血清Apelin-13和網膜素-1表達與腎移植術后患者腎功能的相關性研究

李冰玉, 師 勇, 陳家會, 梁亞林, 唐 倩, 楊青彥

(河南省鄭州市第七人民醫院 腎移植腎臟病診療中心, 河南 鄭州, 450000)

隨著外科技術和免疫抑制技術的進步,腎移植已成為終末期腎病患者最有效的治療選擇[1]。腎移植并發癥的臨床表現通常不明顯,常常導致診斷延遲,甚至到移植失敗晚期或不可逆時才被發現[2]。因此,腎移植后腎功能損傷的早期預測對移植腎的長期存活至關重要。腎移植術后腎功能損傷通常與移植腎的缺血損傷和免疫損傷有密切聯系[3]。Apelin-13是血管緊張素樣孤兒G蛋白偶聯受體的新內源性配體,在多種器官缺血再灌注損傷中發揮保護作用[4-5]。研究[6]顯示, Apelin在急性腎損傷中對腎小管上皮線粒體發揮保護作用。網膜素-1(Omentin-1)是一種新發現的脂肪因子,在代謝綜合征患者中表達呈顯著降低趨勢,其可改善2型糖尿病腎病小鼠的腎功能[7]。Apelin、Omentin-1均與腎功能損傷有密切聯系,且在相關研究[8]中, Apelin、Omentin-1均參與非酒精性脂肪性肝病的炎癥損傷,可作為其預測因子。然而,目前有關于Apelin-13、Omentin-1在腎移植術后腎功能損傷患者中的水平變化及相關研究相對較少。本研究通過檢測腎移植患者術后血清Apelin-13、Omentin-1水平,探討二者在腎功能損傷中的預測價值,旨在為患者的早期診療提供幫助。

1 對象與方法

1.1 研究對象

納入本院2018年1月—2022年5月隨診的89例腎移植患者為腎移植組,其中腎小球腎炎10例, IgA腎病5例,慢性腎衰竭尿毒癥74例; 男46例,女43例; 年齡22～68歲,平均(45.36±10.27)歲。根據腎移植術后1個月內患者是否發生急性腎功能損傷將其分為腎功能損傷組21例和非腎功能損傷組68例。同時隨機抽取本院健康體檢者87例納入對照組,男47例,女40例; 年齡24～67歲,平均(45.52±11.63)歲。記錄患者性別、年齡、糖尿病、收縮壓、舒張壓、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、供腎情況、熱缺血時間、冷缺血時間等情況。本研究經醫院醫學倫理委員會批準,且均獲得研究對象本人同意。

納入標準: ① 腎功能損傷診斷符合全球腎臟病預后組織指南[9], 患者均為腎移植術后出現血肌酐升高、蛋白尿、血尿、無尿或少尿等腎功能異常癥狀,常規實驗室檢查無法明確診斷后進行腎活檢顯示腎小球發生細胞增殖、炎細胞浸潤、硬化、壞死、特殊蛋白沉淀等; 腎間質發生炎細胞浸潤及纖維化等; 腎小管發生上皮細胞變性壞死、脫落等; 血管發生壞死、增厚血栓形成等; ② 患者首次接受腎移植,臨床資料齊全。排除標準: ① 有肝功能不全及惡性腫瘤者; ② 原發性心腦血管系統性疾病者; ③ 近3個月內服用降血脂藥物者; ④合并糖尿病酮癥或糖尿病酸中毒等合并癥。原腎移植患者98例,根據上述標準排除9例,共納入89例腎移植患者。

1.2 方法

對照組于體檢時采集空腹靜脈血10 mL, 腎移植組于術后第1天常規采集空腹靜脈血10 mL, 離心收集血清(3 000 轉/min, 15 min), 于-80 ℃超低溫冰箱保存備用。

