飛龍前列爽滴丸抗大鼠前列腺增生作用

【摘要】 "目的 "觀察飛龍前列爽滴丸（FDP）對大鼠前列腺增生模型的影響。方法 "采用丙酸睪酮致慢性前列腺增生大鼠模型。將大鼠隨機分為FDP高、中、低劑量組，癃閉舒膠囊陽性對照組，模型組，空白對照組6組，灌胃給藥，每天給藥1次，連續給藥28 d。取前列腺組織稱重，計算前列腺指數（PI）；蘇木精-伊紅染色法（HE）觀察前列腺組織形態變化；酶聯免疫吸附法（Elisa）檢測血清睪酮（T）、雙氫睪酮（DHT）、雌二醇（E2）、表皮生長因子（EGF）含量。結果 "組間比較結果顯示，雖然飛龍前列爽滴丸各劑量組及癃閉舒膠囊組模型大鼠前列腺濕重、前列腺指數均低于模型組，但差異無統計學意義（Pgt;0.05）。與模型組比較，FDP高劑量組可改善前列腺組織病理損傷，降低血清中T、DHT、EGF含量（Plt;0.05）。對E2水平影響不明顯（Pgt;0.05）。結論 飛龍前列爽滴丸具有一定的抗前列腺增生的作用，并可上調雄激素、下調表皮生長因子水平。

【關鍵詞】 "飛龍前列爽滴丸；前列腺增生；睪酮；雙氫睪酮；表皮生長因子

中圖分類號 "R285 " "文獻標識碼 "A " "文章編號 "1671-0223（2023）04--04

Study on effect of Feilong Qianlie Shuang Dropping Pill on anti-prostatic hyperplasia in rats "Hu Maohua， Zeng Qi， Liu Ming， Liu Yang， Yang Xin.Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang 550025， China

【Abstract】 "Objective "To observe the effect of Feilong Qianlie Shuang Dropping Pill （FDP） on the model of benign prostatic hyperplasia in rats. Methods "A rat model of chronic prostatic hyperplasia induced by testosterone propionate was used. Rats were randomly divided into 6 groups： FDP high-dose， medium-dose and low-dose groups， Longbishu Capsule positive control group， model group， blank control group， intragastric administration， once a day for 28 days. The prostate tissue was weighed to calculate the prostate index （PI）; hematoxylin-eosin staining （HE） was used to observe the morphological changes of prostate tissue; enzyme-linked immunosorbent assay （Elisa） was used to detect serum testosterone （T） and dihydrotestosterone （DHT）， estradiol （E2）， epidermal growth factor （EGF） content. Results According to the comparison results between groups although Feilong Qianlie Shuang dropping pill each dose group and Longbishu capsule model rat prostate wet weight， prostatic index is lower than the model group， but there was no statistically significant difference （Pgt;0.05）. Compared with model group， high-dose FDP group could improve the pathological injury of prostate tissue and reduce the contents of T， DHT and EGF in serum （Plt;0.05）. It had no significant effect on E2 level （Pgt;0.05）. Conclusion "Feilong Qianlie Shuang Dropping Pills can inhibit prostatic hyperplasia and up-regulate androgen and down-regulate epidermal growth factor.

【Key words】 " Feilong qianlieshuang dropping pill; Prostatic hyperplasia; Testosterone; Dihydrotestosterone; Epidermal growth factor

良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）是一種老年男性十分常見的慢性疾病。作為一種慢性疾病，BPH在短時間內雖不足以造成患者生命危險，但是其引起的一系列臨床癥狀會嚴重影響患者的生活質量。BPH以尿路癥狀表現為主，包括尿頻、尿急、夜尿次數增多及尿無力等不良癥狀[1]。目前，臨床上對于BPH沒有較好的治療方法。飛龍前列爽滴丸（Feilong Qianlie Shuang Dropping Pill，FDP）主要由頭花蓼等貴州苗藥組成，采用現代科學技術精制而成的口服滴丸制劑，具有通絡化瘀，清熱散結，利尿止痛的功效，主治前列腺炎、前列腺增生。FDP抗前列腺炎的藥理作用已有相關報道[2]。本研究采用丙酸睪酮致慢性前列腺增生大鼠模型，觀察FDP的治療作用，為FDP臨床用于前列腺增生癥的治療提供實驗依據。

