麝香保心丸聯(lián)合阿托伐他汀對老年冠心病患者心功能、氧化應激及miR-133、miR-499表達的影響

吳立華，吳鐘江

(海口市第三人民醫(yī)院，1.心內科；2.神經(jīng)內科，海南 海口 571100)

冠心病(coronary heart disease，CHD)是因冠狀動脈壁被膽固醇及其他物質沉積形成的斑塊導致管腔變窄，部分或完全阻斷血流而引起的缺血性心臟病，嚴重時可誘發(fā)急性心肌梗死或猝死，威脅患者生命安全[1]。CHD不可治愈，易反復發(fā)作，進行性加重病情，但可通過改變生活方式、藥物、手術等干預阻止或延緩病情進展[2]。高血脂是引起CHD的獨立危險因素，臨床常使用阿托伐他汀等血脂調節(jié)藥物防治CHD[3]，但因西藥作用機制單一，療效受限。中醫(yī)藥的多靶點效應則在CHD治療中獨具優(yōu)勢[4]。麝香保心丸是由舌象、人參、牛黃等7余味中藥精制而成的中成藥，主治芳香溫通、益氣強心，研究[5]證實，可有效改善CHD患者的血脂、炎癥和血管內皮功能。近年來，研究[6-7]發(fā)現(xiàn)，氧化應激在CHD的發(fā)生發(fā)展中作用重要；而微小RNA(miRNA)也被發(fā)現(xiàn)與CHD病變關系密切。本研究旨在探究麝香保心丸聯(lián)合阿托伐他汀對老年CDH患者心功能、氧化應激及miR-133、miR-499表達的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年3月至2021年3月海口市第三人民醫(yī)院收治的90例CHD老年患者為研究對象，根據(jù)治療方法不同分為對照組和觀察組，每組各45例。本研究經(jīng)院倫理委員會審核批準，患者及家屬知情同意。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。納入標準：(1)確診為冠心病；(2)高血脂；(3)年齡60～85歲；(4)生命體征平穩(wěn)；(5)配合度高。排除標準：(1)合并心肌梗死、心力衰竭者；(2)合并嚴重腦、肺、腎、肝功能障礙者；(3)合并免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病、精神疾病、惡性腫瘤者；(4)過敏體質者。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 治療方法 對照組予以阿托伐他汀鈣片(輝瑞制藥)治療，20 mg/次，1次/晚；觀察組在對照組基礎上增加麝香保心丸(22.5 mg，上海和黃藥業(yè)有限公司)治療，50 mg/次，3次/d，療程均為12周。

1.2.2 觀察指標 (1)臨床療效：參考《臨床冠心病診斷與治療指南》[8]進行3級評價。顯效：臨床癥狀完全或顯著改善，3個月內未發(fā)生心絞痛或心絞痛發(fā)作次數(shù)降低>90%；有效：臨床癥狀明顯改善，3個月內心絞痛發(fā)作次數(shù)降低50%～90%；無效：未達到以上標準。總有效率=(顯效+有效)例數(shù)/總例數(shù)×100%。(2)心功能指標：治療前后采用心臟彩色多普勒超聲診斷儀(iE33型，PHILIPS)檢測患者左心室射血分數(shù)(LVEF)、左心室收縮期末內徑(LVESD)、左心室舒張期末內徑(LVEDD)。(3)氧化應激指標：治療前后采集采集患者空腹外周靜脈血，離心分離出血清于-20 ℃下保存，采用黃嘌呤氧化酶法檢測血清超氧化物歧化酶(SOD)水平；硫代巴托酸顯色法檢測丙二醛(MDA)水平；比色法檢測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)水平。(4)血漿miR-133、miR-499表達水平：治療前后取分離血漿150 μL，加TRIzol試劑300 μL、氯仿60 μL，室溫靜置，離心15 min(12 000×g，4 ℃)，留取分層水相，加異丙醇150 μL均勻混合，再次離心10 min(12 000×g，4 ℃)，沉淀RNA，棄上清液，加乙醇(750 mL/L)300 μL洗滌，振蕩均勻，離心5 min(7 500×g，4 ℃)，棄上清液，干燥RNA后用DEPC 20 μL溶解，使用紫外分光光度計檢測總RNA吸光度，使用RT-qPCR，以兩步法檢測miR-133、miR-499表達水平，按逆轉錄試劑盒說明進行反轉錄反應。反應總體積25 μL；反應條件：95 ℃ 15 min預變性，95 ℃ 15 s，60 ℃ 60 s，總共35個循環(huán)。以2-ΔCt表示miR-133、miR-499的相對表達量。ΔCt=CtmiRNA-(Ctcel-miR-133+ Ctcel-miR-499)/2。(5)不良反應發(fā)生情況：包括胃腸道不適、皮疹、味覺障礙、頭暈、頭痛等。

1.3 統(tǒng)計學分析

2 結果

2.1 兩組患者臨床療效比較

觀察組患者總有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者臨床療效比較[n(%)]

2.2 兩組患者心功能指標比較

治療前，兩組患者心功能指標比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后，兩組患者LVEF均提高(P<0.05)，且觀察組高于對照組(P<0.05)；LVESD、LVEDD均降低(P<0.05)，且觀察組低于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患者心功能指標比較

