獻血者乙肝病毒表面抗原初篩反應性結果S/CO值與真陽性的關系研究

李沖 閆曉娟 尚高峰

(1.陜西省商洛市中心血站檢驗科,陜西 商洛 726000;2.武功縣人民醫院檢驗科,陜西 咸陽 712200)

異性病毒肝炎是臨床上最為常見的傳染病之一，主要由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)引起，以肝臟為靶器官，損傷其他多種器官[1]。由于ELISA靈敏度高，導致HBsAg假陽性較高，導致血液來源的流失，影響臨床的供血需求[2-4]。因此如何對HBsAg初篩反應性標本進行確證，降低假陽性率，一直是臨床研究的重點。本文通過對HBsAg ELISA反應性標本的S/CO值進行確證，分析不同ELISA試劑的S/CO值臨界點，從而有效降低篩查的假陽性，滿足臨床供血需求。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2020年12月期間我市采用兩種試驗：初復兩次酶聯免疫吸附試驗(ELISA)及核酸擴增試驗(NAT)篩查乙肝病毒表面抗原初篩出現反應性結果的600例無償獻血者作為研究對象，其中男性336例，女性264例。初次獻血者419例，重復獻血者181例。年齡21～55歲，平均年齡(36.4±5.3)歲。

1.2方法 (1)EISA HBsAg檢測：初檢儀器：Tecan公司FreedomEVO前加樣系統，西門子公司BEPⅢ酶免后處理系統。復檢儀器：Tecan公司FreedomEVO前加樣系統，Ausbio公司FAME24/20酶免后處理系統。試劑：乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒(酶聯免疫法)，生產廠家分別為：北京萬泰生物藥業股份有限公司(以下簡稱北京萬泰)，英科新創(廈門)科技股份有限公司(以下簡稱廈門新創)質控品：北京康徹思坦公司生產的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)血清(液體)標準物質。(2)NAT檢測：儀器：羅氏COBAS201核酸檢測系統(美國Roche)；試劑：羅氏公司乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 人類免疫缺陷病毒(1+2型)檢核酸試劑(PCR-熒光法)(Procleix UltrioAssay)。質控品：北京康徹思坦公司生產的適用于羅氏二代混檢系統的血篩核酸混合(HBVDNA/HCVRNA/HIV -1RNA)(液體)標準物質。以上所有使用的試劑均檢查合格且在試劑有效期內使用；所有的儀器均按儀器說明書的要求進行保養和維護，并確保儀器在正常工作狀態下運轉。(3)獻血者HBsAg確證：珠海麗珠試劑股份有限公司提供的HBsAg確證試劑盒，上海科華生物工程有限公司提供的核酸檢測試劑盒(PCR熒光法)。將任意初篩ELISA呈反應性的標本進行中和試驗，對結果不確定的標本進行雙孔復試，檢測步驟和判定標準嚴格按試劑盒操作說明書進行。

2 結 果

2.1兩種ELISA試劑初篩結果對比 共有600例標本呈HBsAg ELISA反應性，將600例標本再進行中和試驗，當S/CO<0.8時，兩種ELISA初篩試劑的陰性率均為100%(487/487，80/80)；當0.8≤S/CO<1時，北京萬泰試劑假陽性率為0，廈門新創試劑假陽性率100%(4/4)；當S/CO≥1時，北京萬泰試劑和廈門新創試劑的ELSIA陽性率分別為51.33%(58/113)、28.88%(149/516)。見表1。

表1 兩種ELISA試劑初篩結果對比

2.2ROC曲線繪制評估HBsAg ELISA初篩試劑S/CO的適宜臨界值 當北京萬泰試劑與廈門新創試劑的適宜S/CO值分別為1.628、3.229時，各自AUC值最大分別為0.995、0.968，靈敏度均為1，特異度分別為0.962、0.784。見表2。

表2 兩種HBsAg ELISA初篩試劑結果與HBsAg陽性預測值(S/CO值)

3 討 論

我國法律法規及相關部門對采血機構進行規定，需要采用兩種不同廠家的ELISA和一種NAT試劑篩查獻血者的HBV，從而降低血液相關疾病傳播的風險[5]。目前對血液篩查反應性的獻血者進行確證試驗是血站篩查假陽性的主要手段[6]。中和試驗是目前確證HBsAg陽性是否準確的主要方法，但由于其操作繁瑣、成本較高，目前在血站難以大范圍推廣應用[7]。且由于我國獻血量和臨床用血量存在一定缺口，也導致了假反應性獻血者的確證試驗開展不足[8]。因此HBsAg假陽性一直存在，且發生率較高，導致了相當一部分血液來源的流失。目前大部分研究發現[9]，中和試驗的HBsAg確證結果的分級與ELISA初篩結果中的S/CO值呈明顯正相關。因此不少學者認為ELISA初篩時具有一個S/CO臨界值，能反映患者是否存在假陽性情況[10]。

本文對我市獻血者進行研究，選取600例ELISA初篩呈反應性的血液標本進行中和試驗確證，采用ROC曲線找出不同ELISA試劑適宜的S/CO值，從而判斷HBsAg的陽性情況，結果顯示，在S/CO<0.8時，兩種試劑的陰性率均為100%，表明在S/CO<0.8時ELISA試劑基本不存在假陽性，診斷的靈敏度、特異度較高。當0.8≤S/CO<1時，北京萬泰試劑假陽性率為0，廈門新創試劑假陽性率為100%，提示不同ELISA試劑對HBsAg陽性率的診斷效能不同，廈門新創試劑在S/CO超過0.8時，存在假陽性，但北京萬泰試劑仍然不存在假陽性。在S/CO≥1時，北京萬泰試劑和廈門新創試劑的陽性率分別為51.33%、28.88%，提示當S/CO值超過1時，ELISA存在假陽性情況。對上述兩種ELISA試劑進行ROC曲線繪制，結果顯示，北京萬泰試劑和廈門新創試劑在S/CO值分別為1.628、3.229時，各自AUC值最大分別為0.995、0.968，靈敏度均為1，特異度分別為0.962、0.784。提示使用北京萬泰試劑對獻血者進行ELISA初篩時，若S/CO值≥1.628，則可直接判斷為HBsAg陽性，無需確證。而在使用廈門新創試劑對獻血者進行ELISA初篩時，若S/CO值≥3.229時，則可直接判斷為HBsAg陽性，無需確證。可見不同ELISA試劑的S/CO臨界值不同，通過ROC曲線判斷不同ELISA試劑診斷HBsAg陽性的S/CO臨界值對采血機構的初篩具有重要意義。

綜上所述，兩種HBsAg ELISA試劑均有各自的適宜S/CO值，檢測結果大于等于該值時，對HBsAg陽性的診斷準確率較高，可直接判斷為陽性，無需確證。