脂肪間充質干細胞與甲潑尼龍聯合用藥對小型豬異體皮膚移植的影響

焦廣明,呂英光,桑金芳,寇志鵬,劉 濤,王 月,陸翔宇,樸晨曦,馬亞軍,張建濤,王洪斌*

(1.東北農業大學動物醫學學院,哈爾濱 150030;2.黑龍江省動物疾病致病機制與比較醫學重點實驗室,哈爾濱 150030)

同種異體皮膚移植是指同種之間的不同個體間進行皮膚移植手術,一般廣泛應用于自體皮膚發生大面積缺損,如燒傷或者創傷等,無法滿足自體移植的情況[1]。但在移植之后,會產生非常嚴重的免疫排斥反應[2]。這種并發癥可以在短時間內大量表達IL-2、IFN-γ等炎性因子破壞移植皮片,促使移植皮片壞死[3]。為抑制免疫排斥反應,目前臨床上常用的方式是使用免疫抑制劑。有研究表明,單獨使用雷帕霉素抑制劑或糖皮質激素等藥物均具有良好的抑制免疫排斥的效果[4],但也可能會造成延長炎癥期,抑制血管遷移,肉芽組織再生等傷口愈合不良的副作用[5]。因此為降低藥物副作用,免疫抑制劑聯合用藥的方法被廣泛應用于抗排斥反應的治療中。MP是聯合用藥中較為常用的藥物[6],因其具有良好的抗排異效果在組織器官移植上廣泛應用,所以本試驗采用MP作為聯合用藥的藥物之一。

間充質干細胞(MSCs)是近年來細胞療法的主要應用細胞之一,其主要分布于脂肪、骨髓、胎盤、牙髓等組織部位[7]。其中ADSCs以取材方便,無倫理性,免疫原性低,治療效果好等優勢被廣泛應用于各種疾病的研究中[8],并已經取得了很好的效果。因其具有抑制免疫排斥反應[9]、炎癥反應、組織纖維化[10]、氧化應激,并促進細胞再生等優勢,在皮膚損傷相關的研究中得到了很大關注[11-12]。因此本試驗采取ADSCs與MP聯合用藥。

有研究表明,巴馬小型豬皮膚厚度、分層、光鏡結構、超微結構、以及一些特殊結構都與人相似[13]。并且在豬、人、兔等皮膚損傷時應用IL-1α后,小型豬與人的皮膚創口的愈合速度顯著提高,這說明豬與人的皮膚損傷主要是通過創面上皮化來修復。而兔是通過創口收縮的方式愈合[14]。所以小型豬作為動物模型可以更準確地 模擬出ADSCs+MP對人異體皮膚移植的影響。

本試驗通過比較ASG、MP、ADSCs、ADSCs+MP對小型豬異體皮膚移植所產生的免疫排斥反應與創口愈合方面的影響。旨在研究ADSCs+MP在抗排異與促進創口愈合方面的應用前景,并為ADSCs+MP對異體皮膚移植臨床應用奠定理論基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

本試驗經東北農業大學動物倫理委員會監督,選取1歲齡廣西巴馬小型豬12頭(30～40 kg,雌雄各半)。經臨床與實驗室健康檢查后進行試驗。在整個試驗過程中,飼養管理條件保持一致。

1.2 儀器設備及試劑

獸用便攜式多參數監護儀(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司),動物呼吸麻醉機(美國SurgiVet公司),EPOCH連續波長酶標儀(美國BIOTEK基因有限公司),組織研磨儀(上海凈信實業發展有限公司)。

