基于鎮(zhèn)靜催眠作用的生半夏水煎液毒性研究

摘要 目的：探討不同劑量及煎煮時(shí)間的生半夏水煎液鎮(zhèn)靜催眠作用及急性、亞急性毒性。方法：觀察小鼠自主活動(dòng)次數(shù)、睡眠潛伏期、睡眠持續(xù)時(shí)間，探討不同劑量及煎煮時(shí)間的生半夏水煎液鎮(zhèn)靜催眠作用，采用1 d最大給藥量法探討其急性毒性，連續(xù)30 d給藥后，檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Glutamic-Pyruvic Transaminase，GPT），尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）及病理組織，探討其亞急性毒性。結(jié)果：與正常組比較，各給藥組自主站立次數(shù)減少，睡眠潛伏期縮短，睡眠持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），以煎2 h中劑量效果最佳。急性毒性實(shí)驗(yàn)未見(jiàn)明顯異常變化。亞急性毒性實(shí)驗(yàn)中，與正常組比較，生半夏煎1 h與煎2 h水煎液中、高劑量組GPT含量顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01），GPT升高呈劑量相關(guān)性。各給藥組BUN含量均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01）；煎2 h比煎1 h同劑量組降低更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。結(jié)論：生半夏水煎液安神以60 g劑量效果最佳，符合吳鞠通“2兩安眠”之說(shuō)，久煎有增效的趨勢(shì)。生半夏水煎液無(wú)急性毒性，具有一定亞急性毒性，表現(xiàn)為肝腎毒性，肝損害呈劑量依賴(lài)性；腎損害無(wú)劑量相關(guān)性，但以中劑量最輕；久煎2 h未能降低肝腎毒性，認(rèn)為與生半夏含有水溶性耐熱的毒性成分有關(guān)，久煎1 h相對(duì)較好。

關(guān)鍵詞 生半夏；鎮(zhèn)靜催眠；急性毒性；亞急性毒性；劑量；煎煮時(shí)間

The Toxicity Study of Raw Pinelliae Rhizoma Decoction Based on Sedative and Hypnotic EffectZHANG Yan1，YANG Man2，ZHANG Yanan1，LIU Xijian1

（1 College of Traditional Chinese Medicine，Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji′nan 250355，China; 2 Health Center of Yanshan Campus of Shandong Party School，Ji′nan 250355，China）

Abstract Objective：To study the sedative and hypnotic effects，acute and subacute toxicity of raw Pinelliae Rhizoma with different dosages and decocting time.Methods：Observe the number of spontaneous activities，sleep latency，and sleep duration of mice to explore the sedative and hypnotic effects of raw Pinellia ternata decoction at different doses and decocting time，and explore its acute toxicity by the maximum dose method in one day.After 30 consecutive days of administration，detect serum Alanine transaminase（GPT），Blood urea nitrogen（BUN），and pathological tissue，and explore its subacute toxicity.Results：Compared with the normal group，the number of autonomous standing times，sleep latency，and sleep duration of each medication group were reduced，and the difference was statistically significant（Plt;0.05）.The best effect was to decoct at a medium dose for 2 hours.No significant abnormal changes were observed in the acute toxicity experiment.In the subacute toxicity experiment，compared with the normal group，the GPT content in the medium and high dose groups of raw Pinellia ternata decoction for 1 hour and 2 hours significantly increased，with a statistically significant difference（Plt;0.01）.The increase in GPT was dose-related.The BUN content in each treatment group was significantly reduced，with a statistically significant difference（Plt;0.01）; The decrease was more significant in the same dose group after 2 hours of decoction compared to 1 hour of decoction，and the difference was statistically significant（Plt;0.05）.Conclusion：The 60 g raw Pinelliae Rhizoma decoction had the best sedative effect，which is consistent with the theory of “2 Liang（about 60 g） can induce to sleep” from Wu Jutong，long-term decocting has a synergistic trend.The raw Pinelliae Rhizoma decoction has no acute toxicity.It has certain subacute toxicity; however，long-term administration is toxic to liver and kidney，the liver damage was dose-dependent，while the kidney damage was not，and the least kidney damage is in the medium dose，and decocting for 2 hours could not reduce the toxicity of liver and kidney，which is due to the water-soluble heat-resistant toxic components in Pinelliae Rhizoma，and we think decocting for 1 hour is better.

