食品檢測機構能力驗證過程中的質量控制

能力驗證是檢驗檢測實驗室認可活動中不可缺少的一項重要內容，不僅是針對個別檢驗項目的考核，同時是對整個機構質量管理體系運行情況的考核，筆者通過對能力驗證的前期準備、過程控制進行分析，積累經(jīng)驗，不斷總結和改進，提升準確性和可控性，提供準確、可靠的檢驗結果。

1 前期準備

1.1 檢測儀器設備的準備

分析測試前應檢查確認分析儀器是否處于正常工作狀態(tài)，儀器設備有無故障，能否正常開、關機，關鍵性能指標如靈敏度和穩(wěn)定性等是否滿足測定方法要求，是否需要進行檢定、校準和期間核查以及相應結果是否合格。多數(shù)測試結果異常與濾芯、進樣墊、襯管、色譜柱等漏氣或者污染有關[1]。例如，筆者在參加食用油中黃曲霉毒素B1檢測能力驗證計劃時出現(xiàn)黃曲霉毒素B1目標峰出峰時間漂移的情況，經(jīng)排查后認為該情況是液相濾芯污染所導致，更換濾芯后出峰時間正常。

1.2 關鍵性耗材及標準品

1.2.1 試劑材料采購及盤點

根據(jù)分析方法中使用的關鍵試劑及耗材列明采購種類和數(shù)量，隨后盤點采購清單是否滿足分析測試要求。

1.2.2 小柱驗收

針對實驗所需要用到的免疫親和柱或固相萃取柱，需對小柱進行驗收。見表1、表2。

表1 小柱外觀驗收表

表2 小柱性能測試驗收表

1.2.3 質控樣品購置

提前購置質控樣品，質控樣品的基質和濃度應盡可能接近能力驗證考核樣品，通常應在能力驗證考核樣品分析測試時，空白對照、質控樣品與考核樣品同時測定，以控制相對誤差[3]。

1.2.4 標準品選擇與購置

標準品盡可能選擇有證標準物質，同時應關注購置的標準物質的轉換系數(shù)與標準是否一致。例如，筆者在參加飲料中糖精鈉（以糖精計）能力驗證計劃時發(fā)現(xiàn)GB 5009.28—2016所使用的糖精鈉標準物質為固體標樣，糖精鈉含結晶水，使用前需在120 ℃烘4 h，干燥器中冷卻至室溫后備用，糖精鈉轉化為以糖精計的轉換系數(shù)為0.887[4]，而筆者購置的糖精鈉標準物質為液體標樣，經(jīng)查閱該標準物質證書后確認，該標準物質直接以糖精定值，計算結果時無需考慮轉換系數(shù)。

標準品不僅可以用來定性和定量，也可用來進行質量監(jiān)控，如在日常檢驗或能力驗證過程的每一個分析批次中，按樣品量的5%插入標準溶液與在測樣品一起檢測，通過檢測結果與標準值的比較，可以評估此次檢測工作是否可以接受。

為測試關鍵性耗材及標準品是否滿足分析測試要求，應在能力驗證考核樣品分析測試前，按照指定標準的操作程序，先做實驗室空白和標準物質測試，以檢驗試劑材料、樣品加標回收率是否滿足要求。

2 過程控制

2.1 樣品的制備

樣品稱量前應使樣品溫度穩(wěn)定至室溫后充分混勻。樣品取樣量應按照標準或作業(yè)指導書的要求，樣品取樣量太少，容易造成前處理損失過多，測試結果偏離曲線線性范圍；取樣量過多，可能造成提取回收率過低或目標物含量超出固相萃取柱或免疫親和柱柱容量，使結果產(chǎn)生偏離。

2.2 校準曲線的設計

2.2.1 校準曲線線性范圍的確定

取1份考核樣品先進行定性和初步定量預實驗，通過考核樣品、空白樣、質控樣品確認考核樣品目標物的添加水平，在定性實驗和初步定量實驗結果確定后[1]，選取校準曲線線性范圍，使得待測樣品濃度盡量在線性中間區(qū)域，以減小測量誤差。