丙泊酚乳狀注射液(西安力邦制藥有限公司),異氟烷(河北一品制藥有限公司生產),DMEM低糖培養基(美國Invitrogen有限公司),胎牛血清(美國Clark公司),反轉錄試劑盒(TaKaKa生物技術有 限公司),熒光定量PCR染料(湖南Innovagene科技有限公司),IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IL-2、IL-1β、IFN-γ、皮質醇、CXCR4、SDF-1(上海酶聯生物科技有限公司),SOD、GSH(南京建成生物工程研究所)。免疫印跡中使用的一抗:PI3K(abclonal,A16950,1∶1 000)、AKT(abclonal,WH133854,1∶1 000)、P-AKT(Wanleibio,WLP001a,1∶1 000)、11β-HSD1(abclonal,WH298017,1∶1 000)、11β-HSD2(Proteintech,14192-1-aP,1∶1 000)、NF-κB(Wanleibio,WL01980,1∶500)、P-NF-κB(Wanleibio,WL02169,1∶1 000)、VEGF(abclonal,WH306346,1∶1 000)、TGF-β(abclonal,A2124,1∶1 000);二抗:山羊兔抗(Proteintech,SA00001-2,1∶10 000)。

1.3 試驗方法

1.3.1 動物分組 將12頭小型豬隨機分為4組:異體皮膚移植(ASG)組,甲潑尼龍(MP)組,脂肪間充質干細胞(ADSCs)組,脂肪間充質干細胞與甲潑尼龍聯合用藥(ADSCs+MP)組。

1.3.2 動物試驗 試驗采用同種異體皮膚移植手術,每次需要兩頭小型豬同時開展手術。將兩頭小型豬同時麻醉后,分別在背部造8個4 cm×4 cm的創口,創口間距5 cm。并且將取下來的皮膚修整,保留表皮與真皮層,將兩頭豬的皮片順次交換移植到異體皮膚上,采取結節縫合(圖1),待異體皮膚移植結束后,用紗布固定,每日護理換紗布,并在7 d時拆除縫合線。其中ASG組:術后不用藥干預,MP組:在術后頸部肌肉注射甲潑尼龍,注射劑量為5 mg·kg-1,連續注射7 d。ADSCs組:術后即刻在每個皮片下面進行皮下注射ADSCs。每個皮片的注射劑量為5×104·cm-2。ADSCs+MP組:術后即可在每個移植皮片皮下注射5×104·cm-2ADSCs,在頸部肌肉注射甲潑尼龍5 mg·kg-1連續7 d。所有組的豬均在術前與術后7、14 d采集血液和組織樣本,術后即刻、7、14、21 d拍照記錄移植表皮臨床變化情況。

圖1 手術模式圖與術后即刻圖片

1.3.3 小型豬脂肪間充質干細胞的分離與培養 采用手術的方式取出小型豬兩側腹股溝皮下脂肪,去除筋膜與血管,并放入0.1%I型膠原酶中37 ℃消化55 min,消化結束后,1 500 r·min-1離心10 min,去除上清液,加入完全培養基。重懸后200目濾網過濾,再次1 500 r·min-1離心10 min,去掉上清液。加入5 mL紅細胞裂解液1 500 r·min-1離心5 min,去掉上清液。加入完全培養基、接培養瓶并放入5% CO2、37 ℃培養箱中培養。待培養瓶中細胞融合70%～80%時傳代,傳到3～5代時收集脂肪間充質干細胞,備用。

1.4 指標檢測

1.4.1 血常規及血清生化檢測 本研究采用五分類血常規WBC、NEU、LYM按照血常規儀器說明書步驟進行操作。GLB按照試劑盒說明書進行操作。

1.4.2 炎癥相關因子和愈合相關因子檢測 炎癥相關因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ與愈合相關因子皮質醇、CXCR4、SDF-1均按照ELISA試劑盒(酶聯,上海)說明書的步驟操作。

1.4.3 氧化應激指標 GSH與SOD,均按照相應試劑盒說明書進行操作。

1.4.4 蛋白提取與免疫印跡 取全層皮膚組織研磨碎,放入RIPA(invent in-wb001)、PMSF(碧云天st506-2)等冰上孵育30 min,離心取上清,BCA(碧云天)測蛋白濃度,調平蛋白濃度加上樣緩沖液,煮沸10 min,-80 ℃保存。取出蛋白上清,加到已經配好的膠中開始電泳。電泳結束后開始切膠,轉模,封閉,敷抗體、洗膜、敷二抗、洗膜、曝光。

