腸道致病菌，常選3種檢測法

陳培超

腸道致病菌是指排除大腸正常菌群，能夠致病的菌種，其具有嚴(yán)重危害性，通常會引發(fā)感染性腹瀉、痢疾等腸道傳染病，或者可以借助水體、食物等的傳播，引發(fā)流行性疾病，也可能污染人類食物造成食物中毒，甚至?xí){人們生命健康安全。因此，全面了解和掌握腸道致病菌的各種類型很有必要。

沙門氏菌是常見的主要食源性致病菌之一，感染沙門氏菌會引起腸炎和敗血癥，導(dǎo)致急性腹瀉、腹痛、發(fā)燒和嘔吐等癥狀。其污染途徑非常廣泛，在畜禽肉、蛋類、蔬菜及水果中都有存在，其中畜禽產(chǎn)品中的沙門氏菌是人們感染該菌的主要來源。

沙門氏菌具有復(fù)雜的抗原結(jié)構(gòu)，一般可分為菌體（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面（Vi）抗原3種。以不同菌體抗原結(jié)構(gòu)為依據(jù)，可將其分為A、B、C、D、E、F、G、H、I等血清群，再以不同的鞭毛抗原為依據(jù)，分為各種血清型。現(xiàn)階段，已知沙門氏菌的血清類型達(dá)到兩千多種，我國擁有的血清類型為322個，與人相關(guān)聯(lián)的血清型屬于A-E中，其中只有少數(shù)幾種類型可以導(dǎo)致人患病，常見的有鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和豬霍亂沙門氏菌等。

志賀氏菌又稱為痢疾桿菌，是人類細(xì)菌性痢疾的病原菌，在人與人之間可以廣泛的傳染。志賀氏菌屬于革蘭氏染色陰性桿菌，一般分為4類，分別是痢疾志賀菌、福氏志賀菌、鮑氏志賀菌以及宋內(nèi)志賀菌等。志賀氏菌感染非常常見，潛伏期一般是7天以內(nèi)，出現(xiàn)的癥狀主要是發(fā)熱、腹痛、腹瀉、里急后重以及黏液膿血便等。臨床中一旦出現(xiàn)志賀氏菌陽性，應(yīng)該立即應(yīng)用相關(guān)的抗生素進(jìn)行對癥處置。

大腸埃希氏菌屬于埃希菌，主要特點是腸毒素和侵襲力，可以導(dǎo)致嬰兒腹瀉，嚴(yán)重者甚至?xí)l(fā)生死亡。我國食物中毒事件中細(xì)菌性食物中毒的人數(shù)占據(jù)很大比例，約為42.8%，其中主要是由致瀉性大腸埃希氏菌導(dǎo)致，在我國引發(fā)感染性腹瀉的發(fā)病率中位居所有傳染病首位。國際上將其分為5種類型，分別是腸產(chǎn)毒性大腸埃希氏菌（ETEC）、致病性大腸埃希氏菌（EPEC）、腸出血性大腸埃希氏菌（EHEC）、腸侵襲性大腸埃希氏菌（EIEC）、黏附性大腸埃希氏菌（EAEC）。

變形桿菌屬于寄生菌和病原菌，寄生于人和動物中，在自然界分布比較廣泛，比如垃圾、土壤、腐敗有機(jī)物、水和人或動物腸道內(nèi)。

變形桿菌會導(dǎo)致很多類型感染，還可引起食物中毒。中毒食品主要以動物性食品為主，其次為豆制品和涼拌菜，發(fā)病季節(jié)多在夏、秋，中毒原因為被污染食品在食用前未徹底加熱，變形桿菌食物中毒是我國常見的食物中毒之一。

耶爾森菌屬于腸桿菌科，包括鼠疫耶氏菌、小腸結(jié)腸炎耶氏菌與假結(jié)核耶氏菌等十余個菌種，這是一類革蘭陰性小桿菌。其中會對人類產(chǎn)生致病性的包括鼠疫耶氏菌、假結(jié)核耶氏菌和小腸結(jié)腸炎耶氏菌。此細(xì)菌一般借助嚙齒動物、鳥類、家禽等動物感染，人類與已感染的動物接觸，或是食用感染食物或者被節(jié)肢動物叮咬等均可造成感染發(fā)生。其中，小腸結(jié)腸炎耶氏菌是一種重要的人獸共患腸道病原菌，人類感染后會導(dǎo)致急性胃腸炎、腸系膜淋巴結(jié)炎等偽闌尾炎癥狀，有時會出現(xiàn)反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎或結(jié)節(jié)性紅斑等后遺癥。小腸結(jié)腸炎耶氏菌宿主眾多，在家畜家禽及野生動物中都有分布，其中豬、農(nóng)家犬為重要宿主。

