仔豬大腸桿菌引發的黃痢的診治研究

高艷梅

（延安市寶塔區柳林鎮獸醫站，陜西 延安 716000）

1 前言

本次試驗主要是對延安市寶塔地區的仔豬大腸桿菌病的致病性大腸桿菌進行藥敏實驗，和根據藥敏試驗結果對患病豬進行治療研究。

仔豬大腸桿菌病是豬場的常見病，許多學者都對此病進行過研究。國內外研究主要是針對不同血清型的大腸桿菌。大腸桿菌病的流行凝血研究中應用血清型分類法以來已經積累了大量的資料。不同年齡階段的仔豬患病主要由不同血清型的大腸桿菌引起，致病性大腸桿菌主要是O型，其致病力與O抗原有關。此種血清型大腸桿菌主要侵入動物血液組織中。仔豬大腸桿菌病主要一類為腸道致病性大腸桿菌病，主要是仔豬黃痢。近年來在治療預防方面還研究通過疫苗即人工免疫的方式進行預防治療，但是由于致病性大腸桿菌的血清型很多，而且他們各自還有不同的K抗原，在疾病的發展過程中，現在又不斷有新的致病性O和K抗原型的出現。一種致病性大腸桿菌的產毒素質粒還可以轉移給其他血清型的大腸桿菌等，這些使人工免疫變得十分復雜。

仔豬大腸桿菌病在延安市寶塔地區發病的形式主要以仔豬黃痢、仔豬白痢兩種出現，這兩種病的主要臨床癥狀是腹瀉，病理特征為消化道損傷[1]。仔豬黃在當地發病率十分高，且發病后治愈率十分低。因此通過對仔豬大腸桿菌病的診治研究，幫助我們正確地認識疾病，引導養殖戶在治療過程中正確的用藥。

2 材料與方法

2.1 實驗材料

實驗動物：豬，主要為寶塔地區常見的三元雜交豬。患仔豬黃痢的豬3頭；未患病1～40d的健康仔豬20頭。

實驗室解剖器械：手術刀、手術剪、手術臺等。

培養基：培養大腸桿菌的液體培養基、瓊脂培養基，各種生化培養基、培養皿、37℃恒溫箱培養（中國艾測有限公司生產，型號DZX180DZX250DZX320）等。

藥物：針對仔豬黃痢的藥物：母仔內源康由（撫州市大華動物藥業有限公司，獸藥字（2005）140011506）、慶大霉素（撫州市大華動物藥業有限公司獸藥字（2005）140011616）、仔豬痢寶（撫州市大華動物藥業有限公司，獸藥字（2005）140011638）、保育靈（撫州市大華動物藥業有限公司，獸藥字（2005）140012074）、普痢美（撫州市大華動物藥業有限公司，獸藥字（2005）140011052）等；

其他材料：6mm打孔器、濾紙、一次性注射器。

2.2 實驗方法

2.2.1 人工接種未患病的仔豬

首先進行致病性大腸桿菌的培養與提取。提取主要從患病豬中提取大腸桿菌，用瓊脂培養基做劃線培養。得到單個的菌落。然后在肉湯培養基中進行增菌培養：在瓊脂培養基中挑取單個的菌落，再接種在肉湯培養基中。通過生化培養基進行大腸桿菌鑒定培養，主要鑒定是否得到的是大腸桿菌菌液。提取好的純大腸桿菌菌液在2～6℃環境中保存備用[2]。用分離培養得到的純大腸桿菌菌液通過人工接種未患病的健康豬群，人工感染。感染途徑主要通過飲水對仔豬進行感染。

2.2.2 臨床癥狀及病理解剖觀察

首先對豬群分別觀察患病仔豬的臨床癥狀，并記錄。主要觀察患病豬糞便的顏色，氣味，患病豬精神狀況，皮毛的色澤，食欲，呼吸。觀察完患病豬的臨床癥狀后解剖患病豬，觀察其病理特征，并記錄。觀察各個器官的病理變化并與健康的豬的各器官作對比[3]。