1.4.5 總RNA的提取與實時熒光定量PCR 總RNA采用TRzoL試劑(Invitrogen,15596-026) 分離,使用染料(Vazume,Q711-02),研究使用引物序列詳見表1。

表1 qRT-PCR引物序列

1.4.6 組織學分析和免疫組化染色 將取樣皮膚放入4%多聚甲醛固定,待固定后石蠟包埋,用蘇木精伊紅染色。在免疫組化方面,用石蠟切片染色,檸檬酸鈉修復液、亞沸騰修復,2%的山羊血清室溫封閉1 h,10%山羊血清稀釋一抗CD4+(Proteintech,67786-1-Ig,1∶1 000)。

1.5 數據統計分析

2 結 果

2.1 異體皮膚移植皮片表觀檢查

圖2顯示,ASG組的移植皮片7 d時可見大量表皮脫落并形成白色苔蘚樣病變,移植皮片紅腫,皮片觸感較硬。14 d時移植皮片顏色變黑,皮片觸感堅硬,切開皮片時可見真皮與表皮全層全部變黑。MP組的移植皮片在7 d時,質地較軟,顏色潮紅。14 d時MP組出現皮片顏色大面積變黑,質地較硬,切開皮片發現其表皮與部分真皮顏色變黑。ADSCs組的移植皮片在7 d時可見皮片少部分顏色變紅,質地較軟。14 d時可見皮片周圍變黑,質地較軟,切開皮片可見少部分表皮真皮變黑。ADSCs+MP的移植皮片在7 d時可見皮片上有點狀潮紅,無黑色壞死灶,質地柔軟,切開皮片。14 d時可見皮片顏色部分變黑,質地較軟,切開皮片可見表皮真皮部分變黑。21 d可見ASG組移植皮片部分脫落,創口中肉芽組織并未填充完全。MP組、ADSCs組、ADSCs+MP組皮片均完全變黑,質地堅硬。

圖2 移植皮片表觀變化

2.2 移植皮片病理學分析

圖3顯示,7 d時ASG組可見其表皮脫落,表皮層與真皮層分離,真皮層出現大量空泡。14 d時皮膚結構不可辨認,成均質纖維化。7 d時MP組皮片角質層增厚,有少量炎性細胞。14 d時可見表皮角質層脫落,真皮中大量膠原纖維崩解并且由于壞死出現大面積空洞。7 d時ADSCs組與ADSCs+MP組有少量炎性細胞浸潤,14 d時可見ADSCs組與表皮角質層增厚,有炎性細胞浸潤,ADSCs+MP組有少量炎性細胞浸潤。

圖3 皮膚組織病理變化

2.3 血常規以及血清球蛋白檢測

圖4可知,在7 d時WBC結果表明,ADSCs組相比于ASG組顯著下降(P<0.05),其他組無顯著性差異。14 d時ADSCs+MP組較ASG組顯著下降(P<0.05),其他組無顯著性差異。7 d時NEU結果顯示,MP組相較于ASG組顯著上升(P<0.05)。在14 d時ADSCs組與ADSCs+MP組相較于ASG組均極顯著降低(P<0.01)。LYM在7、14 d各組之間無顯著性差異。GLB在7 d時MP組、ADSCs組、ADSCs+MP組相較于ASG組均極顯著降低(P<0.01)。在14 d時MP組相較于ASG組顯著下降(P<0.05),其他組無顯著性差異。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01

2.4 氧化應激反應檢測

圖5顯示,在7、14 d時,ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的GSH表達量極顯著高于ASG組與MP組。14 d時,ADSCs+MP組(P<0.05)的GSH的表達量顯著高于ADSCs組。在7 d時,ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的SOD表達量極顯著高于ASG組與MP組。MP組(P<0.05)的表達量顯著高于ASG組。14 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的SOD表達量極顯著高于ASG組。ADSCs+MP組(P<0.01)的SOD表達量極顯著高于MP組。MP組與ASG組無顯著性差異。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01;與MP組相比,##.P<0.01;與ADSCs組相比,+.P<0.05