副溶血性弧菌是一種嗜鹽性細(xì)菌。副溶血性弧菌食物中毒，是進(jìn)食含有該菌的食物所致，主要來自海產(chǎn)品副溶血性弧菌，如墨魚、海魚、海蝦、海蟹、海蜇，以及含鹽分較高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力強(qiáng)，在抹布和砧板上能生存1個月以上，海水中可存活47天。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。

單增李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌，其具有很強(qiáng)的生存能力和環(huán)境耐受性，可以在蔬菜、乳制品、肉類、冷藏品中存活，感染之后能夠?qū)е滦募⊙住⒐撬柩住⒛X膜炎等疾病，具有很高的死亡率。近幾年，頻繁出現(xiàn)此菌污染食品導(dǎo)致的食物中毒事件，嚴(yán)重威脅食品安全和人類健康。

彎曲菌是一種人畜共患病病原菌，菌體呈逗點狀或S形，微需氧，屬于革蘭氏染色陰性。野生動物、家畜及寵物都是彎曲菌的重要宿主，食用生的或未熟透的禽肉，是彎曲菌最常見的感染原因。彎曲菌感染主要癥狀是發(fā)熱、腹痛、腹瀉等，傳染源包括患者、帶菌者、家禽家畜等。

腸道正常運行依靠腸道內(nèi)的很多菌群，然而，攝入腸道致病菌后會導(dǎo)致腸道內(nèi)出現(xiàn)病變，從而造成腸道消化功能紊亂，產(chǎn)生腸道疾病甚至食物中毒癥狀。為了能找出致病原因，對癥治療，需對腸道致病菌進(jìn)行檢測，找到引起癥狀的病原，通常采取以下檢測方法：常規(guī)培養(yǎng)法、細(xì)菌抗原檢測法、核酸檢測法，鑒定方法包括常規(guī)生化鑒定、分子學(xué)鑒定、血清學(xué)鑒定。

常規(guī)培養(yǎng)法：根據(jù)檢測目標(biāo)菌的種類，選擇特定的人工合成的培養(yǎng)基，將檢測物置于特定培養(yǎng)基中，讓目標(biāo)菌生長，通過目標(biāo)菌生長所需的營養(yǎng)、生長條件、菌落形態(tài)特征進(jìn)行初步的分類鑒別。根據(jù)腸道致病菌的不同，選擇4～50℃條件下生長1～7天，觀察培養(yǎng)基中菌落形態(tài)，將腸道中細(xì)菌類型、數(shù)量確定下來。通常會對生長的菌落進(jìn)行涂片染色后鏡檢，根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)、排列、大小、染色性等做進(jìn)一步的鑒別。

細(xì)菌抗原檢測：是利用特異性抗體能和細(xì)菌菌體表面特定抗原發(fā)生抗原抗體特異性反應(yīng)的原理來進(jìn)行檢測的一項技術(shù)，包括協(xié)同凝集試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、膠體金試驗等，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗、膠體金試驗最為常用。

核酸檢測法：所有生物都含有核酸，核酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），腸道致病菌的核酸檢測主要是針對腸道致病菌中各類致病菌獨有的特異性核酸片段進(jìn)行檢測。當(dāng)檢測出包含某種致病菌的特異性核酸片段時，可以推測含有相應(yīng)的致病菌。核酸檢測主要使用的是細(xì)菌核酸體外擴(kuò)展技術(shù)，又稱聚合酶連反應(yīng)（PCR）。PCR能將DNA某一片段在特定時間內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍，使原本微量的核酸能夠擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究。

以上3種檢測方法中，以常規(guī)培養(yǎng)法作為腸道致病菌檢驗的金標(biāo)準(zhǔn)。在常規(guī)培養(yǎng)法中生長出的可疑致病菌需要進(jìn)一步鑒定其種屬時就要用到生化鑒定、分子學(xué)鑒定、血清學(xué)鑒定等鑒定技術(shù)。

總之，腸道致病菌危害巨大，必須對其提高重視度，加大預(yù)防和控制力度，從而為人們身體健康提供保障。