2.3 兩組患者氧化應激指標比較

治療前，兩組患者氧化應激指標比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后，兩組患者血清MDA均降低(P<0.05)，且觀察組低于對照組(P<0.05)；SOD、GSH-Px水平均提高(P<0.05)，且觀察組高于對照組(P<0.05)。見表4。

表4 兩組患者氧化應激指標比較

2.4 兩組患者miR-133、miR-499表達水平比較

治療前，兩組患者miR-133、miR-499表達水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后，兩組患者miR-133、miR-499水平均降低(P<0.05)；且觀察組低于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 兩組患者miR-133、miR-499表達水平比較

2.5 兩組患者不良反應發(fā)生情況比較

治療期間，兩組患者均未發(fā)生嚴重不良反應導致患者退出研究。觀察組患者發(fā)生胃腸道不適1例，皮疹1例，味覺障礙2例，不良反應總發(fā)生率為8.89%(4/45)；對照組發(fā)生胃腸道不適1例，頭暈頭痛1例，味覺障礙1例，不良反應總發(fā)生率為6.67%(3/45)。兩組患者不良反應總發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

3 討論

CHD是臨床常見心血管疾病，阿托伐他汀鈣片是其治療常用藥物，可通過阻斷羥甲戊酸轉化過程從而減少包括膽固醇在內的固醇前體合成，降低血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇含量而發(fā)揮降脂作用，降低CHD患者發(fā)生心肌梗死、心力衰竭、心絞痛等風險[9]。考慮到阿托伐他汀作用機制單一，中西醫(yī)聯(lián)合治療CHD在近年逐漸受到重視且被證實具較好的臨床療效和安全性[10]。

中醫(yī)認為，CHD屬“心痛”“胸痹”等范疇，以氣虛、血瘀等最為常見，為本虛標實之癥[11]。麝香保心丸是以宋代名方蘇合香丸為基礎，以麝香、蘇合香、人參、肉桂、蟾酥、牛黃、冰片7味中藥用現(xiàn)代技術精制而成，具溫陽逐寒、化濁開竅、益氣強心之效。現(xiàn)代藥理學研究[12-14]顯示，麝香保心丸具有強心、調脂、改善心肌氧耗、抑制血管炎性反應、增加冠脈血流、修復血管內皮損傷等作用，有益于CHD患者。本研究結果顯示，相比對照組，觀察組總有效率提高(P<0.05)，且治療后LVEF、LVESD、LVEDD更優(yōu)(P<0.05)，與既往報道類似[15]，表明在阿托伐他汀基礎上，應用麝香保心丸可提高療效，改善心功能。氧化應激與CHD的發(fā)生發(fā)展關系密切。氧化應激反應產(chǎn)生的活性氧(ROS)將刺激血管平滑肌細胞、內皮細胞產(chǎn)生一系列細胞因子誘發(fā)平滑肌細胞遷移、內皮細胞凋亡等，導致冠脈粥樣斑塊的形成、破裂，并進一步加重心肌損傷[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，觀察組患者治療后血清MDA更低(P<0.05)；SOD、GSH-Px水平更高(P<0.05)，表明增加麝香保心丸治療CHD可有效減輕氧化應激反應，可能與麝香保心丸的多成分、多靶點作用有關：(1)麝香可通過改善細胞內相關抗氧化酶如SOD、GSH-Px等的活性來抵抗氧化應激損傷[17]；(2)蘇合香揮發(fā)油則可通過抑制TLR9的過表達來提高SOD活性，減輕氧化應激[18]；(3)人參皂苷可通過參與NF-κB、Wnt/β-Catenin、PI3K/AKT、Keap1-Nrf2-ARE等多個信號通路來調節(jié)機體的氧化與抗氧化系統(tǒng)的平衡[19]；(4)肉桂總黃酮也被證實有抑制氧化應激反應的作用[20]。

miRNA是一種單鏈、非編碼RNA，近年來被證實在CHD、心律失常、心力衰竭等進展中具有重要作用，將其作為心血管疾病潛在標志物的研究越來越多。miR-133和miR-499均具有心肌特異性，二者在心肌發(fā)生急性損傷后進入外周血液循環(huán)[21]。miR-133的相對表達量與冠狀動脈病變的狹窄程度呈正相關[22]，miR-499也被證實與CHD伴慢性心衰患者的心功能、心室重構程度呈負相關[23]。因此，檢測miR-133和miR-499的相對表達量也有助于評估CHD患者病情。本研究顯示，觀察組患者治療后miR-133、miR-499表達水平均低于對照組(P<0.05)，表明麝香保心丸聯(lián)合阿托伐他汀可降低CHD患者miR-133、miR-499的相對表達量，但其作用機制尚不明晰。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，兩組患者不良反應總發(fā)生率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，表明二者聯(lián)用安全性好。

綜上，在使用阿托伐他汀的基礎上，對老年CHD患者增加麝香保心丸治療，可提高療效，且具良好的安全性，減輕氧化應激反應、減少miR-133和miR-499的相對表達量可能是其發(fā)揮療效的作用機制。