石菖蒲麩炒工藝研究

姚云峰 徐繼業 張秀婷

1.山東省淄博市中醫醫院，山東 淄博 255300；2.齊魯醫藥學院，山東 淄博 255300

石菖蒲為天南星科菖蒲屬植物石菖蒲(Acorustatarinowii)的干燥根莖，又名山菖蒲、藥菖蒲、菖蒲葉、水劍草等，氣芬芳，性味辛、苦，歸心、胃經，有開竅豁痰、醒神益智、化濕開胃等功效，可用于治療神昏癲癇、健忘失眠、耳鳴耳聾、脘痞不饑、噤口下痢等[1]。石菖蒲化學成分主要包括苯丙素類、萜類等揮發性成分和生物堿類、黃酮類、有機酸等非揮發性成分[2]。

石菖蒲作為醒神益智、豁痰開竅要藥，臨床用藥較為廣泛，文獻研究[3]發現石菖蒲在臨床上主要用于治療老年癡呆、痰厥、中風失語、癲癇等病。且在相關研究[4]統計中表明，在治療老年癡呆癥的中藥方劑中，石菖蒲的使用頻次最高。但目前對于石菖蒲的研究主要集中于揮發油類成分，該成分是石菖蒲化濕開胃的主要藥效成分[5-9]；有研究[10]表明石菖蒲中含有的生物堿成分菖蒲堿等具有改善記憶的作用，推測可能是醒神益智的主要藥效成分。但是目前對于其醒神益智藥效成分研究較少，存在臨床研究與科學基礎探究脫節現象。

麩炒作為石菖蒲常用炮制方法，在炮制后其燥性(用藥副作用)降低，揮發油含量發生變化[11]，但其炮制后的醒神益智功效研究未見報道，因此本實驗以醒神益智主要藥效成分總生物堿的含量變化為指標，進行麩炒石菖蒲工藝考察，以期闡述炮制前后石菖蒲的生物堿含量變化規律，并探究其最優炮制工藝。

1 儀器與材料

1.1 主要儀器 UV2550紫外分光光度計(日本島津有限公司)；HH-2數顯恒溫水浴鍋(常州普天儀器制造有限公司)；SHB-3A真空水泵(鄭州杜甫儀器廠)；MP-CJ32Wok503雙檔調溫炒鍋(廣東美的生活電器制造有限公司)；ND757分析天平(廣東藍德電子科技有限公司)。

1.2 試驗材料 天南星科植物石菖蒲的生品(甘肅康樂藥業有限公司)；麥麩(江西江中中藥飲片有限公司)；雷氏銨鹽(煙臺遠東精細化工有限公司)；95%無水乙醇(煙臺遠東精細化工有限公司)；丙酮(天津市科密歐化學試劑有限公司)。

2 方法與結果

2.1 總生物堿含量測定

2.1.1 雷氏銨鹽制備 精密稱取雷氏銨鹽2.000 g，用蒸餾水溶解并定容于100 mL容量瓶中，即可制備成2%的雷氏銨鹽溶液，做到現配現用。

2.1.2 供試品溶液的制備 取麥麩石菖蒲，粉碎過60目篩。稱取50.0 g，加入95%濃度的乙醇回流提取2次，合并提取液蒸發濃縮至浸膏狀。在濃縮物中加入0.1 moL/L 10 mL鹽酸溶解。過濾，用0.1 moL/L的鹽酸洗滌并定容至25 mL的容量瓶中。吸取定容溶液10 mL于錐形瓶中，加入0.1moL/L的鹽酸10 mL，在緩緩滴加新鮮配置的濃度為2%的雷氏銨鹽溶液10 mL，放置冰箱過夜，再布氏漏斗抽濾，沉淀用10 mL冰水分次洗滌至無色，抽干，所得沉淀用丙酮溶解再10 mL容量瓶中定容，得到總生物堿含量。

