血清sCD14-st、CD163和GRP78對急性胰腺炎預后不良的診斷價值

唐麗艷,殷棟梅△,劉殿明

1.上海市嘉定區江橋醫院/上海市第一人民醫院嘉定分院普外科,上海 201812;2.上海市普陀區利群醫院普外科,上海 200333

急性胰腺炎是胰腺常見疾病,發病原因是胰酶在胰腺組織內被激活,導致胰腺自身消化,引起各種癥狀。輕度胰腺炎主要表現為惡心、嘔吐、上腹部不適等,隨病情發展出現代謝紊亂和多臟器功能障礙,演變為重度胰腺炎,甚至危及患者生命安全[1]。因此,早期判斷急性胰腺炎的病情對改善患者預后具有重要的臨床價值[2]。炎癥細胞因子參與了急性胰腺炎的發生、發展,其中可溶性白細胞分化抗原14亞型(sCD14-st)是炎癥反應的標志物之一。近年來,有研究證實,血清sCD14-st水平與急性胰腺炎嚴重程度有關[3];CD163是巨噬細胞活化標記物,在中性粒細胞彈性酶的作用下釋放入血,與多種炎癥性疾病具有明顯相關性[4];葡萄糖調節蛋白78(GRP78)為參與蛋白轉運和折疊的分子伴侶,參與了細胞內質網氧化應激反應,在多種炎癥性疾病中具有重要作用[5]。本研究檢測了急性胰腺炎患者血清sCD14-st、CD163和GRP78表達水平,觀察了其評價急性胰腺炎患者預后的臨床價值,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2020年8月至2022年6月上海市嘉定區江橋醫院和上海市普陀區利群醫院收治的急性胰腺炎患者123例作為急性胰腺炎組,其中男55例,女68例;年齡18～78歲,平均(48.24±12.56);體質量指數(25.00±3.77)kg/m2。根據CT嚴重指數分為輕度(56例)、中度(49例)和重度(18例)。另選擇同期在上海市嘉定區江橋醫院和上海市普陀區利群醫院進行健康體檢者45例作為健康對照組,其中男18例,女27例;年齡21～63歲,平均(45.98±11.40)歲;體質量指數(24.97±4.29)kg/m2。兩組一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。納入標準:(1)卻真的急性胰腺炎患者;(2)年齡18～79歲。排除標準:(1)慢性胰腺炎;(2)自身免疫性疾病和腫瘤性疾病;(3)長期使用激素治療;(4)其他類型急、慢性炎癥性疾病,如肺炎、慢性支氣管炎、肝炎和結核等;(5)心、肝、腎等重要臟器功能不全;(6)孕婦和哺乳期婦女;(7)配合困難、智力下降或精神性疾病患者。急性胰腺炎組患者均符合急性胰腺炎診斷標準[6]。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書;本研究經上海市嘉定區江橋醫院和上海市普陀區利群醫院倫理委員會審批通過。

1.2方法

1.2.1血液標本留取及檢測 采集兩組研究對象入院后或入院體檢時肘靜脈血約5 mL,一管采用離心機以3 000 r/min離心10 min,離心半徑9 cm,取上清液置于-70 ℃冰箱中待測,另一管為抗凝劑管,離心后得血漿置于-70 ℃冰箱中待測。采用酶聯免疫吸附試驗測定血清C反應蛋白(CRP)、甘油三酯(TG)、sCD14-st、CD163、GRP78的表達水平;采用己糖激酶法和免疫學乳膠比濁法分別測定血漿空腹血糖(FPG)和D-二聚體水平,試劑盒采用武漢賽培生物科技有限公司,嚴格按試劑盒說明書操作。

1.2.2急性生理和慢性健康狀況評分Ⅱ(APACHEⅡ) 由年齡、嚴重器官系統功能不全或免疫損害、格拉斯哥評分、生理指標評分共同組成,理論最高值為71分,分數越高表示患者病情越嚴重。

1.2.3預后評估 將急性胰腺炎組患者治療28 d內出現胰腺壞死、肺部感染、多臟器功能障礙或死亡者歸為預后不良,否則歸為預后良好。

1.3觀察指標 觀察兩組研究對象血清sCD14-st、CD163、GRP78水平變化情況,采用單因素和多因素分析急性胰腺炎預后不良的影響因素,以及血清sCD14-st、CD163和GRP78水平檢測對急性胰腺炎嚴重程度和預后不良的診斷效能。

2 結 果

2.1兩組研究對象血清sCD14-st、CD163、GRP78水平比較 急性胰腺炎組患者血清sCD14-st、CD163、GRP78水平均高于健康對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組研究對象血清sCD14-st、CD163、GRP78水平比較

