乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測對診斷乙型肝炎的臨床價值研究

張秋燕

【摘要】? 目的? ? 探討乙型肝炎血清標(biāo)志物與乙型肝炎病毒基因（HBV-DNA）定量檢測對診斷乙型肝炎的臨床價值。方法? ? 選取疑似乙型肝炎患者160例，均接受乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測，分析其對乙型肝炎的診斷效果。結(jié)果? ? 本組患者HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性82例，HBsAg、HBcAb與HBeAb均為陽性60例，其他異常結(jié)果18例；82例HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性的患者HBV-DNA陽性率最高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HBV-DNA陽性患者中HBeAg陽性率高于HBsAg陽性率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論? ? 乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測對乙型肝炎均具有較高的診斷價值。

【關(guān)鍵詞】? 乙型肝炎；血清標(biāo)志物；陽性肝炎病毒基因；定量檢測；診斷

中圖分類號：R446.11+1? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）08-0065-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.08.022

乙型肝炎屬于常見的傳染性疾病，患者可出現(xiàn)乏力、惡心、嘔吐等癥狀，若治療不及時或效果不佳，則會對其身心造成嚴(yán)重?fù)p傷，甚至可能發(fā)展為肝硬化或肝癌，對生命產(chǎn)生威脅[1]。隨著乙肝疫苗的普及，我國居民乙型肝炎病毒感染率明顯降低，但乙型肝炎發(fā)病率仍居全球前列，因此做好乙型肝炎診治工作，對于防控疾病，改善患者預(yù)后具有積極作用。目前臨床上在對乙型肝炎進(jìn)行診斷時，乙型肝炎血清標(biāo)志物與乙型肝炎病毒基因（HBV-DNA）定量檢測均屬于常用方法，乙型肝炎血清標(biāo)志物是對機(jī)體HBV感染以及免疫應(yīng)答反應(yīng)予以反映的重要指標(biāo)，其在臨床上的應(yīng)用已經(jīng)十分成熟。當(dāng)HBV對機(jī)體造成感染后，會導(dǎo)致肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)，若未能得到及時治療可能造成多器官損傷。HBV感染評估應(yīng)用的血清標(biāo)志物主要為HBsAg，若血清HBsAg呈現(xiàn)為陽性，則表明機(jī)體受到HBV感染。HBeAb是對機(jī)體是否出現(xiàn)HBsAg刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答的標(biāo)志物，可對HBV感染后病毒復(fù)制處在相對靜止的狀態(tài)予以反映，若HBeAb為陽性，則表明患者的病情暫時未出現(xiàn)進(jìn)一步的發(fā)展；HBeAg是HBV感染的主要標(biāo)志物[2]。HBV病毒具備部分雙鏈DNA，在DNA片段上記載有遺傳信息，可通過DNA片段來實現(xiàn)病毒復(fù)制和增殖。HBV-DNA屬于裸露DNA，其并未被蛋白包裹，可對宿主產(chǎn)生單獨的侵襲，在進(jìn)入到宿主體內(nèi)可形成完整DNA顆粒。HBV-DNA可對乙型肝炎的傳染性與病毒復(fù)制量予以反映，在疾病治療中可起到有效的參考作用。目前對于乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測的具體應(yīng)用效果仍需開展進(jìn)一步研究[3]。本文選取疑似乙型肝炎患者160例，探討乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測對診斷乙型肝炎的臨床價值，報告如下。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 選取2019年3月—2020年6月莆田學(xué)院附屬醫(yī)院收治的疑似乙型肝炎患者160例，男105例，女55例，年齡32～72歲，平均年齡（45.26±5.32）歲。全部患者均對研究內(nèi)容知情同意，排除肝硬化、肝癌患者。

1.2? ? 研究方法? ? 同時采集受檢者空腹靜脈血兩份，3 500 r/min離心5 min備用。一份血液標(biāo)本采集后24 h內(nèi)用來檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物，采用雅培ARCHITECT i2000化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑（化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測技術(shù)）。陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：HBsAg水平達(dá)到0.05 IU/mL，HBeAg的S/CO達(dá)到1.0及以上，HBsAb水平達(dá)到10 mIU/mL，HBeAb的S/CO為1.0及以下，HBcAb的S/CO達(dá)到1.0及以上。另一份血液標(biāo)本離心冷藏3 d后用來檢測HBV-DNA，采用ABI 7500實時熒光定量PCR儀，試劑采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司的乙型肝炎核酸定量檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）。陰性判斷：HBV-DNA濃度低于500 cps/mL。

