兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用效果對比探討

張玉啟

臨沂市蘭山區人民醫院檢驗科，山東臨沂 276000

細菌感染是目前臨床最為多見的病癥之一，一旦發生細菌感染可對患者的身體健康造成較大的影響，若不能及時發現并采取針對性的治療措施甚至會威脅到患者的生命安全，敗血癥及菌血癥都是臨床常見的細菌感染類型[1]。在治療前進行細菌鑒定是鑒別細菌類型的重要方法，通過細菌鑒定將未知的細菌與已知相似細菌進行鑒定、區分，對后續制定治療方案和改善預后均有非常重要的指導意義和參考作用[2]。目前臨床細菌鑒定主要采用的方法有核酸檢測法、自動化儀器鑒定法及生化檢驗鑒定法等[3]。敗血癥及菌血癥的病死風險均極高，對此類患者進行菌種的鑒定及進行藥敏試驗都非常重要[4]。近幾年我國在抗生素的使用方面雖然已經加大管控力度，但抗生素濫用的現象仍然比較普遍，這一現象直接影響細菌的耐藥性及敏感性，也無疑給臨床的有效治療增加非常大的困難[5]。在治療前選擇一種高效的細菌鑒定方法并根據這一結果指導用藥對提高治療效果非常重要。當下主要采取的藥敏試驗有常規藥敏試驗和直接藥敏試驗兩種[6]，本研究選擇2019年1月—2020年1月臨沂市蘭山區人民醫院收治的患者96例，目的即在于進一步討論這兩種檢驗方法在臨床實際工作中的應用價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究共納入研究對象96例，均為此時間段內在本院接受治療并進行血液細菌檢驗的患者，年齡23～70歲，平均（46.42±6.19）歲；男52例，女44例；體質量44～81 kg，平均（62.29±10.31）kg；病程2～11 d，平均（6.14±1.12）d。本研究已提前向本院醫學倫理委員會申請并獲得批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：對本研究內容及研究目的均知情并自愿加入。排除標準：嚴重精神障礙無法配合完成研究者；已知患有血液疾病者。

1.3 方法

所有研究對象在進行血液樣本采集前2 d均未使用任何藥物，避免因藥物因素導致血液樣本檢驗結果不準確。均抽取晨間空腹狀態下的肘靜脈血，且采血時均采集患者左側肘靜脈血。共計采集血液樣本40 mL并分成2份，血液樣本采集后需冷藏保存并轉送致檢驗所，其中一份利用直接藥敏試驗法進行檢驗，另一份利用常規藥敏試驗法進行檢驗。

①直接藥敏試驗：將收集到的血液樣本利用BACTEC 9240檢驗系統進行培養和檢驗，當檢驗結果提示為陽性時需提取血液樣本10 mL，并注入無菌試管中利用離心機以1 600 r/min的速度進行離心處理6 min，離心后取上層清液并對此清液再次以2 900 r/min的速度進行離心處理13 min，將上層清液清除后使用生理鹽水對剩余的液體進行洗滌，共計洗滌2次，進行沉瀉和重懸[7]。最終將所獲得到液體進行革蘭染色并將其均勻地涂抹在載玻片上并在顯微鏡下進行觀察，當樣本形狀為鏈狀時則可判斷為革蘭陽性球菌[8]，對樣本進行利用5%羊血平板+MH法進行初級藥敏試驗，根據藥敏試驗結果選擇恰當的酶，將菌液濃度調節到6×108cfu/L后將其接種到藥敏綜合板上并進行藥敏試驗和細菌鑒定[9]。

②常規藥敏試驗：將血液樣本接種在麥康凱平板或是血平板上進行16～28 h的孵育，孵育時溫度應保持在35℃，利用革蘭鏡檢法觀察孵育得到的菌落涂片，根據試驗得到的結果選擇恰當的酶試驗法進行藥敏試驗和細菌鑒定[10]。

1.4 觀察指標

以細菌培養作為金標準，對比直接藥敏試驗法和常規藥敏試驗法的檢驗合格率。記錄并比較兩種檢驗方法所用時間。

1.5 統計方法

將研究所得結果均錄入Excel表格中建立數據庫，數據分析利用SPSS 24.0統計學軟件，符合正態分布的計量資料以(±s)表示，比較采用t檢驗；計數資料以頻數或率（%）表示，比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 直接藥敏試驗法和常規藥敏試驗法的檢驗合格率對比

本研究共計納入血液樣本96例，通過細菌培養及檢驗共檢出陽性樣本88例，利用直接藥敏試驗檢出88例，檢出符合率為100.00%，利用常規藥敏試驗檢出86例，檢出符合率為97.73%。兩種檢驗方法檢出符合率對比，差異無統計學意義（χ2=2.023，P＞0.05）。見表1。

