乙型肝炎血清學標志物與HBV-DNA定量及肝功能指標的相關性分析

陳希婧 曾志 鄒麗云

【摘要】? 目的? ? 分析乙肝血清學標志物與HBV-DNA定量、肝功能指標的相關性。方法? ? 以隨機整群抽樣法，于三明市中心血站2019年2月—2020年12月自愿無償獻血的乙型肝炎陽性志愿獻血者中抽取70例，分別測量血清學標志物（HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb）、乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）、肝功能[前白蛋白（PAB）、白蛋白（ALB）、丙氨酸轉氨酶（ALT）、總膽紅素（TBiL）、膽堿性酯酶（CHE）、γ谷氨酰轉肽酶（γ-GT）]，分析乙型肝炎血清學標志物與HBV-DNA定量及肝功能指標的相關性。結果? ? 70例患者HBsAg為（202.10±95.21）ng/mL，HBeAg為（0.48±0.04）NCU/mL，HBeAb為（7.95±1.12）NCU/mL，HBcAb為（129.63±28.32）NCU/mL，ALT為（436.32±96.63）U/L，ALB為（35.78±6.36）g/L，PAB為（153.64±45.32）mg/L，TBiL為（195.21±63.32）μmol/L，CHE為（8 398.85±2 152.32）U/L，γ-GT為（78.41±15.54）U/L。HBsAg、HBeAg與HBV-DNA呈正相關（r=0.313、0.554，P<0.05），HBeAb與HBV-DNA呈負相關（r=-0.485，P<0.05）；HBcAb與HBV-DNA無相關性（r=0.008，P>0.05）。HBeAg與TBIL呈正相關（r=0.354，P<0.05）；HBeAb與ALT呈負相關（r=-0.345，P<0.05）；HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb與PAB、ALB、CHE、γ-GT均無相關性（P>0.05）。結論? ? 乙型肝炎血清學標志物HBsAg、HBeAg可作為反映乙肝病毒復制的指標，可根據其含量判斷肝組織炎癥活動情況。

【關鍵詞】? 乙型肝炎；血清學標志物；HBV-DNA定量；肝功能；相關性

中圖分類號：R575.1? ? ? ? 文獻標識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）07-0094-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.07.031

乙肝患者癥狀多為食欲減退、上腹部不適、肝區痛等，部分患者還會伴有黃疸發熱、肝功能損害等，對生命安全造成極大威脅。在臨床工作中，診斷乙肝最常用的指標為乙型肝炎病毒（HBV）血清學標志物，常將乙型肝炎E抗原（HBeAg）作為反映患者抗病毒治療效果的一個監測指標。但報道顯示，血清學標志物HBeAg無法如實反映患者體內HBV的復制情況。而乙型肝炎病毒復制指標乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）可以最直接、最準確地判斷患者體內HBV復制活動。丙氨酸轉氨酶（ALT）可以有效反映患者肝內炎癥的活動程度，為臨床常用的肝細胞損傷診斷指標；總膽紅素（TBiL）主要包括直接膽紅素與間接膽紅素，為肝功能檢查中最基礎的一項；前白蛋白（PAB）主要由肝細胞合成，該指標對于肝損傷的敏感性很高；白蛋白（ALB）主要由肝臟合成，是反映肝功能非常重要的指標之一；膽堿酯酶（CHE）主要在肝臟內部進行合成、代謝，是檢測患者肝功能是否正常的重要指標；γ谷氨酰轉肽酶（γ-GT）主要由肝細胞分泌，若該指標升高則提示患者出現了肝功能損害。目前，臨床關于乙型肝炎血清學標志物與HBV-DNA定量及肝功能相關性分析較少，且探討并不深入[1]。本文為進一步探討血清學標志物與HBV-DNA定量、肝功能指標之間的相關性，于自愿無償獻血的乙型肝炎陽性志愿獻血者中抽取70例展開分析，報道如下。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 以隨機整群抽樣法，于三明市中心血站2019年2月—2020年12月自愿無償獻血的乙型肝炎陽性志愿獻血者中抽取70例，男38例、女32例，年齡29～66歲，平均年齡（47.50±3.12）歲。診斷標準：符合《中國肝移植乙型肝炎防治指南（2016版）》中乙型肝炎診斷標準[2]。排除標準：合并心腦血管疾病者；具有精神類疾病者；合并感染性疾病；臨床資料不全者。