1.3? ? 觀察指標(biāo)? ? （1）不同乙型肝炎類型患者HBV-DNA陽性率，包括HBsAg、HBcAb與HBeAg陽性，HBsAg、HBcAb與HBeAb陽性，其他異常患者；（2）比較HBV-DNA結(jié)果與乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果。

1.4? ? 統(tǒng)計學(xué)方法? ? 采用SPSS 23.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2? ? 結(jié)果

2.1? ? 乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果? ? 本組患者接受乙型肝炎血清標(biāo)志物檢查后，HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性82例，HBsAg、HBcAb與HBeAb均為陽性60例，其他異常結(jié)果18例。

2.2? ? 不同乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果患者的HBV-DNA陽性率比較? ? 82例HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性的患者的HBV-DNA陽性率最高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.3? ? HBV-DNA結(jié)果與乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較? ? HBV-DNA陽性患者中HBeAg陽性率高于HBsAg陽性率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.802，P=0.016），見表2。

3? ? 討論

乙型肝炎病毒感染在世界范圍內(nèi)均具有較高的發(fā)病率，根據(jù)世界衛(wèi)生組織的報道，全球慢性乙型肝炎病毒感染患者數(shù)量大約為2.57億，其中非洲地區(qū)以及西太平洋地區(qū)患者數(shù)量占總數(shù)的68%左右[4]。全球每年由于慢性乙型肝炎病毒感染引發(fā)死亡的患者數(shù)量為88.7萬人左右，其中慢性乙型肝炎病毒感染所致肝硬化占52%，原發(fā)性肝細(xì)胞癌所占比例為37%[5]。亞洲慢性乙型肝炎病毒也存在地區(qū)性流行差異，大部分亞洲地區(qū)屬于中至高流行區(qū)，少部分亞洲地區(qū)屬于低流行區(qū)。乙型肝炎病毒可通過母嬰、血液以及性接觸傳播，隨著乙肝疫苗的普及推廣，我國居民乙型肝炎病毒感染率明顯降低，但乙型肝炎發(fā)病率仍居全球前列，因此做好乙型肝炎診治工作，對于防控疾病，改善患者預(yù)后具有積極作用[6]。慢性乙型肝炎屬于常見的傳染性疾病，患者可出現(xiàn)乏力、惡心、嘔吐等癥狀，若治療不及時或效果不佳，甚至可能發(fā)展為肝硬化或肝癌，對生命產(chǎn)生威脅。當(dāng)患者確診為慢性乙型肝炎后，需保障充足休息，并為患者提供合理營養(yǎng)，同時為其應(yīng)用藥物治療作為輔助。為改善疾病預(yù)后，需使患者的疾病得到盡早診斷。

乙型肝炎血清標(biāo)志物為診斷乙型肝炎感染的主要標(biāo)志物，是臨床上傳統(tǒng)檢測項目，但乙型肝炎血清標(biāo)志物無法對患者體內(nèi)病毒復(fù)制情況進(jìn)行反映，因此存在一定局限性。有研究報道，乙型肝炎診斷中HBV-DNA定量檢測具備較高的靈敏度，體內(nèi)血清中存在微量HBV即可被檢出，從而使疾病得到早期診斷[7]。通過開展聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢查，可使HBV-DNA水平得到特異性反映，具備比乙型肝炎血清標(biāo)志物更高的靈敏度與特異度。HBV-DNA檢測不但可使乙型肝炎患者體內(nèi)的病毒復(fù)制活性得到評價，而且可實現(xiàn)病情動態(tài)監(jiān)測，在為乙型肝炎患者實施抗病毒治療時，通過監(jiān)測患者的乙肝病毒DNA定量變化，是對治療效果進(jìn)行評估的主要指標(biāo)之一。在實施抗病毒治療后，若患者機(jī)體的病毒DNA定量降低較為明顯，甚至由陽性轉(zhuǎn)變?yōu)殛幮裕瑒t提示抗病毒治療取得較好的效果；若患者的病毒DNA定量無明顯變化，則表明抗病毒治療的效果不佳，需針對性調(diào)整治療方案，以取得更好的治療效果。有資料顯示，將乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA聯(lián)合應(yīng)用，可有效評估乙型肝炎病毒復(fù)制活性與傳染性[8]。對于HBV-DNA陽性的患者，其自身體內(nèi)的乙型肝炎病毒具備較高的復(fù)制活性，因此容易出現(xiàn)傳染風(fēng)險，而對于HBsAg、HBcAb與HBeAb陽性的患者，雖然其體內(nèi)乙型肝炎病毒并未發(fā)生大量復(fù)制，但仍舊存在部分傳染性。有研究報道，對于乙型肝炎血清標(biāo)志物陰性的患者，若HBV-DNA檢查結(jié)果為陽性，則表明患者體內(nèi)的HBsAg處于恢復(fù)狀態(tài)，其病毒血癥被消除，因此不會出現(xiàn)傳染性[9]。