根據仔豬大腸桿菌病的臨床癥狀和病理癥狀，挑選感染后具有典型臨床癥狀的發病豬，進行治療實驗試驗。

2.2.3 藥敏實驗

首先進行藥物選擇：寶塔地區的獸藥很多，此次實驗選取的藥物主要為當地常見的一些藥物，這些藥物主要是針對不同類型的大腸桿菌病，包括當地養殖戶常用的單方藥與復方藥，中藥以及西藥。可以進行實驗的藥物有：1針對仔豬黃痢的藥物有母仔內源康（拌料用藥）、普痢美（拌料用藥）、慶大霉素、仔豬痢寶等、保育靈。然后進行藥敏片的制備：選用質量較好的濾紙片（定量濾紙），用打孔器打成直徑為6mm的圓片，每l00片放入一小瓶中，160℃干熱滅菌1～2h或高壓滅菌后，在60℃條件下烘干備用。計算抗菌用藥的藥物濃度并配置藥液。計算方法：1.計算最小濃度值按藥物使用說明上的配料或飲水比例換算成一個基本單位藥量（以能準確稱量藥品的最小值為宜，如0.5g、lg、2g等），而需要配多少料或飲多少水，則相當于配制浸泡藥片的藥品濃度時所加蒸餾水的ml數。例如，藥品使用說明上標明5g本品可拌50kg飼料，其換算方法為lg本品可拌10kg飼料，也就是1g本品拌l0000g飼料，相當于藥品濃度為lg本品加l0000ml蒸餾水。2.濃度配制準確稱取上述基本單位藥量（片劑要研磨成粉末后再行稱量），在無菌條件下，按下列分列項用蒸餾水進行倍比稀釋。根據以上換算lg本品加10000ml蒸餾水，即lg本品加10×l0×10×l0ml蒸餾水。如出現lg本品拌320g飼料等情況，可改成1g本品拌320g飼料，即加l0×4×8ml蒸餾水。這樣改動易形成分列項，并不影響實際效果。因為在配料時可按紙片濃度lg本品拌320g飼料進行拌料。如果所加蒸餾水量較少或現場蒸餾水充足，可不按上述倍比稀釋法稀釋，而直接按配料或飲水比例一次稀釋而成[4]。制作好藥物液體后進行藥敏紙片的浸泡。取50ml已配制好的藥液注入已經滅菌的干凈平皿中，取30到50個藥敏紙片，放入已經加入藥液的平皿中。放入的紙片要單個分離，不能粘連在一起，這樣能使每張紙片上的藥物均勻。紙片放入后，把平皿放入冰箱，并且每隔30min翻動紙片一次，這樣做保證紙片兩面的藥物均勻。3h后拿出藥片，并在37℃的溫箱中烘干。烘干后放入干凈的滅菌瓶中，并再放入冰箱中冷凍保存。當藥敏片制備好后進行藥敏實驗。用微量移液器移取200ux大腸桿菌24h營養肉湯培養物，滴于普通瓊脂培養基上，使用滅菌L型棒涂布均勻，蓋好平皿靜置2～3min后，待培養基表面干燥后用無菌鑷子取含有不同藥物的藥敏紙片貼在瓊脂表面上，中藥藥敏紙片和西藥藥敏紙片分為兩組，分別貼于不同的培養板，每組培養基的藥敏片數量為4個。37℃培養24h后取出，測量抑菌環直徑[5]。

2.2.4 藥物治療

藥物治療主要為用藥敏實驗得到的敏感性藥物治療患病豬。分別設定實驗組和對照組。對照組為未感染的健康豬群，根據患病類型設用不同日齡的健康仔豬分三個對照豬，分別為初生1～10d仔豬，7～20d仔豬以及斷奶后的仔豬。實驗組分別設仔豬黃痢實驗組、對照組。

給人工接種感染仔豬黃痢的發病豬分別用：給藥方法為每天按每公斤體重0.1ml分別注射慶大霉素、保育靈、仔豬痢寶，1d兩次連續用2d。母豬飼料中分別添加母仔內源康、普痢美每1000kg中添加100g。連續用藥7d。

實驗組和對照組（健康豬群）。7d后觀察治愈豬與健康豬的臨床表現與解剖特征。同時對比患病豬與治愈豬的臨床表示和解剖特點。通過對比健康豬與曾患病豬在臨床和解剖特征上的區別，得出每種藥物的治愈率。

3 實驗結果

3.1 寶塔地區常用藥物藥敏實驗結果

仔豬大腸桿菌病引起的仔豬黃痢型其藥敏實驗如表1。注：抑菌圈直徑大于15mm認為高度敏感，在10～15mm之間認為敏感，小于10mm認為不敏感[6]。

表1 針對仔豬黃痢的藥物抑菌結果

表2 仔豬黃痢治愈率

表3 黃痢型患病豬，患病治愈豬和正常豬的臨床表現對比

通過不同藥物對引起仔豬黃痢的致病性大腸桿菌的抑菌圈大小可以看出，當地常見的治療藥物中，產生抑菌圈最大藥物為仔豬痢寶，抑菌圈最小的為阿米卡星。

3.2 人工接種健康豬后進行藥物治療結果對比

實驗主要是據仔豬大腸桿菌病的體外抑菌實驗結果進行。

通過給人工接種的患仔豬黃痢的豬進行藥物治療實驗，實驗結果發現治療效果最好的藥物是仔豬痢寶。母仔內源康和普痢美是通過給哺乳母豬喂藥，進行仔豬的治療，其治療效果分別達到85.6%和87.1%。通過治療研究發現這些藥物對仔豬黃痢的治療率都超過80%。

3.3 治愈后對比患病豬，患病治愈豬和正常豬臨床特點，解剖特點

通過對患病豬，患病后治愈豬以及正常豬對比它們的臨床特點，解剖特點觀察藥物對患病豬的治療效果。

3.3.1 黃痢型患病豬，患病后治愈豬和正常的豬臨床和解剖特點對比

通過最仔豬黃痢患病豬和未患病豬以及患病后治愈豬的臨床特點，剖檢結果可以看出患病后用藥豬均恢復正常，且預后良好。這個結果能夠進一步說明這些藥物對仔豬黃痢的治愈效果良好

4 結論

通過對延安市寶塔區的大腸桿菌病進行病原的藥敏實驗和治療實驗找出當地常用的治療藥物中，對仔豬大腸桿菌有效的治療藥物有針對仔豬黃痢的藥物有母仔內源康（拌料用藥）、普痢美（拌料用藥）、仔豬痢寶等、保育靈。因此在當地治療仔豬大腸桿菌病時推薦使用上述藥物。