Keywords Pinelliae Rhizoma; Sedative and hypnotic; Acute toxicity；Subacute toxicity；Dosage; Decocting time

中圖分類(lèi)號(hào)：R338.63；R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.2095-7130.2023.06.075

半夏為天南星科植物半夏塊莖，燥濕、化痰、安神，是治療失眠常用藥，在治療失眠高頻藥物中排名第五［1］。研究表明，半夏具有鎮(zhèn)靜催眠作用［2］，臨床所用的各種炮制品中，以生半夏作用最佳［3］。而生半夏有毒，主要表現(xiàn)為刺激性，目前認(rèn)為主要是由不溶于水的草酸鈣和蛋白質(zhì)組成的針狀晶體引起，可其刺激性卻可以通過(guò)充分煎煮去除［4］，陸永輝等［5］研究也表明生半夏水煎液無(wú)急性毒性。但半夏治療失眠一般需連續(xù)用藥，目前仍缺乏基于鎮(zhèn)靜催眠作用的半夏水煎液亞急性毒性研究。根據(jù)我們前期的理論研究，半夏安神一般需用30 g以上才有安神良效，必要時(shí)可用生品，但建議先煎至少30 min［6］。本文通過(guò)不同劑量、不同煎煮時(shí)間的生半夏水煎液鎮(zhèn)靜催眠作用及急性毒性、亞急性毒性的研究，以進(jìn)一步明確生半夏安神的劑量范圍、煎煮時(shí)間及其安全性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 180只SPF級(jí)4～6周齡昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量（20±2）g，濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司提供［動(dòng)物許可證號(hào)SYXK（魯）20170022］。本研究獲得了山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，該方案符合國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理相關(guān)指導(dǎo)原則［5］，于室溫（22±2）℃，濕度40%～60%環(huán)境下飼養(yǎng)，自由飲水與進(jìn)食。

1.1.2 藥物 中藥生半夏采購(gòu)于鄭州瑞龍制藥股份有限公司，山東中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定室鑒定為天南星科植物半夏Pinellia ternata（Thunb.）Breit.干燥塊莖。半夏生品用10倍體積冷水浸泡1 h，加熱煮沸，分別煎煮1 h、2 h，40 ℃減壓低溫濃縮成生藥2 g/mL藥液，置于4 ℃冰箱備用。

1.1.3 試劑與儀器 4％多聚甲醛（北京萊博科技有限公司，貨號(hào)：BL539A）。戊巴比妥鈉（北京普博斯生物科技有限公司，批號(hào)：20180912），地西泮片（山東省信宜制藥有限公司，批號(hào)：H37023048），臨用前用蒸餾水配成0.075 g/mL溶液使用。

多功能小鼠自主活動(dòng)記錄儀（上海市欣軟信息科技有限公司，型號(hào)：AK-025K），全自動(dòng)酶標(biāo)儀（芬蘭Labsystems Multiskan MS公司，型號(hào)：352），全自動(dòng)高速冷凍離心機(jī)（湖南省離心機(jī)廠，型號(hào)：5424R），干式恒溫器（杭州市爽盛儀器，型號(hào)：K30），自動(dòng)組織脫水機(jī)（湖北省康強(qiáng)醫(yī)療器械有限公司，型號(hào)：TKD-TSF），石蠟切片機(jī)（徠卡顯微系統(tǒng)有限公司，型號(hào)：RM2235），顯微鏡（徠卡顯微系統(tǒng)有限公司，型號(hào)：DM2500LED）。

1.2 鎮(zhèn)靜催眠實(shí)驗(yàn)

1.2.1 動(dòng)物分組 64只小鼠，隨機(jī)數(shù)字表法分成8組，每組8只，雌雄各半。第1組為正常組，第2～7組分別為生半夏煎1 h水煎液低、中、高劑量組、生半夏煎2 h水煎液低、中、高劑量，第8組地西泮組。