部分乙型肝炎急性期患者，或是慢性乙型肝炎患者，若為其開展乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測，結(jié)果顯示HBsAg陰性，但仍舊在血清中可檢測出水平較低的HBV-DNA，則提示患者的體內(nèi)出現(xiàn)HBV感染。有研究結(jié)果報道稱，血清HBsAg結(jié)果呈現(xiàn)為陰性，但HBV-DNA結(jié)果呈現(xiàn)為陽性的乙型肝炎患者，在全部慢性肝病患者中的占比為32%～60%[10]。慢性肝病患者出現(xiàn)隱匿性HBV感染的原因，可能是由于：（1）HBV基因出現(xiàn)變異。當(dāng)S基因發(fā)生突變，可使得部分氨基酸出現(xiàn)替換缺失情況，進(jìn)而使HBsAg具備的抗原性發(fā)生改變，或?qū)BsAg的表達(dá)產(chǎn)生影響，導(dǎo)致HBsAg無法正常表達(dá)。（2）當(dāng)患者發(fā)生乙型肝炎后，機(jī)體處在HBV消失的早期階段，此時其機(jī)體內(nèi)的血清HBsAg水平極低，若采用普通酶聯(lián)免疫吸附法檢驗，由于該方法不具備較高的靈敏度，則可能導(dǎo)致HBsAg水平無法被準(zhǔn)確測量，但患者體內(nèi)的HBV-DNA仍開展低水平復(fù)制，因此在血清中仍有HBV-DNA被檢測出來。（3）HBV的表達(dá)降低。當(dāng)HBV的病毒顆粒組裝，或是HBV分泌發(fā)生變化，則可使被感染的肝細(xì)胞內(nèi)HBV基因表達(dá)減弱，或HBsAg可能在免疫復(fù)合物內(nèi)隱藏，從而導(dǎo)致其無法被檢出[11]。本次研究結(jié)果顯示，82例HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性的患者的HBV-DNA陽性率最高，HBV-DNA陽性患者中HBeAg陽性率高于HBsAg陽性率（P<0.05），表明乙型肝炎患者HBeAg水平與HBV-DNA水平之間可能具有一定關(guān)聯(lián)，即大部分HBV-DNA為陽性的患者可能為乙型肝炎HBeAg攜帶者。有資料證實，乙肝血清HBeAg屬于HBV復(fù)制活躍的標(biāo)志物，可用于乙肝病毒感染診斷[12]。通過乙型肝炎血清標(biāo)志物以及HBV-DNA檢查，可使乙型肝炎得到早期診斷，同時可判斷HBV復(fù)制情況，為后續(xù)治療的實施提供參考。乙型肝炎患者機(jī)體血清HBsAg可能在無癥狀攜帶者的體內(nèi)存在，也可能在HBV感染早期（感染時間為1～2周）患者體內(nèi)存在，因此當(dāng)乙型肝炎血清HBsAg檢測結(jié)果為陽性時，則表明患者自身已經(jīng)受到HBV感染，但無法對患者體內(nèi)的HBV復(fù)制狀態(tài)予以明確判斷。有研究報道稱，在對乙型肝炎進(jìn)行診斷時，不可僅依靠乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測來作為診斷依據(jù)，還需要實施HBV-DNA檢測，來對其體內(nèi)的HBV復(fù)制情況進(jìn)行判斷，從而為后續(xù)治療提供依據(jù)。

綜上所述，乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測對診斷乙型肝炎均具有較高的應(yīng)用價值。

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（收稿日期：2022-12-21）