1 "材料和方法

1.1 "材料

1.1.1 "實驗動物 "SPF級SD雄性大鼠60只，體質量180～220g，由北京華阜康生物科技股份有限公司提供，動物合格證號：SCXK（京）2019-0008。本實驗獲得貴州中醫藥大學實驗動物倫理委員會批準（批號：20210071），符合中國倫理委員會指導原則。

1.1.2 "藥物與試劑 "FDP，由貴州中醫藥大學藥劑實驗室提供，批號：20210528；癃閉舒膠囊，石家莊科迪藥業有限公司，批號：171004；丙酸睪酮注射液，寧波第二激素廠，批號：110251054。睪酮（T）試劑盒，批號ZC-36635；雙氫睪酮（DHT）試劑盒，批號ZC-37211；雌二醇（E2）試劑盒，批號 ZC-36464；表皮細胞生長因子（EGF）試劑盒，批號：ZC-36425。以上試劑盒均由上海茁彩生物科技有限公司生產。

1.1.3 "儀器 "轉輪式切片機（徠卡-2016，德國）；自動組織脫水機（武漢俊杰電子有限公司 JT-12S）；包埋機（常州郊區中威電子儀器廠 BMJ-A）；PHY-Ⅲ型病理組織漂烘儀（常州市中威電子儀器有限公司 PHY-Ⅲ）；全功能酶標儀（美國ThermoFisher儀器有限公司 MK3）；高速低溫組織研磨儀（武漢賽維爾生物科技有限公司 KZ-III-F）。

1.2 "實驗方法

1.2.1 "動物分組、造模及給藥 "取SPF級SD雄性大鼠60只，180～220g，隨機分為6組：空白對照組、模型組、癃閉舒膠囊組（0.21g/kg）、FDP高劑量組（1.40g/kg）、FDP中劑量組（0.70g/kg）和FDP低劑量組（0.35g/kg），每組10只動物。除空白對照組外，其余各組動物均皮下注射丙酸睪酮橄欖油溶液（5mg/kg），每天1次，連續給藥28d，復制前列腺增生模型[3]。第29天起開始灌胃相應的藥物，10ml/kg，每日1次，連續28d，空白對照組和模型組灌胃等容量蒸餾水。

1.2.2 "取材和標本制作 "末次給藥2h（禁食不禁水12h）大鼠稱重，麻醉大鼠后腹主動脈取血，3500r/min離心10min，取上清液血清，﹣20℃冰箱保存，用于檢測血清T、DHT、E2、EGF含量。取完整前列腺稱重。再取前列腺組織，4%多聚甲醛固定，用于HE染色。

1.3 "檢測指標

（1）前列腺指數（PI）：PI（mg/100g）=前列腺質量（mg）÷大鼠體質量（g）×100。

（2）病理形態觀察：取放置于4%多聚甲醛中的前列腺組織，進行脫水、包埋、切片、HE染色，光學顯微鏡下觀察各組前列腺的形態變化，并拍照加以分析。

（3）大鼠血清T、DHT、E2、EGF含量：采用Elisa法測定，取出血清，平衡至室溫，按照Elisa試劑盒說明書操作，檢測血清T、DHT、E2、EGF的含量。

1.4 "數據分析方法

采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，計量資料均數據以“Mean±SD”表示，多組間均數比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 "結果

2.1 "飛龍前列爽滴丸對模型大鼠前列腺濕重、前列腺指數的影響

組間比較結果顯示，雖然飛龍前列爽滴丸各劑量組及癃閉舒膠囊組模型大鼠前列腺濕重、前列腺指數均低于模型組，但差異無統計學意義（Pgt;0.05），表明飛龍前列爽滴丸對模型大鼠前列腺濕重、前列腺指數的影響不顯著。見表1。