2.1.3 精密度試驗 取石菖蒲粉末30.0 g，按照上述方法平行測量吸光度6次，計算RSD值(RSD<5%)。具體結果見表1。

表1 精密度試驗

2.1.4 穩定性試驗 精密量取各供試品溶液放置，每隔1 h測定1次吸光度，連續6 h，計算RSD值(RSD<5%)。具體結果見表2。

表2 穩定性試驗

2.1.5 重復性試驗 取石菖蒲粉末6份，每份50.0 g，按照上述方法測量吸光度，計算RSD值(RSD<5%)。具體結果見表3。

表3 重復性試驗

2.1.6 總生物堿含量測定方法 本試驗采用雷氏銨鹽法進行沉淀濃縮，紫外可見分光光度法進行含量測定。即利用雷氏銨鹽在酸性介質中可與大部分生物堿類藥物定量地生成難溶于水的鉻合物。把生物堿的硫氰酸鉻銨鹽沉淀溶于丙酮中，所得的紫紅色溶液在波長510 nm處有最大吸收，可得到公式W=AMV/ε。石菖蒲中含量較多的菖蒲堿甲(C17H13NO3)的相對分子質量為279，ε=106.5，是硫氰酸鉻銨在丙酮中的摩爾分子吸收系數；V是溶解沉淀所取丙酮的毫升量；測其吸收度A，測可得到對應的含量W(mg)，故公式變為W=279VA/106.5。以此公式可測吸光度A，計算出石菖蒲總生物堿的含量。

2.2 麩炒石菖蒲炮制工藝研究

2.2.1 預實驗 以性狀為考察指標，預實驗考察溫度，炒制時間，麥麩用量，發現溫度200 ℃以上，時間60 s以上，石菖蒲飲片表面逐漸呈焦黃或焦黑色，內部顏色加深，呈碳化狀。總結單因素考察的溫度范圍應為120～180 ℃，炒制時間應低于60 s。

2.2.2 單因素考察

2.2.2.1 麩炒溫度考察 石菖蒲炮制品的制備：取4份生品，每份50 g，分別于120 ℃、140 ℃、160 ℃、180 ℃，各加入麥麩7.5 g，炒30 s，取出，放涼，篩去麥麩。測定總生物堿含量，確定麩炒溫度。見表4。

表4 麩炒溫度考察結果

麩炒溫度對生物堿含量的影響，由上表可知。在120～140 ℃之間，含量逐漸升高。到達140 ℃時為最值，若繼續提高溫度，含量則逐漸降低。因此140 ℃為最佳麩炒溫度。

2.2.2.2 麩炒時間考察 石菖蒲炮制品制備：取4份生品，每份50 g，各加入麥麩7.5 g，于140 ℃下分別炒20 s、30 s、40 s、50 s，取出，放涼，篩去麥麩。

表5 麩炒時間考察結果

麩炒時間對生物堿含量的影響，由上表可知。在20～30 s之間，含量逐漸升高。到達30 s時為最值，若繼續提高時間，因炒制時間提高，石菖蒲炮制品逐漸變為炒焦，測其含量變化，得到其含量會隨之降低。因此30 s為最佳麩炒時間。

2.2.2.3 麥麩用量考察 石菖蒲炮制品制備：取4份生品，每份50 g，分別加入麥麩5%、5%、15%、20%，于140 ℃炒30 s，取出，放涼，篩去麥麩。測定總生物堿含量，確定麥麩用量。見表6。

表6 麥麩用量考察結果

麥麩用量對生物堿含量的影響，由上表可知。在5%～15%之間，含量逐漸升高。到達7.5 g時為最值，若繼續增加麥麩用量，發現其生物堿含量并無特大變化。因此15%為最佳麥麩用量。