2.2不同嚴重程度急性胰腺炎患者血清sCD14-st、CD163、GRP78水平比較 重度患者血清sCD14-st、CD163、GRP78水平均高于中度、輕度患者,且中度患者高于輕度患者,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同嚴重程度急性胰腺炎患者血清sCD14-st、CD163、GRP78水平比較

2.3單因素分析 急性胰腺炎組患者中預后不良患者血清D-二聚體、CRP、sCD14-st、CD163、GRP78水平,以及APACHEⅡ均高于預后良好患者,差異均有統計學意義(P<0.05);而預后不良患者年齡、性別、體質量指數,淀粉酶、FPG、TG水平與預后良好患者比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 單因素分析或n/n)

2.4多因素分析 將表3中P<0.05的指標根據所有患者各項指標的均值進行賦值:D-二聚體≥0.58 mg/L=1,D-二聚體<0.58 mg/L=0;CRP≥76.55 mg/L=1,CRP<76.55 mg/L=0;APACHE Ⅱ≥25.10分=1,APACHE Ⅱ<25.10分=0;sCD14-st≥3.41 ng/mL=1,sCD14-st<3.41 ng/mL=0 ;CD163≥718.56 ng/mL=1,CD163<718.56 ng/mL=0;GRP78≥424.98 ng/mL=1,GRP78<424.98 ng/mL=0。根據是否發生預后不良進行多因素Logistic回歸分析,結果顯示,APACHE Ⅱ≥25.10分、sCD14-st≥3.41 ng/mL、CD163≥718.56 ng/mL和GRP78≥424.98 ng/mL是急性胰腺炎患者發生預后不良的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 多因素分析

2.5血清sCD14-st、CD163、GRP78水平檢測對急性胰腺炎預后不良的診斷效能 根據急性胰腺炎是否發生預后不良進行二元Logistic回歸模型分析得方程Y=3.51×XsCD14-st+0.02×XCD163+0.05×XGRP78-47.37。3項指標聯合檢測的曲線下面積(AUC)均高于單項指標,差異均有統計學意義(P<0.05);而3項指標單項檢測的AUC比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見圖1、表5。

圖1 血清sCD14-st、CD163、GRP78預測急性胰腺炎預后不良的ROC曲線

表5 血清sCD14-st、CD163、GRP78水平檢測對急性胰腺炎預后不良的診斷效能

3 討 論

急性胰腺炎是消化系統常見疾病,由于生活水平的提高和生活習慣的改變,導致急性胰腺炎發病率呈逐年升高趨勢,給患者帶來巨大的痛苦,給家庭和社會帶來巨大的經濟負擔。急性胰腺根據疾病嚴重程度分為輕度和重度,輕度主要為充血水腫型,一般經治療后3～5 d均能痊愈,重度往往會導致全身炎癥反應綜合征,隨著疾病的進展甚至可能會出現臟器功能損害和死亡,其發生率為10%～20%,而病死率較高,為5%左右,嚴重威脅患者的生命安全[7]。炎癥反應貫穿急性胰腺炎整個疾病進展過程,胰酶的異常活化導致組織壞死,引起炎癥反應,而炎癥反應又加重急性胰腺炎[8]。因此,早期對急性胰腺炎病情的評估和預后的判斷對提高治療水平和改善患者預后具有重要臨床意義。本研究結果顯示,急性胰腺炎組患者中預后不良患者血清D-二聚體、CRP、sCD14-st、CD163、GRP78水平,以及APACHEⅡ均高于預后良好患者,而預后不良患者年齡、性別、體質量指數,淀粉酶、FPG、TG水平與預后良好患者比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。進一步多因素分析發現,APACHEⅡ、sCD14-st、CD163、GRP78水平是急性胰腺炎預后不良的獨立影響因素。因此,本研究采用血清sCD14-st、CD163、GRP78水平對急性胰腺炎患者嚴重程度和預后不良進行了預測,并發掘了其臨床價值。