1.2.2 給藥 正常組小鼠灌胃給予生理鹽水，各給藥組分別灌胃給予生半夏煎1 h低、中、高劑量和煎2 h低、中、高劑量水煎液（根據(jù)60 kg成人臨床劑量30 g、60 g、120 g換算）4.505 g/kg、9.01 g/kg、18.02 g/kg，第8組地西泮組，按劑量0.75 mg/kg灌胃地西泮水溶液，1次/d，連續(xù)7 d。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo) 自主站立次數(shù)：末次給藥30 min后，置各組小鼠于自主活動(dòng)記錄儀中，記錄5 min內(nèi)自主站立次數(shù)。協(xié)同閾上劑量戊巴比妥鈉對(duì)睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時(shí)間的影響：各組小鼠末次給藥60 min后，按50 mg/kg腹腔注射戊巴比妥鈉溶液，記錄睡眠潛伏期與睡眠持續(xù)時(shí)間。

1.3 急性毒性

1.3.1 動(dòng)物分組 將60只小鼠隨機(jī)分為3組，生半夏煎1 h水煎液組、生半夏煎2 h水煎液組和正常組，每組20只，雌雄各半。

1.3.2 給藥 采用1天最大給藥量實(shí)驗(yàn)，禁食12 h后，各給藥組灌胃給予1 g/10 g煎1 h和煎2 h的生半夏水煎液，正常組給予等體積生理鹽水［7］。

1.3.3 觀察指標(biāo) 密切觀察給藥后小鼠的精神狀態(tài)、外部反應(yīng)、皮毛色澤、活動(dòng)、呼吸、瞳孔變化、眼球凸出、眼瞼下垂、進(jìn)食、飲水情況、分泌物、排泄物等毒性反應(yīng)和死亡情況。第2天起，每天觀察1次，連續(xù)觀察14 d，并記錄小鼠每日體質(zhì)量。如果有小鼠出現(xiàn)死亡，立刻解剖，肉眼觀察腦、心臟、肺臟、肝臟、脾、腎臟、胃、大腸和小腸等臟器的變化。14 d后，將各組小鼠脫頸處死后進(jìn)行解剖，并按上述方法肉眼觀察主要臟器大體病理變化。

1.4 亞急性毒性

1.4.1 動(dòng)物分組 56只小鼠隨機(jī)分為7組，每組8只，雌雄各半。第1組：正常組，第2～7組為生半夏煎1 h水煎液低、中、高劑量組、生半夏煎2 h水煎液低、中、高劑量組。

1.4.2 給藥 各組給藥同生半夏鎮(zhèn)靜催眠實(shí)驗(yàn)給藥，1次/d，連續(xù)30 d。

1.4.3 觀察與檢測(cè)指標(biāo) 實(shí)驗(yàn)期間，每天觀察并記錄小鼠一般狀況和體質(zhì)量。第30 d灌胃后，禁食24 h，于第31 d摘眼球取血，在正常室溫下靜置30 min后，以3 000 r/min 20 min獲取血清，ELISA法檢測(cè)血清GPT、BUN含量。冰臺(tái)上取肝、腎、胃，4%甲醛固定后，常規(guī)石蠟包埋，切片，HE染色，普通光鏡下觀察。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 鎮(zhèn)靜催眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 對(duì)小鼠自主站立次數(shù)的影響 連續(xù)給藥7 d后，與正常組比較，生半夏煎1 h水煎液各劑量組、煎2 h高劑組和地西泮組小鼠自主站立次數(shù)顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01），其余各給藥組站立次數(shù)減少顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。與地西泮組比較，各給藥組小鼠自主站立次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

2.1.2 對(duì)協(xié)同閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期與睡眠持續(xù)時(shí)間的影響 連續(xù)給藥7 d后，與正常組比較，各給藥組睡眠潛伏期顯著縮短，睡眠持續(xù)時(shí)間顯著延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05或Plt;0.01）；與地西泮組比較，生半夏水煎液煎1 h及煎2 h各劑量組睡眠潛伏期及睡眠持續(xù)時(shí)間差異無(wú)顯著性。同劑量不同煎煮時(shí)間的各給藥組之間睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時(shí)間雖然差異無(wú)顯著性，但煎2 h的水煎液比煎1 h的同劑量組睡眠潛伏期減少趨勢(shì)、睡眠持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。煎煮1 h的各給藥組之間比較，以中劑量組睡眠潛伏期最短，睡眠持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)。各給藥組中，生半夏煎2 h水煎液中劑量組睡眠潛伏期最短，睡眠持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)。見(jiàn)表1。