2.2.3 正交試驗 由單因素實驗結果可知，麥麩用量、麩炒溫度、麩炒時間對石菖蒲中生物堿的含量均有較大影響，故以麥麩用量、麩炒溫度、麩炒時間為考察因素，以總生物堿含量為指標進行正交試驗。其因素水平表見表7，正交實驗表見表8。

表7 試驗因素水平表

表8 麩炒石菖蒲正交試驗設計表

表8(續)

按照L9(34)正交表進行實驗，試驗方法如下。

1號樣品：麥麩用量10%，麩炒溫度120 ℃，麩炒時間20 s。

2號樣品：麥麩用量10%，麩炒溫度140 ℃，麩炒時間30 s。

3號樣品：麥麩用量10%，麩炒溫度160 ℃，麩炒時間40 s。

4號樣品：麩炒用量15%，麩炒溫度120 ℃，麩炒時間40 s。

5號樣品：麩炒用量15%，麩炒溫度140 ℃，麩炒時間30 s。

6號樣品：麩炒用量15%，麩炒溫度160 ℃，麩炒時間20 s。

7號樣品：麩炒用量20%，麩炒溫度120 ℃，麩炒時間40 s。

8號樣品：麩炒用量20%，麩炒溫度140 ℃，麩炒時間20 s。

按表安排制備樣品，稱取每份石菖蒲50 g，按試驗條件分別炒制，采用紅外非接觸測溫儀、秒表，依次控制輔料用量、麩炒溫度、麩炒時間，去麩，放涼，置密閉容器內備用。

從表7、表8結果可以得出：3個因素對試驗結果的影響程度為B>C>A，依次為麩炒溫度、麩炒時間、麥麩用量。本試驗結果表明，最優提取工藝應為 A1B2C3，即10%麥麩用量，麩炒溫度為140 ℃，麩炒時間應為40 s。

2.2.4 驗證試驗 從生品石菖蒲中各取3份，以上述最佳炮制工藝進行麩炒。對炮制品進行總生物堿含量測定。結果記錄見表9。

表9 麩炒石菖蒲新工藝驗證試驗結果

按照最佳炮制工藝進行實驗，測得麩炒石菖蒲中總生物堿含量6.448 mg、6.451 mg、6.449 mg。取平均值得出生物堿沉淀量為0.12 mg/g。具體炮制工藝圖如圖1。

圖1 石菖蒲麩炒炮制工藝流程圖

3 討論

石菖蒲飲片主要有生用、酒制、麩炒3種臨床常用規格，麩炒石菖蒲的炮制工藝研究較少。目前，《河南省中藥飲片炮制規范》2005年版中收載的石菖蒲的炮制方法為麩炒炮制[12]，其炮制過程參考藥典炮制通則。在2020版《中國藥典》中炮制通則中記載麩炒過程為先將炒制容器加熱，至撒入麩皮即刻煙起，隨即投入待炮炙品，迅速翻動，炒至表面呈黃色或深黃色時，取出，篩去麩皮，放涼(除另有規定外，每100 kg待炮炙品，用麩皮10～15 kg)。因此，本實驗在預實驗的基礎上，結合性狀與影響因素，在炮制過程中考察炒制溫度、時間及麥麩用量，優選麩炒工藝，將炮制工藝參數具體化，以提高麩炒石菖蒲的質量，確保臨床療效。

石菖蒲經過麩炒后生物堿含量增加，分析認為由于麥麩中主要成分為膳食纖維、植酸和酚酸等，推測可能在加熱過程中會促進石菖蒲中生物堿成分的溶出。同時有文章[13]報道通過對苦參不同炮制品中生物堿含量檢測，結果表明麩炒苦參后生物堿的含量增加。炮制可以增效、減毒、改變藥性、增加新成分、擴大藥用范圍等。通過對石菖蒲炮制前后生物堿含量變化與炮制工藝的探究，不僅為石菖蒲炮制品的質量標準研究提供了依據，還可為進一步闡述其炮制機理、臨床應用提供理論支撐。