本研究結果顯示,急性胰腺炎組患者血清sCD14-st水平高于健康對照組,并且隨急性胰腺炎嚴重程度升高而升高,說明血清sCD14-st與急性胰腺炎發病具有顯著相關性。CD14是白細胞分化抗原,主要在粒細胞、單核細胞和巨噬細胞的細胞膜中,其有兩種模式,即膜結合CD14和可溶性CD14,在炎癥反應過程中可溶性CD14被蛋白酶切后形成截短形式的可溶性CD14,即為sCD14-st[9]。在動物模型的研究中發現,sCD14-st參與了全身炎癥反應,在膿毒血癥發生2 h后即可出現明顯升高,3 h后達到高峰,4～8 h下降,是全身炎癥反應的第一步,sCD14能引起酪氨酸蛋白激酶的激活,導致“瀑布式的炎癥反應”,引起機體纖溶和凝血系統激活,最終導致膿毒血癥發生,是評價膿毒血癥的早期檢測指標[10]。在急性胰腺炎的研究中同樣出現sCD14-st水平明顯升高,并且發現與急性胰腺炎嚴重程度密切相關[11],與本研究結果一致。本研究還發現,急性胰腺炎組患者中預后不良患者血清sCD14-st水平高于預后良好患者,并且血清sCD14-st水平是急性胰腺炎預后不良的獨立影響因素。與文獻[9]報道的血清sCD14-st水平是急性胰腺炎預后的影響因素一致。本研究發現,當血清sCD14-st最佳截斷值為3.6 ng/mL時預測急性胰腺炎預后不良的靈敏度為80.0%,特異度為78.6%,AUC為0.838,說明血清sCD14-st水平檢測對急性胰腺炎預后不良具有較高的診斷價值。

本研究結果顯示,急性胰腺炎組患者血清CD163水平高于健康對照組,并且隨著急性胰腺炎嚴重程度升高而升高,說明血清CD163水平是急性胰腺炎嚴重程度的指標。現已知CD163是巨噬細胞活化的標記物,是一種跨膜蛋白,參與了血紅蛋白的清除,屬于血紅蛋白-珠蛋白清道夫受體,在各種病理狀態下CD163發生裂解形成可溶性CD163(sCD163)釋放入血[12]。現有研究證實,巨噬細胞在急性胰腺炎的病理生理過程中具有至關重要的作用[13]。sCD163從巨噬細胞中特異性釋放,炎癥性疾病患者sCD163水平升高。急性胰腺炎患者血清sCD163水平較對照組高出3倍,表明急性胰腺炎患者血清 sCD163增加與機體巨噬細胞活化有關[14]。本研究發現,急性胰腺炎組患者中預后不良患者血清CD163水平高于預后良好患者,并且發現血清CD163水平是急性胰腺炎患者預后不良的獨立影響因素,說明血清CD163是急性胰腺炎預后的指標。本研究發現,血清CD163最佳截斷值為713.86 ng/mL時預測急性胰腺預后不良的靈敏度為92.0%,特異度為61.2%,AUC為0.815,說明其對急性胰腺炎預后不良具有較高的診斷效能。

本研究結果顯示,急性胰腺炎組患者血清GRP78水平高于健康對照組,并且急性胰腺炎越嚴重血清GRP78水平越高,說明血清GRP78是急性胰腺炎嚴重程度的指標。GRP78在內質網應激中被激活,對蛋白折疊并將蛋白運輸,發揮內質網應激的監控作用[15]。GRP78是一種內質網上的應激蛋白,其大量表達可維持細胞內的內質網穩定性,具有明顯抗凋亡作用[16],其表達水平升高對內質網的穩定具有重要作用,可減少中性粒細胞等炎癥細胞的凋亡,從而維持機體的內環境穩定,類似炎癥反應的保護性升高,其水平同樣也反映機體的炎癥反應嚴重程度[17]。本研究還發現,急性胰腺炎組患者中預后不良患者血清GRP78水平高于預后良好患者,并且血清GRP78水平是急性胰腺炎預后不良的獨立影響因素。本研究發現,血清GRP78最佳截斷值為434.30 ng/mL時預測急性胰腺炎預后不良的靈敏度為68.0%,特異度為75.5%,AUC為0.753,說明血清GRP78水平對急性胰腺炎預后不良具有較高的診斷效能。本研究發現,聯合sCD14-st、CD163、GRP78水平檢測對急性胰腺炎預后不良具有更高的診斷效能,聯合檢測的靈敏度為88.0%,特異度為92.9%,AUC為0.947。3項指標聯合檢測的靈敏度、特異度、AUC均高于單項指標,差異均有統計學意義(P<0.05),說明3項指標聯合檢測能明顯提高對急性胰腺炎患者不良預后的診斷效能,說明3項指標之間具有一定的互補性,其具體內在機制尚需要進一步研究。

總之,血清sCD14-st、CD163和GRP78水平是急性胰腺炎嚴重程度的指標,是發生預后不良的獨立影響因素,3項指標聯合檢測有助于提高對急性胰腺炎預后不良的診斷效能。