2.2.2 校準曲線的配制

工作曲線的稀釋溶液應與流動相一致以降低溶劑效應，減少因色譜峰形差異導致的積分誤差；配制標準儲備溶液與標準曲線應選用經(jīng)校準后的移液管和容量瓶，盡量減少轉移次數(shù)，降低標準曲線配制及稀釋過程帶來的不確定度；工作曲線還可通過由不同人員配制、逐級配制、隨用隨配等方式來消除誤差。

2.3 質量控制

在考核過程中可以通過空白對照、質控樣、質控樣加標以及考核樣品同時測定的方式進行質量控制?？瞻讓φ帐侵覆患訕悠?，按整個樣品前處理流程進行處理后所得溶液進行上機測定?？瞻讓φ帐菣z驗實驗過程中是否有污染，待測目標物出峰時間處有沒有受到干擾的重要手段；質控樣及質控樣加標則可用于評價考核過程的總體實驗質量水平。

除此之外，在條件允許的情況下，儀器比對、方法比對以及人員比對等方式也可以用于實驗過程中的質量控制。①儀器比對一般適用于原理相同的儀器，如相同廠家的相同型號或者不同型號儀器比對，或不同廠家生產(chǎn)的同類儀器比對。②方法比對是指當檢測項目可由多種檢測方法進行操作時，可選取不同方法進行檢測。③人員比對可以通過安排具有代表性的不同層次的兩人或多人開展比對試驗。儀器比對、方法比對以及人員比對等方式都可以用來評價其各自對實驗結果準確性、穩(wěn)定性和可靠性的影響。

2.4 定性與定量分析

（1）校準曲線一般不少于5個濃度點，且校準曲線的精確度可以從相關系數(shù)r，截距a和斜率b這3個緯度進行評估。①相關系數(shù)r一般要≥0.999，基質復雜的相關系數(shù)可以適度放寬，如果r不符合要求，校準曲線不能用于定量分析。②截距a越接近于0，分析誤差就越小，若截距與0存在明顯差異，則該校準曲線準確度不高。③斜率b會隨著實際試驗條件變化而變化，此時一般需要在一批處理的開始和結束各設置一組標準曲線以實際衡量各種試驗條件的穩(wěn)定性。以上3個緯度若不滿足要求，則需查找原因并重新繪制曲線。

（2）在進行定性分析時，如果存在干擾峰，可以通過改變流動相比例、洗脫流速等方式來達到干擾峰與目標峰分離的目的。例如，GB 5009.28—2016第一法中存在干擾峰或需要輔助定性時，采用甲酸作為流動相來測定苯甲酸、山梨酸和糖精鈉。

（3）對目標物做重復性測定，確認目標物的積分峰寬。筆者在參加一次山梨酸能力驗證時，平行進樣6次山梨酸，計算RSD，起初發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)自動積分的峰面積逐個減少，后來排查之后發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)自動積分時，積分寬度有差異導致峰面積發(fā)生變化。筆者隨后固定目標物積分的初始及結束時間，目標物峰面積穩(wěn)定且正常。

3 結論與討論

從業(yè)者所在檢驗單位管理體系運作是否通暢，檢驗能力水平的高低，都可以在能力驗證活動中體現(xiàn)出來。除此之外，檢驗機構還可通過與外部實驗室的橫向比對，整改以及完善在平日隱藏或者被忽略的問題，以此提高檢測能力[5]。筆者總結多年的工作經(jīng)驗，通過對能力驗證活動中人員、儀器、環(huán)境等因素的質量控制，對能力驗證的前期準備、過程控制進行分析，尋找影響因子及質控技巧，提升準確性和可控性，以此貼合新時代對實驗室能力及發(fā)展的需求。