2.5 CD4+T細胞免疫組化結果

圖6顯示,7 d時可見ADSCs組(P<0.05)與ADSCs+MP組(P<0.05)的CD4+T細胞的數量顯著低于ASG組。MP組(P<0.01)CD4+T細胞數量極顯著低于ASG組。ADSCs組與ADSCs+MP組無顯著性差異。在14 d時可見MP組(P<0.05)、ADSCs組(P<0.05)、ADSCs+MP組(P<0.05)的CD4+T細胞數量顯著低于ASG組,ADSCs+MP組(P<0.05)顯著低于MP組。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01;與MP組相比,#.P<0.05

2.6 炎癥因子表達量檢測

圖7顯示,在7 d時IL-1β在ASG組的表達量均極顯著高于MP組(P<0.01)、ADSCs組(P<0.01)、ADSCs+MP組(P<0.01)。在14 d時,IL-1β在ASG組的表達量顯著高于MP組(P<0.05)、ADSCs組(P<0.05)、ADSCs+MP組(P<0.05)。MP、ADSCs、ADSCs+MP之間沒有顯著性差異。IL-6的表達量在7 d時ASG組顯著高于MP組(P<0.05)、ADSCs+MP組(P<0.05),極顯著高于ADSCs組(P<0.01)。在14 d時,IL-6 ASG組的表達量極顯著高于MP組(P<0.01)、ADSCs組(P<0.01)、ADSCs+MP組(P<0.01)。MP、ADSCs、ADSCs+MP之間沒有顯著性差異。TNF-α的表達量7 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)相對于ASG組極顯著下降,MP組相對于ASG組無顯著性差異。14 d時4組無顯著性差異。IL-2的表達量在7、14 d時相對于ASG組,ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)極顯著降低,MP組相對于ASG組無顯著性差異。IFN-γ的表達量在7、14 d時相對于ASG組,MP組(P<0.01)、ADSCs組(P<0.01)、ADSCs+MP組(P<0.01)極顯著下降。在7、14 d時,IL-4的表達量ADSCs+MP組(P<0.01)相對于ASG組極顯著升高。ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)IL-10的表達量相對于ASG組,ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)在7、14 d時極顯著上升。MP組相對于ASG組無顯著性差異。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01

2.7 炎癥因子上游蛋白NF-κB的表達量檢測

圖8顯示,在7、14 d時NF-κB的蛋白結果表明。ASG組P-NFκB的表達量顯著大于ADSCs組、ADSCs+MP組。在7 d時MP組(P<0.05)、ADSCs組(P<0.05)、ADSCs+MP組(P<0.05)的NF-κB基因表達量顯著低于ASG組,MP組、ADSCs組、ADSCs+MP組之間無顯著性差異。14 d時,ADSCs組(P<0.05)與ADSCs+MP組(P<0.05)的NF-κB基因表達量顯著低于ASG組,MP組與ASG組無顯著性差異。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01

2.8 創口愈合因子檢測

圖9表明,7 d時MP組TGF-β的表達量顯著低于ADSCs與ADSCs+MP組。但14 d時MP組與ADSCs組、ADSCs+MP組并未有顯著性差異。VEGF在7、14 d時ADSCs組、ADSCs+MP組的表達量顯著高于MP組。CXCR4在7 d的ADSCs組(P<0.01)、ADSCs+MP組(P<0.01)、MP組(P<0.01)的表達量極顯著高于ASG組,ADSCs組(P<0.05)顯著高于MP組,ADSCs+MP組(P<0.01)極顯著高于MP組,ADSCs+MP組(P<0.05)顯著高于ADSCs組。CXCR4在14 d的ADSCs組(P<0.01)、ADSCs+MP組(P<0.01)的表達量極顯著高于ASG組。MP組(P<0.05)的表達量顯著高于ASG組。SDF1在7、14 d時,ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)SDF1的表達量極顯著高于MP組,ADSCs組(P<0.01)極顯著高于ASG組。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01;與MP組相比,#.P<0.05,##.P<0.01;與ADSCs組相比,+.P<0.05