2.2 急性毒性結(jié)果 給藥1 d后和連續(xù)14 d內(nèi)，小鼠的精神狀態(tài)、對(duì)外反應(yīng)、皮毛顏色與光澤、呼吸、活動(dòng)、進(jìn)食、飲水情況、分泌物、排泄物等均未發(fā)現(xiàn)異常變化，瞳孔正常、眼球無(wú)凸出、眼瞼無(wú)下垂。

給藥后小鼠沒(méi)有出現(xiàn)死亡。給藥前各組體質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。給藥7 d和13 d，生半夏煎2 h水煎液組體質(zhì)量顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），其余12 d則各組體質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)圖1。14 d后，將小鼠全部脫頸處死后即刻解剖，肉眼觀察各主要臟器，未見(jiàn)異常變化。

2.3 亞急性毒性結(jié)果

2.3.1 一般情況及體質(zhì)量 連續(xù)給藥30 d后，小鼠的活動(dòng)、進(jìn)食、飲水、排泄物、分泌物均未見(jiàn)異常。第3周時(shí)，與正常組比較，生半夏煎1 h水煎液中劑量組體質(zhì)量顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），生半夏煎1 h水煎液高劑量組、煎2 h中高劑量組體質(zhì)量降低明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01）。見(jiàn)圖2。

2.3.2 血清GPT、BUN含量檢測(cè) 連續(xù)給藥30 d后，與正常組比較，生半夏煎1 h水煎液與煎2 h中、高劑量組GPT含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01）；相同的煎煮時(shí)間各給藥組之間比較，GPT升高呈現(xiàn)劑量相關(guān)性，劑量愈大，GPT越高；相同劑量不同煎煮時(shí)間的各組之間比較，煎2 h中高劑量組升高更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01）。各給藥組BUN的含量降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.01）；煎2 h比煎1 h同劑量組BUN的降低更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05或Plt;0.01）；煎1 h中劑量組BUN相對(duì)其他給藥組數(shù)值更接近正常組。見(jiàn)表2。

2.3.3 肝、腎、胃病理形態(tài)學(xué)觀察 連續(xù)給藥30 d后，肝臟病理學(xué)檢查顯示，煎1 h水煎液低劑量組肝小葉結(jié)構(gòu)不清晰，部分肝細(xì)胞呈現(xiàn)疏松腫脹，細(xì)胞明顯水腫；部分肝細(xì)胞脂肪變性，體積增大，胞漿內(nèi)有較多中小型空泡，細(xì)胞核仍居中，有較多雙核肝細(xì)胞和滲出性炎細(xì)胞。生半夏煎1 h水煎液中劑量組肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，大部分肝細(xì)胞脂肪變性，細(xì)胞體積增大，細(xì)胞質(zhì)中有較多小空泡，細(xì)胞核仍在中央。生半夏煎1 h水煎液高劑量組肝小葉結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)，部分肝細(xì)胞脂肪變性，體積變大，胞漿內(nèi)小型空泡較多，雙核肝細(xì)胞較多。生半夏煎2 h水煎液各劑量組均可見(jiàn)大部分肝細(xì)胞脂肪變性而且體積增大，核仍居中；低劑量組和中劑量組的肝小葉結(jié)構(gòu)清楚可見(jiàn)，胞漿內(nèi)存在較多大小不等的空泡，肝細(xì)胞雙核和滲出性炎細(xì)胞；低劑量組個(gè)別肝細(xì)胞細(xì)胞核溶解消失；高劑量組肝小葉結(jié)構(gòu)不清，細(xì)胞質(zhì)有較多小空泡，部分肝細(xì)胞壞死，細(xì)胞核溶解消失。見(jiàn)圖3。

連續(xù)給藥30 d后，腎臟病理學(xué)檢查顯示，煎1 h水煎液低劑量組腎小管管腔變窄消失，管腔不規(guī)則，腎小管上皮細(xì)胞脂肪變性，體積增大，細(xì)胞質(zhì)中有較多大小不等空泡；煎1 h水煎液中劑量組少數(shù)腎小管上皮細(xì)胞呈現(xiàn)脂肪變性，體積增大，細(xì)胞質(zhì)中有多個(gè)大小不等的空泡，腎間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張和充血；煎1 h水煎液高劑量組未見(jiàn)明顯異常改變。煎2 h水煎液各劑量組均可見(jiàn)腎小管管腔變窄消失，管腔不規(guī)則；低劑量組與高劑量組均有較少腎小管上皮細(xì)胞體積變大，脂肪變性；中劑組與高劑組胞漿可見(jiàn)空泡多個(gè)且大小不等，腎間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張充血；低劑量組細(xì)胞質(zhì)中較多大小不等空泡；中劑量組則見(jiàn)到部分腎小管上皮細(xì)胞呈脂肪變性，體積增大。見(jiàn)圖4。

