急性冠脈綜合征患者血清miR-130a、AngⅡ水平與冠狀動脈病變程度的關系*

馮天保,劉宏穎,方 媛,張 陽,聞志軍,李 臻

遵化市人民醫院心血管內科,河北唐山 064200

急性冠脈綜合征(ACS)是一種致殘率高、起病急的心血管病變,也是引發心血管疾病死亡的重要因素[1-2]。目前認為ACS發生發展與動脈粥樣硬化、血管內皮功能紊亂及微小RNA(miRNA)異常表達等相關[3-5]。研究發現,miR-130a在冠心病患者中水平較高,其有望成為評估冠心病嚴重程度的輔助指標[6]。另外,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)在ACS患者血漿中水平較高,其具有評估ACS患者病情嚴重程度的潛在價值[7]。李麗等[8]研究發現,miR-130a可調控AngⅡ表達從而影響心肌細胞纖維化進程。推測血清miR-130a、AngⅡ水平與ACS患者冠狀動脈病變程度相關。因此,本研究通過測定miR-130a、AngⅡ在ACS患者血清中的水平,旨在分析miR-130a、AngⅡ與冠狀動脈病變程度的關系及其診斷ACS的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年1月至2023年2月本院收治的ACS患者160例作為ACS組,其中男85例、女75例,年齡45～78歲,平均(60.89±10.87)歲。納入標準:(1)患者符合ACS診斷標準[9];(2)年齡>18歲。排除標準:(1)有精神疾病或惡性腫瘤者;(2)合并臟器功能不全、自身免疫性疾病或感染性疾病者;(3)妊娠期女性。同期另納入160例本院的體檢健康者作為對照組,男78例、女82例,年齡45～78歲,平均(59.87±10.67)歲。本研究所有受試者均簽署知情同意書,由醫院倫理委員會批準(審批號:臨床L2020第54號)。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集 收集所有受試者性別、年齡、心率、體重指數(BMI)、高血壓史、糖尿病史。

1.2.2血清標本采集 收集ACS患者入院后次日、體檢健康者體檢當日清晨空腹靜脈血6 mL,靜置16 min后,4 600 r/min離心11 min,分離血清,均分為兩部分裝到新的收集管中保存于-80 ℃冰箱備用。

1.2.3血清miR-130a水平檢測 取血清標本,低溫融化,使用Trizol試劑盒(批號2171841,杭州翠鳥生物試劑有限公司)提取總RNA,利用逆轉錄試劑盒(批號SJ65921,邯鄲市亞星生物科技有限公司)逆轉錄為cDNA。應用PCR試劑盒(批號2180765,杭州翠鳥生物試劑有限公司)及熒光定量PCR儀(型號CG-05,廣州雋沐生物科技有限公司)進行擴增、檢測。反應體系參照PCR試劑盒進行配置,熒光定量PCR程序設定為:94 ℃ 3 min,93 ℃ 31 s、62 ℃ 28 s、71 ℃ 16 s 40個循環,72 ℃延伸4 min。以GAPDH為內參,引物由大連美侖生物科技公司設計、合成,引物序列見表1,采用2-ΔΔCt計算分析血清miR-130a水平。

表1 引物序列

1.2.4血清AngⅡ水平測定 采用人AngⅡ酶聯免疫吸附試驗試劑盒(批號EH26272,江蘇艾瑋得生物科技有限公司)配制AngⅡ的標準樣品溶液,同時解凍血清,酶標儀(型號Chromate 4300,廣州測迪生物科技有限公司)測定血清AngⅡ標準品溶液在450 nm處的吸光度,繪制AngⅡ的標準回歸曲線,結合AngⅡ的標準回歸方程,計算血清AngⅡ水平。

1.2.5冠狀動脈病變程度評價 利用Judkin′s法多體位投照對ACS患者行冠狀動脈造影檢查,將冠狀動脈血管分為15段,按Gensini積分系統和冠狀動脈血管圖像分段評價標準來評定各冠狀動脈分支血管病變程度,計算總Gensini評分[10]。依據ACS患者的總Gensini評分將其分為輕度組57例(0～<31分)、中度組54例(31～<60分)、重度組49例(≥60分)[11]。

2 結 果

2.1對照組、ACS組臨床資料比較 對照組、ACS組性別、年齡、心率、BMI比較,差異無統計學意義(P>0.05);與對照組比較,ACS組高血壓史、糖尿病史比例升高(P<0.05)。見表2。

表2 對照組、ACS組臨床資料比較(n/n或

2.2對照組、ACS組血清miR-130a、AngⅡ水平比較 與對照組比較,ACS組患者血清miR-130a、AngⅡ水平升高(P<0.05)。見表3。

表3 對照組、ACS組血清miR-130a、AngⅡ水平比較

2.3不同病變程度ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平比較 輕度組、中度組、重度組ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平依次升高(P<0.05)。見表4。

表4 不同病變程度ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平比較

2.4ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平的相關性分析 Pearson相關分析結果顯示,ACS患者血清miR-130a水平與AngⅡ呈正相關(r=0.584,P<0.001)。

2.5影響ACS發生的多因素Logistic回歸分析 以ACS發生為因變量,以高血壓史、糖尿病史及血清miR-130a、AngⅡ水平為自變量進行多因素Logistic回歸分析,結果顯示有高血壓史、糖尿病史及血清miR-130a、AngⅡ水平升高是影響ACS發生的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 影響ACS發生的多因素Logistic回歸分析