2.2 "飛龍前列爽滴丸對模型大鼠前列腺組織病理形態學的影響

由圖1可見，空白對照組大鼠前列腺腺體排列清晰，腺腔未見擴張，無分泌物，腺上皮細胞排列整齊，細胞核位于中央。模型組前列腺腺體上皮細胞不同程度增生，部分呈乳頭狀增生，細胞呈多層排列，排列較紊亂，上皮細胞變性壞死，部分細胞壞死，見胞核固縮、崩解，胞體嗜酸性增強，部分細胞空泡變性，見胞質溶解呈空網狀，胞核懸于中央。癃閉舒膠囊組前列腺腺體上皮細胞輕微至輕度增生，部分呈乳頭狀增生，排列較紊亂，上皮細胞變性壞死，間質未見明顯炎性細胞浸潤或纖維組織增生。FDP高劑量組前列腺腺體上皮細胞輕微至輕度增生，上皮細胞變性壞死。FDP中劑量組前列腺腺體上皮細胞增生，部分呈乳頭狀增生，上皮細胞排列較紊亂，上皮細胞變性壞死，局部腺體上皮細胞脫落。FDP低劑量組前列腺腺體上皮細胞不同程度增生，部分呈乳頭狀增生，上皮細胞排列較紊亂，上皮細胞變性壞死，局部腺體上皮細胞脫落。

2.3 "飛龍前列爽滴丸對模型大鼠血清T、DHT、E2、EGF含量的影響

各組間模型大鼠血清T、DHT、E2、EGF含量比較結果顯示，E2水平差異無統計學意義（Pgt;0.05）；而各組間血清T、DHT、EGF含量差異有統計學意義（Plt;0.05）；兩兩比較顯示，與空白對照組相比，模型組血清T、DHT、EGF含量明顯升高，差異有統計學意義（Plt;0.05）。與模型組相比，FDP高、中劑量組和陽性組能顯著降低血清T、DHT水平，FDP高劑量組和陽性組能明顯降低血清EGF水平，差異有統計學意義（Plt;0.05）。見表2。

3 "討論

BPH患者由于前列腺組織的增大，從而壓迫膀胱和尿道出口，而引起尿頻、尿急和排尿困難等常見臨床癥狀，嚴重的患者可能會導致尿路感染和膀胱結石等系列并發癥[4]。盡管BHP在短時間不會對患者生命構成威脅，但給患者的日常生活帶來了極大的不便和困擾，也造成了巨大的經濟壓力。據報道，在60歲以上的男性中，BPH總發病率為33%～65%。隨著我國人口老齡化日漸突出，對BPH治療的相關研究已成為國家關注的焦點[5]。西醫通常采用的治療方法是觀察等待、藥物治療、外科治療等，常用的西藥有非那雄胺和依立雄胺（5α-還原酶抑制劑）、坦索羅辛、多沙唑嗪（受體阻滯劑）以及一些植物制劑等。而手術治療和藥物治療都存在潛在的風險和不良并發癥，臨床應用推廣受到很大的阻礙[6-8]。而中藥因其多效性、多靶點性、不良反應小的優勢，已成為了BPH用藥的新方向，受到廣泛的關注。