表1 直接藥敏試驗法和常規藥敏試驗法的檢驗合格率對比

2.2 直接藥敏試驗法和常規藥敏試驗法在檢驗所耗費時間比較

常規藥敏試驗法獲得檢驗結果平均所用時間為（71.33±8.84）h，直接藥敏試驗法獲得檢驗結果平均所用時間為（9.86±2.58）h，得出采取直接藥敏試驗法進行檢驗所用的時間更少，差異有統計學意義（t=65.402，P＜0.001）。

3 討論

抗生素即為抗菌素，是由真菌及細菌等產生的可以抑制或殺死其他真菌及細菌的一類物質。目前按照作用劃分可將其分為4大類，第1類為通過阻止細胞膜合成達到抑菌效果的藥物，比如青霉素類藥物；第2類為抑制和干擾細菌等蛋白質合成的藥物，比如四環素類藥物；第3類為對細菌等核酸代謝產生抑制和干擾作用的藥物，比如利福霉素等藥物；第4類藥物可以對細菌等細胞膜結構產生破壞作用，比如多黏菌素類藥物[11-12]。使用抗生素類藥物時應注意分辨其適應證，明確感染菌種，同時還需要做到按療程足量使用才能達到預期的效果。近幾十年，抗生素類藥物的種類不斷增多，且臨床在治療各類疾病時對抗生素的使用情況也越來越頻繁，加之對抗生素類藥物使用方面的監督力度不大，通過藥店等渠道均可購得廣譜抗生素，因此抗生素濫用的情況非常普遍。而抗生素濫用導致的直接后果就是病菌的耐藥性增強，其藥物敏感性下降，直接影響治療效果，增加治療的難度，同時也增加患者的經濟負擔[13]。及時對病原菌類型進行鑒別并針對病原菌進行藥敏試驗對指導用藥、提高療效、提高用藥安全性均有著非常重要的意義。

目前臨床在進行血液細菌檢驗時主要用的方法即為直接藥敏試驗及常規藥敏試驗兩種，通過這兩種藥敏試驗來檢驗病原菌對相應抗生素的耐藥性及敏感性[14]。近幾年隨著醫學檢驗技術的飛速發展，直接藥敏試驗也在臨床得到廣泛的認可和應用。大量實踐證實直接藥敏試驗具有用時短、準確性高的優點，該檢驗方法主是直接將陽性血液樣本接種在平板上，將相對應的抗生素藥敏貼紙附在其上直接進行細菌鑒定和藥敏試驗，省掉常規藥敏試驗中提前進行細菌分離培養所耗費的時間[15]，檢驗的速度及效率則得以提升。臨床醫師可以及時依照檢驗結果進行相處的處置。常規藥敏試驗則是依據抑菌環直徑及抗生素的抑菌濃度之間的負相關關系進行判斷，是一種定性試驗[16]。它的不足之處在于對檢驗的條件要求非常苛刻，且檢驗所耗時間也較長，一般情況下需要2～3 d才能獲得檢驗結果，對患者的及時治療則缺乏時效性，在檢驗沒有得到結論前臨床醫師只能根據自己既往的工作經驗對患者用藥[17]，這樣則可能出現藥效不理想的情況，甚至可能導致病情惡化、延誤治療，也可能引發醫療糾紛。

從本研究結果可以見到，參與研究的96例患者的血液樣本經細菌培養共計檢出陽性樣本88例，采用直接藥敏試驗的檢驗符合率達到100.00%（88/88），采取常規藥敏試驗的檢驗符合率為97.73%（86/88），兩者在符合率方面相近（P＞0.05），這一結論與胡紅霞等[18]研究結果比較一致，其研究中共計納入100例研究對象的血液樣本并分別進行直接藥敏試驗和常規藥敏試驗，通過細菌培養發現陽性樣本90份，以此作為金標準，直接藥敏試驗的檢出符合率為100.0%（90/90），常規藥敏試驗的檢出符合率為91.1%（82/90），兩種檢驗方式的符合率相近（P＞0.05），進一步證實直接藥敏試驗和常規藥敏試驗均可以得到比較準確的結論，但從兩種藥敏試驗所需耗費的時間上對比可見，本研究中直接藥敏試驗平均所耗時間僅為（9.86±2.58）h，而常規藥敏試驗平均所耗時間則長達（71.33±8.84）h，可見相比較而言直接藥敏試驗所花費的時間更少，因此其臨床利用價值也更高。

綜上所述，每一種細菌對不同種抗生素的敏感性及耐藥性上均有一定的差異，在臨床進行診治前對細菌的種類及其耐藥情況進行鑒別非常重要，在血液細菌檢驗中不論是采取直接藥敏試驗還是采取常規藥敏試驗都可以獲得較為準確的試驗結果，均可以為臨床制定合理的治療方案、提高治療有效率、降低不合理用藥率和并發癥發生率提供比較準確的試驗依據，但相比較而言直接藥敏試驗的時效性更好，具有較高的應用價值。