1.3 觀察指標

采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清Apelin-13、Omentin-1水平,其采用的儀器為美國Thermo Fisher Scientific公司的LabServTMK3型酶標儀。采用粒子增強透射免疫比濁法測定胱抑素C水平; 采用酶法測定血肌酐水平; 采用紫外-谷氨酸脫氨酶法測定血尿素氮水平; 采用比濁法測定β2-微球蛋白、24 h尿蛋白水平; 檢測儀器均為德國西門子公司的ADVIA2400全自動生化分析儀。采用符合中國人的校正eMDRD方程計算出估算腎小球濾過率(eGFR), eGFR[mL/(min·1.73 m2)]=186×(CX3Pcr)-1.154×0.742(女性)×1.233(中國人)×(年齡)-0.208(CX3Pcr為校正后的血肌酐,男性系數為1.000)。

1.4 統計學分析

2 結 果

2.1 腎移植組與對照組血清Apelin-13、Omentin-1水平及腎功能指標比較

腎移植組血肌酐、血尿素氮、胱抑素C、β2-微球蛋白、24 h尿蛋白水平高于對照組, Apelin-13、Omentin-1、eGFR水平低于對照組,差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組血清Apelin-13、Omentin-1水平及腎功能指標比較

2.2 腎功能損傷組與非腎功能損傷組一般資料比較

腎功能損傷組與非腎功能損傷組的性別、年齡、糖尿病、收縮壓、舒張壓、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、供腎情況、熱缺血時間、冷缺血時間等資料比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 腎功能損傷組與非腎功能損傷組一般資料比較

2.3 腎功能損傷組與非腎功能損傷組血清Apelin-13、Omentin-1水平及腎功能指標比較

腎功能損傷組的血肌酐、血尿素氮、胱抑素C、β2-微球蛋白、24 h尿蛋白水平高于非腎功能損傷組, Apelin-13、Omentin-1、eGFR水平低于非腎功能損傷組,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 腎功能損傷組與非腎功能損傷組血清Apelin-13、Omentin-1水平及腎功能指標比較

2.4 術后腎功能損傷的腎移植患者血清Apelin-13、Omentin-1水平與腎功能指標的相關性

Pearson相關性分析顯示,術后腎功能損傷的腎移植患者血清Apelin-13、Omentin-1水平與血肌酐、血尿素氮、胱抑素C、β2-微球蛋白、24 h尿蛋白呈負相關,與eGFR呈正相關(P<0.05)。見表4。

表4 術后腎功能損傷的腎移植患者血清Apelin-13、Omentin-1水平與腎功能指標的相關性

2.5 血清Apelin-13、Omentin-1水平對腎移植患者術后腎功能損傷的預測價值

以血清Apelin-13、Omentin-1水平為檢驗變量,分析二者對腎移植患者術后腎功能損傷的預測價值,結果顯示, Apelin-13、Omentin-1單獨及聯合預測腎移植患者術后腎功能損傷的AUC分別為0.784(95%CI: 0.693～0.876)、0.773(95%CI: 0.658～0.888)、0.841(95%CI: 0.758～0.924); Apelin-13、Omentin-1聯合預測的AUC顯著大于二者單獨預測的AUC(Z=1.919、2.290,P<0.05), 敏感度分別為60.3%、66.2%、76.5%, 特異度分別為90.5%、85.7%、81.0%, Apelin-13、Omentin-1預測臨界值分別為23.44、112.39 ng/mL。見圖1。

圖1 血清Apelin-13、Omentin-1水平預測腎移植患者術后腎功能損傷的ROC曲線

2.6 腎移植患者術后腎功能損傷的Logistic回歸分析

以腎移植患者術后是否發生腎功能損傷(是=1; 否=0)為因變量,以Apelin-13、Omentin-1為自變量進行Logistic回歸分析,結果顯示, Apelin-13、Omentin-1是腎移植患者術后腎功能損傷的保護因素(P<0.05)。見表5。