連續(xù)給藥30 d后，胃病理形態(tài)學(xué)未見(jiàn)異常改變，胃黏膜完整，胃黏膜腺管單柱狀，排列整齊，壁細(xì)胞與主細(xì)胞分界清晰，固有層胃腺排列緊密有序，無(wú)炎性細(xì)胞，黏膜下層無(wú)水腫。

3 討論

半夏辛溫有毒，乃天南星科植物半夏的塊莖入藥，始載于漢代《禮記·月令》：“五月半夏生，蓋當(dāng)夏之半也，故名。”半夏雖非傳統(tǒng)安神藥，但在古代文獻(xiàn)《古今醫(yī)鑒》《冷廬醫(yī)話》《識(shí)小錄》中均有半夏治療失眠記載，為諸多醫(yī)家喜用，實(shí)為治療失眠的高頻中藥［8-10］，在半夏炮制品中，尤以生半夏鎮(zhèn)靜催眠作用最佳［3］。雖半夏有毒，主要表現(xiàn)為刺激性，但始自醫(yī)圣張仲景，歷代醫(yī)家也不乏擅長(zhǎng)使用并主張使用生半夏者［11-14］，而且研究報(bào)道其刺激性可通過(guò)充分煎煮去除［4］。鑒于此，本文對(duì)半夏的鎮(zhèn)靜催眠作用、急性毒性和亞急性毒性進(jìn)行了研究。

藥物使用須達(dá)到一定劑量方能起效，至于半夏安神的有效劑量，自清朝名醫(yī)吳鞠通以來(lái)，就有“二兩安眠”之說(shuō)，我們的研究結(jié)果恰恰證實(shí)了這一結(jié)論的正確性。實(shí)驗(yàn)表明，生半夏水煎液中劑量9.01 g/kg鎮(zhèn)靜催眠效果最好，該劑量約合60 kg成人劑量為60 g，折合古代劑量即為二兩，該結(jié)果與文獻(xiàn)［15］較為一致。但與文獻(xiàn)報(bào)道不同的是，本結(jié)果表明，煎2 h與煎1 h同劑量組比較，睡眠潛伏期減少、睡眠持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，提示久煎具有一定增效的趨勢(shì)。

半夏安神效果較好，但畢竟有毒，《雷公炮炙論》有記載：“半夏，上有隙涎，令人氣逆，肝氣怒滿”。《本草新編》載：“半夏燥氣之藥，再耗腎中之氣，氣一耗，則火動(dòng)水燥，不生精而生痰，勢(shì)所必至，不特?zé)o益，反害之矣”。毒理學(xué)研究也表明半夏能導(dǎo)致機(jī)體主要靶器官毒性［16］，因此本文同時(shí)就其安全性進(jìn)行了研究。急性毒性研究采用1 d最大給藥量實(shí)驗(yàn)，按100 g/kg劑量灌胃小鼠給藥（約合60 kg成人劑量665.93 g/d），雖然給藥7 d、13 d，生半夏水煎液2 h組體質(zhì)量高于正常組，均有顯著性差異，但14 d體質(zhì)量并無(wú)差異。此外，小鼠一般狀況良好，肉眼沒(méi)有發(fā)現(xiàn)肝、腎、心、腦、肺、脾、胃、大小腸、膀胱等主要臟器有異常病理變化，因此認(rèn)為生半夏水煎液無(wú)急性毒性。雖然這不同于張麗美等［17］的報(bào)道，即小鼠單次灌胃62.5 g/kg生半夏水提組分4 h后，出現(xiàn)肝功能ALT、AST升高并持續(xù)48 h有所不同，但與陸永輝等［5］報(bào)道基本一致，沒(méi)有肝臟的急性損害。本文推測(cè)可能本實(shí)驗(yàn)劑量條件下生半夏造成的肝功能損害在短期內(nèi)有恢復(fù)，但仍需通過(guò)生化指標(biāo)及病理檢測(cè)加以驗(yàn)證。