目前有關BPH的發病機制，常見的有細胞凋亡學說、激素內分泌學說、生長因子學說、間質-上皮細胞相互作用學說[9]。BPH是一個復雜腺體與間質組織增生的組織學變化病理過程。性激素平衡失調學說較早被提出，雄激素是BPH產生的一個重要因素，但其作用機制并不是十分清楚[10]。T是人體內主要的雄激素，在5α-還原酶作用下還原為DHT，前列腺內的DHT濃度增加可導致前列腺的增生[11]。由于雄激素主要通過間質-上皮細胞相互作用模式刺激前列腺上皮組織的增生，其還可直接促使間質組織的異常增生[12]。雌激素是前列腺纖維基質生長刺激因子，作用部位在前列腺間質成纖維細胞、基底上皮細胞，產生角質生長因子及其受體，其可增加對雄激素刺激的敏感性，促進導致BPH[13]。EGF是一種較強的促進細胞分裂因子，通過作用于前列腺上皮細胞膜上的受體以促進上皮細胞的增殖，而EGF的表達與雄激素表達有關，雄激素可以促進EGF的表達[14]。本實驗從前列腺濕重、PI和病理形態學結果直觀反映出前列腺組織增生，說明采用丙酸睪酮誘導BPH模型造模成功。與模型組相比，灌服飛龍前列爽滴丸的BPH大鼠4周后前列腺濕重下降，PI變小，高劑量作用效果顯著，說明飛龍前列爽滴丸可有效減輕丙酸睪酮誘導的大鼠前列腺增生程度。與模型組相比，灌胃飛龍前列爽滴丸的BPH大鼠28d后，飛龍前列爽滴丸高劑量組血清中T、DHT、EGF水平明顯降低，說明飛龍前列爽滴丸可改善性激素和生長因子的水平，從而有效減輕丙酸睪酮誘導的大鼠前列腺增生程度，且該作用具有量-效關系，以高劑量效果最顯著。本研究結果中，丙酸睪酮誘導的 BPH 大鼠模型體內雄激素水平明顯升高，雌激素水平改變不明顯，因此飛龍前列爽滴丸在此主要發揮抗雄激素作用。本實驗結果表明飛龍前列爽滴丸可能是通過降低T表達水平的同時降低DHT水平，從而使EGF的表達減少，大鼠前列腺組織增生情況明顯減輕而起到治療效果。

綜上所述，飛龍前列爽滴丸對BPH具有抑制作用，其作用機制可能與調節性激素和表皮生長因子表達有關。本研究為飛龍前列爽滴丸用于BPH的臨床治療提供了理論支撐、新的途徑和思路。

4 "參考文獻

[1] 葉章群，周利群，黃翼然，等.外科學泌尿外科分冊[M].北京：人民衛生出版社，2016：104.

[2] 劉明，張永萍，隋艷華，等.飛龍前列爽滴丸抗大鼠急性細菌性前列腺炎的實驗研究[J].中國實驗方劑學雜志，2010，16（3）：91-93.

[3] 蘇日娜，魏榮銳，羅維早，等.藏族藥高原尊麻提取物抗前列腺增生作用研究[J].中國中藥雜志，2019，44（9）：1953-1959.

[4] Lai KP， Huang CK， Fang LY， et al.Targeting stromal androgen receptor suppresses prolactin-driven benign prostatic hyperplasia （BPH）[J].Mol Endocrinol，2013，27（10）：1617-1631.

[5] 郭琳，苗明三.基于前列腺增生癥臨床病癥特點的動物模型分析[J].中華中醫藥雜志，2016，31（1）：261-264.

[6] 吳階平.泌尿外科學[M].濟南：山東科學技術出版社，2009：1127.

[7] 周巖，程靜，王瑾，等.良性前列腺增生癥與勃起功能障礙的流行病學及治療方案研究進展[J].中國新藥雜志，2015，24（21）：2437-2466.

[8] Katia MC， Verhamme JLHR， Bosch Marino Miriam.Finasteride in Benign Prostatic Hyperplasia[J].N Engl J Med，2004，350（13）：1359-1361.

[9] 彭濤，莊紅雨，姜永光.代謝綜合征各組分與良性前列腺增生癥的相關性研究[J].中國全科醫學，2017，20（2）：144-149.

[10] Zucker S， Vacirca J.Roleofmatrixmetalloproteinases （MMPs） in colorectal cancer[J].Cancer Metastasis Rev，2004：101-107.

[11] 劉紹龑，白明，紀曉寧，等.益母草總堿對大鼠前列腺增生模型的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（21）：177-180.

[12] 曾瑾，趙軍寧，鄧治文，等.復方金錢草膠囊對丙酸睪酮致大鼠前列腺增生的作用[J].中藥藥理與臨床，2012，28（2）：139-142.

[13] 苗明三，王智明，張玉林，等.水蔓菁總黃酮對大鼠前列腺增生模型的影響[J].中國現代應用藥學，2011，28（1）：4-7.

[14] Grabowska MM， Sandhu B， Day ML．EGF promotes the shedding of soluble E-cadherin in an ADAM10-dependent manner in prostate epithelial cells[J].Cell Signal，2012，24（2）：532-538.

[2022-10-12收稿]