2.6血清miR-130a、AngⅡ水平對中度ACS的診斷價值 ROC曲線分析結果顯示,血清miR-130a、AngⅡ及二者聯合診斷中度ACS的曲線下面積(AUC)分別為0.728、0.823、0.885,相較于血清miR-130a、AngⅡ水平單獨診斷的AUC,二者聯合診斷的AUC更高(Z=3.276、P=0.001,Z=2.226、P=0.026)。見表6、圖1。

圖1 血清miR-130a、AngⅡ水平及二者聯合診斷中度ACS的ROC曲線

表6 血清miR-130a、AngⅡ水平對中度ACS的診斷價值

2.7血清miR-130a、AngⅡ水平對重度ACS的診斷價值 ROC曲線分析結果顯示,血清miR-130、AngⅡ及二者聯合診斷重度ACS的AUC分別為0.731、0.730、0.825,相較于血清miR-130a、AngⅡ水平單獨診斷的AUC,二者聯合診斷的AUC更高(Z=2.214、P=0.027,Z=2.457、P=0.014)。見表7、圖2。

圖2 血清miR-130a、AngⅡ水平及二者聯合診斷重度ACS的ROC曲線

表7 血清miR-130a、AngⅡ水平對重度ACS的診斷價值

3 討 論

ACS是由心肌缺血引發的一種心血管疾病,其致死率高,嚴重威脅人類健康,及早發現并給予治療對提高ACS患者預后效果具有重要意義[12-13]。血液生化標志物有較高的靈敏度、特異度,通過測定特殊的標志物用于評估ACS病情發展程度或預測有關主要不良心血管事件的發生,改善預后有積極意義。

miRNA可通過調控有關基因表達進而調控細胞凋亡、參與炎癥反應、影響血管內皮損傷,是理想的生物標志物,且許多miRNA與ACS相關[14-15]。其中,miR-130a與血管內皮細胞損傷、心臟發育、心肌纖維化、心律失常、心肌梗死等現象關系密切[16-17]。另外,miR-130a在急性缺血性腦卒中大鼠腦組織中呈高表達,其可能通過靶向調控有關基因表達,進而調節血管生成[18]。BARRACLOUGH等[19]發現,高水平的miR-130a會增加ACS發生的風險,而經秋水仙堿治療后,可使ACS患者中升高的miR-130a恢復到與健康者相似的水平。本研究發現,與體檢健康者比較,ACS患者血清miR-130a水平較高,這與謝巖等[6]和BARRACLOUGH等[19]報道的miR-130a的水平變化趨勢一致。本研究還發現,血清miR-130a水平隨ACS患者冠狀動脈病變程度加重而呈升高趨勢,推測miR-130a可能通過調節相關信號通路和基因表達影響心肌細胞增殖、凋亡和血管生成,造成血管內皮功能障礙,從而在ACS病理變化中起作用,但其具體機制仍需進一步研究證實。此外,本研究探討了血清miR-130a對ACS冠狀動脈病變程度的診斷價值,結果顯示,血清miR-130a診斷中、重度ACS的AUC分別為0.728、0.731,提示血清miR-130a對ACS中、重度分級有一定診斷價值,測定血清miR-130a水平有助于臨床及時診斷ACS冠狀動脈病變程度。

AngⅡ可影響心肌纖維化、細胞增殖、凋亡,促進血管內氧化應激,進而造成內皮功能障礙,調節血管收縮功能,促進炎癥細胞浸潤,誘發炎癥反應,促使易損斑塊形成,造成血栓,影響冠心病等心血管病變進程[20-21]。有研究發現,AngⅡ在ACS患者血清中呈高水平,其可作為判斷ACS危險分層和預后預測的輔助指標[22]。本研究結果顯示,與體檢健康者比較,ACS患者血清AngⅡ水平升高,與秦曙光等[22]的研究結果相似,并且ACS患者冠狀動脈病變程度越高血清AngⅡ水平越高,提示血清AngⅡ可能與ACS冠狀動脈病變程度有關。同時,本研究探討了血清AngⅡ對ACS冠狀動脈病變程度的診斷價值,結果顯示,血清AngⅡ診斷中、重度ACS的AUC分別為0.823、0.730,提示血清AngⅡ可作為診斷ACS冠狀動脈病變程度的潛在指標。

余明等[23]研究顯示,miR-130a可通過調控AngⅡ表達進而調節心血管疾病進展。本研究結果顯示,ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平呈正相關,且血清miR-130a水平與AngⅡ升高是影響ACS發生的獨立危險因素,提示血清miR-130a、AngⅡ水平可能共同參與ACS病變過程,二者高水平可能更容易誘發ACS的發生,但其機制有待深入研究證實。進一步研究發現,血清miR-130a、AngⅡ水平聯合診斷中、重度ACS的AUC分別為0.885、0.825,提示血清miR-130a、AngⅡ聯合對ACS中、重度分級有較好的診斷價值,可更好地診斷ACS冠狀動脈病變程度,且優于單一指標,有一定臨床參考價值。

綜上所述,ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平較高,二者水平呈正相關,均與ACS冠狀動脈病變程度有關,二者聯合對冠狀動脈病變程度具有較高診斷價值。但本研究樣本較少,研究結果有一定局限性,后期仍需擴大樣本,從多角度探究血清miR-130a、AngⅡ水平在ACS發生發展過程中的作用機制。