2.9 創口生長因子上游通路檢測

圖10表明,在7、14 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)皮質醇(cortisol)的表達量極顯著低于ASG組與MP組。在14 d時,ADSCs+MP組(P<0.05)顯著高于ADSCs組。14 d時免疫印跡結果表明,在7、14 d時ADSCs組與ADSCs+MP組的11β-HSD1顯著小于MP組,并且其11β-HSD2的表達量顯著大于MP組。P-AKT的表達中MP組顯著大于ADSCs組與ADSCs+MP組。在7、14 d時MP組PI3K的表達顯著高于ADSCs組與ADSCs+MP組。從基因表達量上分析:11β-HSD1在7 d時ADSCs組(P<0.01)的表達量極顯著低于MP組,ADSCs+MP組(P<0.05)顯著低于MP組。14 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的表達量極顯著低于MP組。11β-HSD2在7 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的表達量極顯著高于MP組,MP組(P<0.01)與ADSCs組(P<0.01)極顯著低于ASG組,ADSCs+MP組(P<0.05)顯著低于ASG組,ADSCs+MP組(P<0.01)極顯著低于ADSCs組。14 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的表達量極顯著高于ASG組與MP組。7 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的AKT的表達量極顯著低于MP組。14 d時,ADSCs組AKT的表達量極顯著(P<0.01)低于ASG組,顯著(P<0.05)低于MP組。ADSCs+MP組(P<0.05)AKT的表達量顯著低于ASG組。7 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)PI3K的表達量極顯著低于MP組,ADSCs+MP組(P<0.05)的表達量顯著低于ADSCs組。14 d時ADSCs組(P<0.01)與ADSCs+MP組(P<0.01)的表達量極顯著低于ASG組與MP組。

與ASG組相比,*.P<0.05,**.P<0.01;與MP組相比,#.P<0.05,##.P<0.01;與ADSCs組相比,+.P<0.05,++.P<0.01

3 討 論

對于異體皮膚移植,移植皮片排斥反應評估主要是依據kanitakis與banff 2007分級[15]。其中kanitakis分級主要是依據皮膚表觀變化。banff 2007分級主要依據病理學變化,如:炎癥浸潤、角質層細胞狀態等進行病理分級(表2、3)。從皮膚表觀上分析,7 d時ASG組在Ⅲ～Ⅳ級,MP組在Ⅱ～Ⅲ級,ADSCs組與ADSCs+MP組在Ⅰ～Ⅱ級。14 d時ASG組與MP組為IV級,ADSCs組皮片黑色壞死部分在1/3～2/3,為Ⅲ～Ⅳ級、ADSCs+MP組在Ⅱ～Ⅲ級。21 d時4組皮片均為IV級。表明在21 d時4組皮片均已壞死。從病理學分析可見,在7 d時ASG組為Ⅲ～Ⅳ級,MP組在Ⅱ～Ⅲ級,ADSCs組與ADSCs+MP組為Ⅱ～Ⅲ級。14 d時ASG組與MP組為IV級,ADSCs組為Ⅲ～Ⅳ級,ADSCs+MP組為Ⅱ～Ⅲ級。綜合兩種分析評級方式可見在ASG組皮片存活時間為7 d左右,而MP組存活時間為7～14 d,ADSCs組與ADSCs+MP組存活時間則為14～21 d。這說明ADSCs+MP可以有效延長皮片存活時間。

表3 病理學分析移植皮片排斥分級

異體皮膚移植后,由于HLA的不完全匹配可能會導致移植物中的T淋巴細胞進入到受體體內,對受體造成全身性的炎癥反應。本研究對受體小型豬血液進行血常規與血清生化進行檢測。結果表明,應用ADSCs組與ADSCs+MP組可以顯著減少血液中中性粒細胞與球蛋白的含量。說明ADSCs+MP抑制由異體皮膚移植引發的全身性炎性反應。