鑒于半夏治療失眠往往需要長(zhǎng)期用藥和常用湯劑的事實(shí)，本實(shí)驗(yàn)還采用水煎劑，連續(xù)30天灌胃給藥，探討了生半夏的亞急性毒性，結(jié)果與靳曉琪等［18］提出的通常大劑量會(huì)導(dǎo)致肝損害一致，這也與嚴(yán)曉鶯等［19］連續(xù)10 d灌胃小鼠5 g/kg、25 g/kg生半夏水煎液引起的肝毒性結(jié)果相似。本實(shí)驗(yàn)中，低劑量（4.505 g/kg）、中劑量（9.01 g/kg）、高劑量（18.02 g/kg）約合60 kg成人30 g、60 g、90 g，均屬于大劑量用藥，超過(guò)了臨床正常劑量范圍，連續(xù)給藥30 d均顯示肝毒性。結(jié)果顯示生半夏煎1 h與煎2 h水煎液中、高劑量組GPT含量顯著升高，病理檢查可見(jiàn)脂肪變性、胞漿空泡、肝細(xì)胞雙核，提示具有肝毒性，此外，上述4組小鼠體質(zhì)量3周時(shí)也曾出現(xiàn)降低，本文認(rèn)為，它與肝損害也并非無(wú)關(guān)；相同煎煮時(shí)間的各給藥組之間比較，GPT升高呈現(xiàn)劑量相關(guān)性，劑量愈大，GPT越高，提示肝損害程度與劑量相關(guān)［20］；盡管低劑量組（4.505 g/kg，約合60 kg成人30 g）GPT沒(méi)有顯著升高，但病理檢查顯示脂肪變性、細(xì)胞水腫、細(xì)胞雙核及炎細(xì)胞的肝損害改變。相同劑量不同煎煮時(shí)間的各組之間比較，煎2 h比煎1 h中高劑量組GPT升高更明顯，差異極顯著，說(shuō)明久煎并未起到降低肝損害的作用。目前研究發(fā)現(xiàn)，半夏凝集素是肝毒性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，能激活核因子κB信號(hào)通路促進(jìn)炎癥介質(zhì)釋放導(dǎo)致炎癥；同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生大量活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）從而發(fā)生氧化應(yīng)激損傷導(dǎo)致肝毒性；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)則發(fā)現(xiàn)其機(jī)制可能與作用于DDX5、REL、YEHAG等靶點(diǎn)，Glypican途徑、蛋白聚糖辛聚糖介導(dǎo)的信號(hào)通路、胰島素途徑等有關(guān)，但需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證［15］。本實(shí)驗(yàn)中，長(zhǎng)期給藥30 d后，各劑量均有一定腎毒性，這與嚴(yán)曉鶯等［19］給藥10 d出現(xiàn)腎毒性的結(jié)果基本一致。各給藥組BUN含量降低，差異極顯著，病理檢測(cè)也顯示腎損害，腎小管管腔變窄甚至消失，腎小管上皮細(xì)胞呈現(xiàn)脂肪變性，胞漿空泡，腎間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張充血；而且煎2 h明顯低于煎1 h同劑量組，表明既使長(zhǎng)時(shí)間煎煮也不能降低腎損害；與其他給藥組比較，煎1 h中劑量組BUN值接近正常組，說(shuō)明煎1 h中劑量造成的腎損害相對(duì)較小。本實(shí)驗(yàn)胃組織病理檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)異常，認(rèn)為長(zhǎng)期應(yīng)用生半夏水煎液不會(huì)造成胃損傷。

綜上所述，各劑量生半夏（折合60 kg成人約30～120 g/d）均有安神作用，以中劑量效果最佳，約相當(dāng)于60 kg成人約60 g/d。生半夏水煎液無(wú)急性毒性。長(zhǎng)期用藥無(wú)胃損害，但存在肝腎毒性，肝損害程度與劑量呈相關(guān)性；中劑量造成的腎損害相對(duì)較小，久煎2 h未能起到降低肝腎損害的作用，因此認(rèn)為久煎1 h即可，久煎未能降低毒性則可能與半夏含有的水溶性耐熱毒性成分有關(guān)。因此，生半夏安神最佳劑量為60 g，煎煮1 h，不宜長(zhǎng)期用藥。

利益沖突聲明：無(wú)。

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