外周血SHP-1、Sestrin2 水平與缺血性腦卒中患者頸動脈斑塊的相關性分析

單青婷，徐 元

（蘇州市第九人民醫院神經內科，江蘇 蘇州 215000）

缺血性腦卒中（cerebral ischemic stroke，CIS）是一種臨床上常見的卒中類型，其發病率、致殘率、死亡率、復發率均較高，給人類健康帶來巨大威脅[1]。動脈粥樣硬化為CIS 發病的危險因素之一，當頸動脈硬化斑塊不穩定時，會出現斑塊潰瘍、破裂等癥狀，引起動脈內血栓的形成，誘發CIS[2-3]。臨床上尚缺乏預測CIS患者頸動脈斑塊是否穩定的實驗室指標，因此尋求安全有效的實驗室指標探討其與CIS 患者頸動脈斑塊的相關性對于指導臨床實踐具有重要意義。蛋白酪氨酸磷酸酶1（SHP-1）為一種調節免疫反應與炎癥反應的重要蛋白，其可通過去磷酸化靶分子，從而達到調控細胞反應的作用[4]。已有研究[5]證實，SHP-1 在心血管疾病、腫瘤等發揮著重要作用。Sestrin 2 為一種高度保守的蛋白，主要由應激反應產生，為代謝的重要調節者[6]。SHIREMAN 等[7]研究證實，Sestrin 2 與急性缺血性腦卒中具有顯著相關性。然而，目前國內尚缺乏有關外周血SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊的相關性研究。鑒于此，本研究特取85 例CIS 患者，旨在明確SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年7 月－2021 年9 月蘇州市第九人民醫院收治的85 例CIS 患者為試驗組，另選擇我院同時間段體檢健康人群73 例為對照組。該研究已獲取醫學倫理委員會審批。納入標準：1）參照《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[8]，患者均符合缺血性腦卒中的診斷標準，且經顱腦CT、磁共振成像等影像學確診，且均為首次確診者；2）頭顱磁共振血管造影與頸部血管彩色超聲證實頸部存在斑塊；3）年齡＞18 歲；4）近半年內未服用他汀類藥物；5）均簽署知情同意書。排除標準：1）嚴重的肝腎功能損害者；2）近期嚴重外傷者；3）合并呼吸系統疾病；4）合并惡性腫瘤者；5）妊娠期或哺乳期女性；6）有腦卒中病史；7）無法配合頸動脈超聲檢查者；8）合并急慢性感染性疾病者。

1.2 研究方法

1.2.1 頸動脈斑塊穩定性判定 采用日立阿洛卡HI VISION Avius 檢測頸動脈斑塊類型與內中膜厚度（inner media thickness，IMT），85 例患者均取仰臥位，使得頸部充分暴露，在頸動脈竇近心端檢測IMT，左右兩側各檢測3 次，結果取平均值。正常頸動脈內膜：IMT ≤1.0 mm；頸動脈內膜增厚：1.0 mm ＜IMT ＜1.2 mm，IMT ≥1.2 mm 為斑塊形成。超聲下根據形態和回聲特點，斑塊可分為：1）低回聲脂質斑塊；2）中等回聲富含膠原蛋白組織的纖維性扁平斑塊；3）強回聲伴聲影的鈣化性斑塊；4）回聲強弱不等的潰瘍性混合斑塊。將低回聲、扁平斑和混合斑診斷為不穩定性斑塊；將強回聲斑塊診斷為穩定性斑塊。根據頸動脈斑塊是否穩定分為穩定組（59 例）與不穩定組（26 例）[9]。

1.2.2 外周血SHP-1、Sestrin2 水平的檢測 體檢當天采集對照組靜脈血4 mL，入院次日清晨采集試驗組4 mL 空腹靜脈血，通過TD6M 臺式低速離心機（鹽城市凱特實驗儀器有限公司），以半徑為6 cm，轉速為3 000 r·min-1離心15 min，取上清液，于-20℃條件下保存待檢。采用酶聯免疫吸附法檢測2 組血清SHP-1、Sestrin2 水平，試劑盒均購自武漢楚銳科藥業科技有限公司。