研究表明,導致異體移植皮片壞死的主要原因是供受體之間的免疫排斥反應。在異體皮膚移植7 d時,移植皮片會與創口間組織粘連,并在創底與移植皮片之間會有相應的肉芽組織再生與血管重建。但當血供建立完成后,異體皮片中的樹突細胞會隨著血管進入到受體的次級淋巴結中,此時經抗原呈遞細胞的識別后會刺激CD4+與CD8+的大量分泌[16],并會大量分化TH1進而促進IL-2與IFN-γ等炎性因子的分泌[17-18]。導致7～14 d時在創底與異體移植皮片交界處產生大量炎癥反應并導致移植皮片壞死。結果表明,ADSCs+MP可以有效抑制CD4+T細胞。并且通過抑制炎癥因子上游蛋白NF-κB來抑制炎癥因子IL-2與IFN-γ的表達,從而抑制免疫排斥反應。

在傷口愈合炎癥期時,巨噬細胞根據愈合過程的階段表達不同的表型和活動。促炎巨噬細胞在早期被招募到傷口區域。它們表達TNF-α、IL1β、IL-6等促炎因子以殺死病原體,在抗炎反應后期時抗炎巨噬細胞會被召集到創口處抑制炎癥的發展,并促進肉芽組織填充。但甲潑尼龍大量使用時,會顯著延長傷口的炎癥期,并抑制血管的重建與肉芽組織的再生。從而導致傷口愈合緩慢[19-20]。本研究表明,相對于MP組,ADSCs+MP可以顯著促進抗炎巨噬細胞分泌IL-10、IL-4,并且抑制促炎巨噬細胞分泌IL-6、IL-1β、TNF-α。使創傷快速渡過炎癥反應期,達到促進創口組織再生的目的。

VEGF可以激活內皮細胞增殖、遷移和形成芽。此外,VEGF還參與了血管形成、傷口愈合和器官再生[21]。但糖皮質激素會通過抑制VEGF達到抑制血管再生的目的[22]。本研究結果表明,相對于MP組,ADSCs+MP組可以顯著提高VEGF、SDF-1、CXCR4的表達。這證明ADSCs具有逆轉糖皮質激素抑制血管生成和遷移的作用。除此之外,TGF-β具有抑制CD4+T細胞、抑制IL-2等炎性因子表達并增強肉芽組織再生等的功能[23-24],本試驗結果表明甲潑尼龍可以抑制TGF-β的表達,但在ADSCs+MP中可顯著促進TGF-β的表達。說明ADSCs+MP可通過促進VEGF、TGF-β等生長因子的分泌來促進創口愈合。

在表皮真皮中存在11β-HSD1能將可的松轉化為皮質醇發揮出抗炎的作用[25]。而當皮膚皮質醇表達過量時會導致延長皮膚創口愈合炎癥反應期,抑制創口肉芽組織再生與血管重建[26-27]。當注射大量外源性糖皮質激素時,可以通過11β-HSD1的大量表達來促進皮質醇的升高[28],進而危害皮膚創口愈合。但這種升高可以被ADSCs所逆轉。這證明ADSCs可以通過抑制11β-HSD1、促進11β-HSD2的表達來抑制皮膚皮質醇的含量,進而促進皮膚愈合。研究表明,外源性給予糖皮質激素時會導致機體PI3K/AKT的水平升高[29],并且當PI3K被抑制時,11β-HSD1也會被抑制[30]。本試驗結果表明,ADSCs可以逆轉由甲潑尼龍引起的PI3K高表達。由此研究表明ADSCs有可能是通過PI3K/AKT通路來影響11β-HSD1的表達,進而達到抑制皮質醇表達的目的。

4 結 論

1)ADSCs+MP組相對于ASG組,有效延長皮片存活時間至14～21 d。并為以后更換組織工程皮等創造更有利的條件與時間。2)ADSCs+MP通過影響NF-κB的表達抑制IL-2、INF-γ等炎性因子的表達抑制免疫排斥反應。3)相較于ASG組,ADSCs+MP通過促進VEGF、TGF-β、SDF-1等愈合因子的表達,進而促進創口愈合。4)ADSCs可以通過PI3K/AKT通路影響11β-HSD1的表達,起到抑制皮脂醇增多的作用。