表5 腎移植患者術后腎功能損傷的Logistic回歸分析

3 討 論

腎移植可恢復腎臟疾病患者大部分代謝及內分泌功能,目前患者近期存活率已有顯著提升[10]。與透析相比,腎移植患者的生活質量、經濟節約及存活率方面均有所改善[11]。目前,臨床中常采用胱抑素C、血肌酐、血尿素等指標評價腎移植術后患者移植腎的功能狀態,但上述指標存在特異度和敏感度相對較低等缺陷,且部分指標水平變化可能在腎臟功能出現嚴重受損時才較為明顯,可能會影響患者的病情評價[12-13]。因此,臨床中亟待尋找與腎移植術后腎功能損傷有關的高特異度和敏感度的早期預測標志物。

缺血再灌注損傷是器官移植過程中發生的一種主要且不可避免的并發癥,在腎移植領域,腎缺血再灌注損傷仍然是急性腎功能損傷的主要原因,可導致住院病死率和長期預后不良的風險增加[14-15]。研究[16]顯示, Apelin可提高腎缺血再灌注損傷后降低的下游基因水平,改善腎功能和組織結構的損傷,阻礙細胞凋亡,并降低炎癥因子和氧化應激水平。研究[17]表明, Apelin-13可顯著減少大鼠中腎缺血再灌注損傷誘導的腎小管損傷、腎細胞凋亡,并使損傷誘導的腎臟功能障礙正常化,是治療急性腎功能損傷的候選物。本研究結果發現,腎移植術后發生腎功能損傷患者血清Apelin-13水平降低,提示Apelin-13水平降低可能與腎功能損傷的發生發展有關,分析腎移植術后部分患者體內缺血再灌注等病理損傷加重,造成血清Apelin-13水平降低,使得Apelin-13阻礙細胞凋亡、炎癥以及氧化應激的作用減弱,進而造成患者腎功能和組織結構損傷,推動腎功能損傷進展。Omentin-1是一種新發現的脂肪因子,其參與抗氧化和抗凋亡等過程,與糖尿病腎病有密切聯系[18]。研究[19]發現,腎移植患者Omentin-1顯著低于血液透析患者。本研究中,發生腎功能損傷的腎移植患者血清Omentin-1水平較低,且與胱抑素C、血肌酐、血尿素等腎功能常見指標顯著相關,提示Omentin-1可一定程度反映腎臟功能,有可能作為腎移植患者腎功能損傷的標志物。研究[20]表明, Omentin-1可能通過抑制腎小球系膜細胞中的微炎癥,進而起到保護腎的作用。結合相關研究分析本研究中部分腎移植患者術后血清Omentin-1水平下降,可能造成腎小球系膜細胞中的炎癥水平上升,最終發生腎功能損傷。此外, ROC曲線分析結果及多因素結果均表明,本研究中Apelin-13、Omentin-1在預測腎移植患者術后早期腎功能損傷中有重要作用,二者預測AUC均大于0.7,提示二者均可作為術后早期腎功能損傷的預測因子,二者聯合后的預測價值顯著升高,臨床中可根據腎移植患者術后血清Apelin-13、Omentin-1檢測水平,及時對其腎功能損傷做出早期評估,當Apelin-13高于23.44 ng/mL、Omentin-1高于112.39 ng/mL時,腎功能損傷發生風險較高,應密切關注患者的術后情況。

綜上所述,腎移植術后發生腎功能損傷患者血清中Apelin-13、Omentin-1均呈低表達,與腎移植術后病情進展可能密切相關,其有作為腎移植術后腎功能損傷預測指標的潛力。由于本研究納入樣本數量有限,多因素分析未能全面分析; 此外,受病例數限制,本研究并未對腎損傷程度進行分級研究,且腎移植患者術后的恢復分為腎功能即刻恢復、腎功能緩慢恢復、腎功能延遲恢復,不同人群的腎功能變化存在差異,本研究未能進行分組研究,統計學結果可能存在偏倚; 本研究僅以活檢結果作為“金標準”進行ROC曲線分析,而未對兩指標與其他腎損傷指標進行比較分析,使得研究結果存在一定的局限性,今后可進行大樣本研究驗證,同時可進一步通過基礎研究探討Apelin-13、Omentin-1在腎功能損傷中發揮的具體作用機制。