1.2.3 收集可能引起CIS 患者頸動脈斑塊不穩定的影響因素 包括年齡、性別、吸煙史、病變部位、飲酒史、體質量指數（body mass index，BMI）、既往病史（高血壓史、冠心病史、糖尿病史）、腦卒中家族史，入院時相關實驗室指標：總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白（high Density Lipoprotein-C，HDL-C）、載脂蛋白B1、三酰甘油、載脂蛋白A1、低密度脂蛋白（low-density lipoprotein-C，LDL-C）、空腹血糖、糖化血紅蛋白、白細胞計數、尿酸、高敏C 反應蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）、血清SHP-1、Sestrin2水平。

1.3 觀察指標

1）比較對照組與試驗組的一般資料：包括年齡、性別構成、BMI、血清SHP-1、Sestrin2 水平；2）比較穩定組與不穩定組的臨床資料；3）分析CIS患者頸動脈斑塊不穩定的影響因素；4）分析血清SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩定形成的相關性；5）分析入院時血清SHP-1、Sestrin2水平及二者聯合對CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊的預測價值。

1.4 統計學方法

用SPSS 19.0 軟件分析數據，正態分布計量資料以均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗；計數資料以百分比（%）表示，χ2檢驗，理論頻數＜5 則采用校正χ2。多因素分析采用Logistic回歸分析。以受試者工作特征（receiver operating characteristics，ROC）曲線下面積（area under the curve，AUC）評估預測價值，采用Spearman 分析相關性，r值越大代表相關性越強。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對照組與試驗組的一般資料比較

2 組年齡、性別構成、BMI 比較，差異無統計學意義（P＞0.05），試驗組血清SHP-1 水平低于對照組（P＜0.05），試驗組血清Sestrin2 水平高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 對照組與試驗組的一般資料比較（±s ）

表1 對照組與試驗組的一般資料比較（±s ）

組別 例數年齡/歲性別[例（%）]BMI/（kg·m-2）SHP-1/（ng·mL-1） Sestrin2/（ng·mL-1）男女對照組 7362.35±9.1243（58.90） 30（41.10）23.81±2.751.65±0.3611.26±2.92試驗組 8562.67±9.2551（60.00） 34（40.00）23.62±2.830.62±0.1915.13±3.48 t/ χ2 0.2180.0200.42622.9287.500 P 0.8280.8890.671＜0.001＜0.001

2.2 穩定組與不穩定組的臨床資料比較

不穩定組入院時載脂蛋白A1、LDL-C、空腹血糖、hs-CRP、尿酸、血清Sestrin2水平高于穩定組（P＜0.05），不穩定組入院時血清SHP-1 水平低于穩定組（P＜0.05）。見表2。

表2 穩定組與不穩定組的臨床資料比較（±s ） 例

表2 穩定組與不穩定組的臨床資料比較（±s ） 例

臨床資料不穩定組（26 例）穩定組（59 例）t/ χ2 P年齡/歲62.46±9.2162.76±9.330.1370.891性別男17（65.38）34（57.63）0.4530.501女9（34.62）25（42.37）吸煙史12（46.15）28（47.46）0.0120.912病變部位左側12（46.15）27（45.76）0.0010.973右側14（53.85）32（54.24）飲酒史10（38.46）24（40.68）0.0370.848 BMI/（kg·m-2）23.51±2.7923.67±2.850.2400.811既往病史高血壓史15（57.69）26（44.07）1.3420.247冠心病史12（46.15）22（37.29）0.5910.442糖尿病史 8（30.77）15（25.42）0.2610.609腦卒中家族史 5（19.23） 6（10.17）1.1350.299入院時相關實驗室指標TC/（mmol·L-1） 4.73±0.62 4.58±0.571.0880.280 HDL-C/（mmol·L-1） 1.46±0.29 1.39±0.261.1040.273載脂蛋白B1/（g·L-1） 1.12±0.18 1.14±0.170.4910.625三酰甘油/（mmol·L-1） 1.32±0.28 1.36±0.300.5780.565載脂蛋白A1/（g·L-1） 2.45±0.38 1.52±0.2413.652＜0.001 LDL-C/（mmol·L-1） 3.98±0.72 3.21±0.535.510＜0.001空腹血糖/（mmol·L-1） 7.16±1.78 5.83±1.423.675＜0.001糖化血紅蛋白/% 5.96±1.32 5.34±1.052.3140.023白細胞計數（×109·L-1） 7.14±1.72 7.25±1.830.2600.796尿酸/（μmol·L-1）412.36±45.74381.25±40.363.1430.002 hs-CRP/（mg·L-1） 4.12±0.65 2.33±0.3915.735＜0.001 SHP-1/（ng·mL-1） 0.42±0.11 0.71±0.226.365＜0.001 Sestrin2/（ng·mL-1）17.35±4.6114.15±3.173.710＜0.001

