枯草芽孢桿菌對鯉魚抗氧化功能的影響

高志強

（莘縣農業農村局，山東 莘縣 252400）

池塘養殖已成為我國水產養殖的重要養殖方式之一[1]。但池塘養殖存在一些弊端，如水體環境、營養、微生物感染等，以上這些不利因素會導致魚類機體疾病頻發，甚至引起大規模死亡，限制了水產養殖業的健康發展。因此，如何提高池塘養殖水產生物機體的抗應激能力、抗病能力至關重要。水產養殖中，經常使用抗生素預防和治療水產生物疾病，但長期過量使用或濫用導致了一系列問題，如耐藥菌株的產生、抗生素殘留、環境污染等。研究發現，枯草芽孢桿菌可以抑制動物腸道有害菌的繁殖，也能分泌代謝產物和抗生素，對水產養殖具有很好的效果。大量研究發現，枯草芽孢桿菌可以提高魚類機體腸道黏膜免疫，增強機體抗應激能力，提高機體免疫力和抗氧化能力，改善餌料轉化率，提高血清非特異性酶活力[2]；益生菌可以通過調節炎癥因子的分泌和表達調節機體的先天性免疫，增強機體腸道抗氧化應激的能力。鯉魚是我國主要水產養殖品種之一，因適應能力強、生長快速、肉質鮮美備受研究者的關注和研究。目前，枯草芽孢桿菌在鯉魚養殖方面的研究甚少，因此，本試驗以鯉魚為受試對象，探究鯉魚基礎餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌對其機體抗氧化指標的影響，為枯草芽孢桿菌在鯉魚養殖中的合理應用提供基礎數據參考。

1 試驗材料與試驗方法

1.1 試驗材料

本試驗所使用的的枯草芽孢桿菌由無錫中水漁業科技有限公司提供，有效活菌數≥1.0×1010CFU/g。

試驗鯉魚購自山東種工漁業發展有限公司。

1.2 試驗設計

試驗選取體重、體況相近的健康鯉魚600尾，按照單因素隨機試驗原則，將其均分為4組，每組5個重復，每個重復30尾鯉魚。對照組鯉魚飼喂基礎餌料，枯草芽孢桿菌組鯉魚依次飼喂含有0.5%（試驗1組）、1.0%（試驗2組）和1.5%（試驗3組）枯草芽孢桿菌的基礎餌料。試驗周期為4周，試驗結束后檢測鯉魚機體的抗氧化功能。

1.3 飼養管理

試驗前，需要對用于養殖鯉魚的水族箱清洗、消毒。試驗鯉魚馴化10天后進行正式試驗，馴化期間投喂基礎餌料。試驗鯉魚的養殖水環境為室內循環淡水，水溫控制在21℃～24℃，pH值控制在7.2～7.5，溶氧含量大于5.5 mg/L，氨氮含量低于0.28 mg/L，每日換水量約為總水量的1/3。每日早、中、晚試驗鯉魚飼喂3次，飼喂量約為魚體質量的3.4%～4.5%。

1.4 檢測項目

試驗4周結束后，試驗鯉魚禁食12小時，每重復中選擇3尾鯉魚，尾靜脈采集血液，在4℃條件下4000 r/min離心6 min，-20℃冰箱保存，用于血清抗氧化指標的檢測。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒進行抗氧化指標的檢測（總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶及丙二醛），檢測步驟及方法嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.5 數據處理

抗氧化數據指標采用SPSS 24.0進行統計分析，使用LSD法多重比較，P＜0.05表示此指標各組數據差異顯著，結果以平均數和標準誤呈現。

2 結果與分析

餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌對鯉魚血清抗氧化指標的影響見表1。鯉魚餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌可以不同程度地增強鯉魚機體的抗氧化能力。其中，試驗2組和試驗3組鯉魚血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組有提高的趨勢（P＞0.05）；試驗2組和試驗3組鯉魚血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于對照組和試驗1組（P＜0.05），試驗1組與對照組差異不顯著（P＞0.05）；試驗2組鯉魚血清中過氧化氫酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組和試驗3組有比對照組提高的趨勢（P＞0.05）；試驗組鯉魚血清中丙二醛含量均比對照組顯著降低（P＜0.05）。研究表明，鯉魚餌料中添加1.0%的枯草芽孢桿菌對機體抗氧化功能效果較好。

表1 餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌對鯉魚血清抗氧化指標的影響

3 討論

動物機體產生氧化應激易導致機體衰老，并發生疾病，主要受超氧陰離子和OH·的威脅[2]。動物機體內存在清除自由基及脂質氧化物的抗氧化酶類，主要包括CAT、SOD、GSH-Px等，保護機體免受氧化損傷[3]。本研究中，試驗2組和試驗3組鯉魚血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組；試驗2組和試驗3組鯉魚血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于對照組和試驗1組；試驗2組鯉魚血清中過氧化氫酶活性顯著高于對照組；試驗組鯉魚血清中丙二醛含量均比對照組顯著降低。研究表明，鯉魚餌料中添加1.0%的枯草芽孢桿菌對機體抗氧化功能效果較好。張冬梅等[4]研究發現，在大口黑鱸養殖中，使用適量的枯草芽孢桿菌可以提高腸道組織的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶及過氧化氫酶活性，提高了機體的抗氧化能力，且枯草芽孢桿菌的最適添加量為1.0%，于本研究結論類似。表明在水產生物養殖中使用適量的枯草芽孢桿菌可以增強機體的抗氧化功能，可與枯草芽孢桿菌改善了機體腸道健康，增強了機體對抗應激能力。

4 結論

本試驗條件下，在鯉魚餌料中使用適宜水平的枯草芽孢桿菌可以顯著增強機體血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶活性，顯著降低丙二醛含量，增強了鯉魚機體的抗氧化功能，且枯草芽孢桿菌的最適添加量為1.0%。