1.2? ? 方法

1.2.1? ? 血清學標志物檢測方法? ? 抽取5 mL空腹靜脈血行離心處理，分離血清后加樣100 μL，于室溫下孵育，于振蕩器上緩慢震動1 h，之后進行4次洗板，將100 μL銪標記物加入樣本，再次進行孵育，于室溫下放置于振蕩器上緩慢振動，持續1 h，之后進行6次洗板，再加入100 μL增強液，快速振動5 min，以待檢測。應用時間分辨免疫熒光測定儀（型號：Anytest 2000型）對HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb進行測量。

1.2.2? ? HBV-DNA檢測方法? ? 選擇HBV熒光定量PCR診斷試劑盒、自動熒光PCR儀（山東高芯生物傳感器研究院有限公司，型號：PE5700），以實時熒光定量聚合酶鏈反應法對HBV-DNA進行檢測。

1.2.3? ? 肝功能指標檢測方法? ? 采用全自動生化分析儀（山東益瑞康醫療設備有限公司，型號7600型）對PAB、ALB、ALT、TBiL、CHE、γ-GT等肝功能指標進行檢測。

1.3? ? 觀察指標? ? 記錄乙型肝炎的血清學標志物、肝功能指標（PAB、ALB、ALT、TBIL、CHE、γ-GT）檢測結果，分析血清學標志物與肝功能、HBV-DNA定量相關性。HBsAg>0.5 ng/mL為陽性；HBeAg>0.03 NCU/mL為陽性；HBeAb>1.5 NCU/mL為陽性；HBcAb>0.1 NCU/mL為陽性。PAB正常值范圍：250～400 mg/L；ALT正常值范圍：<40U/L；ALB正常值范圍：35～55 g/L；TBiL正常值范圍：<17.1 μmol/L。

1.4? ? 統計學方法? ? 使用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，相關性檢驗應用Spearman相關分析，P<0.05為差異具有統計學意義。

2? ? 結果

2.1? ? 血清學標志物、肝功能指標檢測結果? ? 70例患者HBsAg為（202.10±95.21）ng/mL，HBeAg為（0.48±0.04）NCU/mL，HBeAb為（7.95±1.12）NCU/mL，HBcAb為（129.63±28.32）NCU/mL，ALT為（436.32±96.63）U/L，ALB為（35.78±6.36）g/L，PAB為（153.64±45.32）mg/L，TBiL為（195.21±63.32）μmol/L，CHE為（8 398.85±2 152.32）U/L，γ-GT為（78.41±15.54）U/L。

2.2? ? 血清學標志物與HBV-DNA定量的相關性分析? ? HBsAg、HBeAg與HBV-DNA呈正相關（P<0.05）；HBeAb與HBV-DNA呈負相關（P<0.05）；HBcAb與HBV-DNA無相關性（P>0.05），見表1。

2.3? ? 血清學標志物與肝功能的相關性分析? ? HBeAg與TBiL呈正相關（P<0.05）；HBeAb與ALT呈負相關（P<0.05）；HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb與PAB、ALB、CHE、γ-GT均無相關性（P>0.05），見表2。

3? ? 討論

乙型肝炎主要是由乙型肝炎病毒引起的以肝臟病變為主的一種傳染病，在臨床上十分常見，患者以食欲減退、上腹部不適、惡心、肝區痛等為主要表現，部分患者還可伴有黃疸發熱、肝大伴有肝功能損害，少數可發展為肝癌，病死率較高。對于乙肝血清標志物，既往臨床多用定性酶鏈免疫吸附試驗，操作較為簡單、價格相對低廉，具有較高的敏感性與特異性，還可根據患者HBeAg檢測陰性、陽性結果判斷病毒復制情況，具有顯著的臨床指導價值[3-4]。但有研究指出，部分HBeAg陽性患者，其病毒復制程度比較低，而HBeAg陰性患者的病毒復制程度反而更高，僅以HBeAg檢測結果進行判定極易出現假陰性[5-6]。

HBV引起的肝細胞損傷，主要是由于針對HBV特異性抗原的免疫反應導致，因此，HBV感染后的臨床結果與患者機體不同的免疫功能狀況具有緊密關系[7-8]。報道顯示，肝臟組織炎癥活動較強時，機體內HBV-DNA載量會明顯升高，HBV病毒活躍復制，極可能是導致肝臟組織炎癥反應的重要因素之一[9]。因此，監測病毒復制指標對于判斷病情嚴重程度具有十分重要的作用。 PAB、ALB、ALT、TBiL、CHE、γ-GT是目前乙型肝炎診斷的常用輔助指標，可在一定程度上反映肝臟內的炎癥程度，隨著機體內HBV-DNA載量不斷增加，患者PAB、ALB、ALT、TBiL、CHE、γ-GT等肝功能指標會發生明顯變化。血清HBV-DNA水平表面雖可反映肝臟的炎癥程度，但與肝臟損傷、預后情況并無明顯的相關性。因此，單純監測血清HBV-DNA水平具有一定局限性。對于乙肝患者，不僅需對其機體內乙肝病毒的復制情況進行監測，還需同時觀察肝功能，提高評估及診斷準確率[10-11]。