2.3 分析CIS 患者頸動脈斑塊不穩定的影響因素

以入院時載脂蛋白A1、LDL-C、空腹血糖、hs-CRP、血清Sestrin2 水平、尿酸、血清SHP-1 水平為自變量（賦值情況：均為連續變量），以CIS 患者頸動脈斑塊是否穩定為因變量（否= 1，是= 0）進行Logistic回歸分析。結果顯示，入院時載脂蛋白A1、尿酸、血清SHP-1、Sestrin2 水平均為CIS 患者頸動脈斑塊不穩定的影響因素（P＜0.05）。見表3。

2.4 分析血清SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩定形成的相關性

Spearman 分析結果顯示，血清SHP-1 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩定形成呈負相關（P＜0.05），血清Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩定形成呈正相關（P＜0.05）。見表4。

表4 分析血清SHP-1、Sestrin2 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩定形成的相關性

2.5 分析入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯合對CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊的預測價值

入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯合預測CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊AUC 值分別為0.818、0.824、0.868（P＜0.05）。見表5。ROC 曲線見圖1。

圖1 入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯合預測CIS患者發生頸動脈不穩定斑塊的ROC 曲線

表5 分析入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯合對CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊的預測價值

3 討論

CIS 的發生發展與諸多因素密切相關，其中頸動脈不穩定斑塊為CIS 的重要致病因素，且相比于頸動脈狹窄，其危險性更高[10]。相關研究[11]指出，不穩定斑塊會誘導腦血栓的形成，從而使得腦局部供血區血流中止，造成腦組織缺氧、缺血，甚至引起壞死軟化。因此，臨床常以阻礙頸動脈斑塊的形成來防止CIS 的發生。但臨床上尚缺乏特異性的指標用于分析與CIS 患者頸動脈斑塊的相關性，因此早期診斷、預測CIS 患者頸動脈斑塊穩定性對于臨床擬定治療方案具有重要的臨床意義。

本研究結果顯示，相比于正常人群，CIS 患者血清 SHP-1 水平更低，而血清Sestrin2 水平更高，提示CIS 患者血清SHP-1、Sestrin2 水平異常。本研究中Logistic回歸分析結果顯示，入院時載脂蛋白A1、尿酸、血清SHP-1、Sestrin2 水平均為CIS 患者頸動脈斑塊不穩定的影響因素，建議臨床應根據上述危險因素進行早期干預來降低CIS 患者形成頸動脈不穩定斑塊的風險。相關研究[12]指出，載脂蛋白A1 可促進單核細胞與血小板活化，增加機體內單核細胞與血小板間的黏附，從而誘導頸動脈斑塊不穩定形成。國外有研究[13]指出，年齡≥75 歲的中國人群血清尿酸水平升高可能與頸動脈粥樣硬化的發生和進展獨立且顯著相關。相關研究[14-15]指出，SHP-1 主要存在于造血細胞，可脫磷酸化處理下游信號蛋白分子磷酸酪氨酸，從而調控抗原受體復合物、酪氨酸激酶等多個信號通路，從而調控造血干細胞的凋亡與增殖，當SHP-1 基因突變或失活會影響造成的信號通路，從而誘發多種疾病。此外，SHP-1 是STAT3 信號轉導的負調控因子，在肝癌、胃癌等多種惡性腫瘤中發揮抑癌功能[16]。國內有研究[17]指出，慢性髓性白血病患者SHP-1mRNA 較高，可其能夠促進疾病進展。相關研究[18]指出，機體應激狀態會影響Sestrin2 的表達水平，其與機體的各種代謝密切相關。國內有研究[19]指出，急性缺血性腦卒中患者血清Sestrin2 水平異常升高，且監測血清Sestrin2 水平可用于評估患者病情及預后評估。本研究ROC 曲線結果顯示，入院時血清SHP-1、Sestrin2 水平及二者聯合預測CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊的AUC 值分別為0.818、0.824、0.868，提示監測血清SHP-1、Sestrin2 水平可有助于預測CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊，且二者聯合具有更高的預測價值。

綜上所述，血清SHP-1 水平與CIS 患者頸動脈斑塊不穩定形成呈負相關，血清Sestrin2 水平與CIS患者頸動脈斑塊不穩定形成呈正相關，二者可用于預測CIS 患者發生頸動脈不穩定斑塊，且二者聯合預測的價值更高，可進一步推廣。