗體的監測。

H5 亞型禽流感免疫個體合格率與場合格率之間不存在線性回歸關系，可能與H5 亞型禽流感免疫抗體合格率近年來波動不明顯，并且抽樣場數、每場抽樣數量偏少，導致X離均差平方和（Lxx）小，從而F值偏小有關。這提示在免疫抗體比較穩定時，仍要做好免疫抗體監測和評估工作，增加抽樣場數和每場抽樣數量，為以后高致病性禽流感免疫抗體監測和效果評估提供參考。H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率與場合格率之間存在線性回歸關系，因此可以利用H7 亞型禽流感免疫抗體個體合格率與場合格率的線性回歸方程，估算湖南省規模養禽場H7 亞型禽流感免疫抗體場合格率情況，為湖南省防控H7 亞型禽流感提供數據支持。