本研究發現，HBsAg、HBeAg與HBV-DNA呈正相關，隨HBsAg、HBeAg含量的不斷增高，HBV-DNA定量相應升高，可得出，HBsAg含量與HBV在患者體內的復制情況有一定關系。經相關性分析發現，HBeAg與TBiL呈正相關（P<0.05）；HBeAb與ALT呈負相關（P<0.05）；HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb血清學標志物與PAB、ALB、CHE、γ-GT均無相關性（P>0.05）。進一步表明，隨著HBeAb的不斷增加ALT會相應下降，且HBeAg不斷減少，其TBiL會隨之不斷下降，血清學標志物與患者肝功能具有密切關系，可作為臨床評估乙肝患者病情嚴重程度的有效指標。研究顯示，患者隨著病情的不斷加重，其血清標志物多以抗HBe、HBsAg陽性模式為主，提示患者肝功能損害程度較為嚴重[12]。可能是因為，HBV患者前C區出現突變，且突變株的存在會進一步導致肝細胞內HBcAg的表達增強，從而極易成為宿主細胞毒性T淋巴細胞的攻擊靶點，最終會導致HBV感染由靜止狀態不斷進展至活動狀態。本研究還發現，血清學標志物與PAB、ALB、CHE、γ-GT無相關性，提示并不能完全以患者血清標志物定量對其肝功能的損害程度進行判斷。

綜上所述，血清學標志物、HBV-DNA含量可較好地反映HBV感染者病情發展程度，但并不能完全以其判斷肝功能損害情況，臨床進行穿刺檢查具有必要性。

參考文獻

[1]? ? 楊傳信.PreS1抗原和HBV血清學標志物與HBV DNA的相關性及臨床意義[J].臨床輸血與檢驗，2019，21（1）：53-55.

[2]? ? 中華醫學會器官移植學分會，中華醫學會肝病學分會.中國肝移植乙型肝炎防治指南（2016版）[J].臨床肝膽病雜志，2017，33（2）：213-220.

[3]? ? 鄒卓林，謝新生.HBV-DNA定量與乙肝血清標志物聯合檢測在乙肝中的應用價值分析[J].中國地方病防治雜志，2019，34（6）：696-697.

[4]? ? 李艷芳，楊雪梅，羅萍，等.乙型病毒性肝炎患者血清HBV-LP與HBV-DNA水平表達的相關性及臨床意義[J].現代生物醫學進展，2020，20（2）：353-356，369.

[5]? ? 蔡興龍.乙肝患者血清HBeAg與HBV-DNA定量的相關性分析[J].河北醫學，2019，25（5）：820-823.

[6]? ? 張玲，鄭榮，何三軍，等.慢性乙型肝炎患者HBV-DNA載量，肝功能指標與免疫學標志物的相關性研究[J].檢驗醫學與臨床，2020，17（22）：122-124.

[7]? ? 蔣貝，劉暢，蘇瑞，等.血清HBV RNA在HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者中的檢測價值[J].中華肝臟病雜志，2019，27（9）：668-672.

[8]? ? 耿輝，魏雁虹，楊廣民.慢性乙型肝炎患者血清α1微球蛋白水平與HBV-DNA載量的相關性研究[J].檢驗醫學與臨床，2020，17（7）：873-875.

[9]? ? 李春艷，陳延平，徐光華，等.慢性乙型肝炎患者肝組織乙型肝炎病毒cccDNA和血清病毒學標志物相關性的研究[J].肝臟，2017，22（5）：442-444.

[10]? ? 吳洪秋，張永良，黃堅堯，等.乙肝血清學標志物定量和HBV DNA定量聯合檢測在乙肝病毒感染診斷中的應用[J].胃腸病學和肝病學雜志，2016，25（4）：415-418.

[11]? ? 趙棉，張力，趙亞妮. HBV DNA定量與乙肝血清學標志物定量聯合檢測乙肝病毒感染的效果分析[J].實用臨床醫藥雜志，2018，22（15）：37-40.

[12]? IVANA CAREY，JEFFREY GERSCH，BO WANG，et al.Pregenomic HBV RNA and Hepatitis B Core-Related Antigen Predict Outcomes in Hepatitis B e Antigen-Negative Chronic Hepatitis B Patients Suppressed on Nucleos（T）ide Analogue Therapy[J].Hepatology，2020，72（1）：42-57.

（收稿日期：2022-12-13）