桉木屑栽培毛木耳的食用安全性評(píng)價(jià)

羅陽蘭 王燦琴，* 韋嬌君 閻 勇 吳圣進(jìn) 韋仕巖 胡秀月

（1廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，廣西 南寧 530007；2田林縣經(jīng)濟(jì)作物試驗(yàn)站，廣西 百色 533300）

毛木耳（AuriculariacorneaEhrenb.），隸屬于擔(dān)子菌門（Basidiomycota）木耳屬（Auricularia），是一種高蛋白、低脂肪的珍稀菌類，屬食藥兩用性食用菌［1］，具有降血脂、抗凝血、抗腫瘤［2］、抗氧化［3］、抗突變和免疫調(diào)節(jié)［4］等多種生物學(xué)功能，富含多種蛋白質(zhì)、氨基酸、多糖［2］和黃酮［5］等營養(yǎng)物質(zhì)，也是我國廣西壯族自治區(qū)的地方特色小吃柳州螺螄粉的重要原料之一［6］。隨著螺螄粉和食用菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，成本的攀升制約著產(chǎn)業(yè)的良性運(yùn)轉(zhuǎn)。毛木耳的代料栽培基質(zhì)多以雜木屑、玉米芯和棉籽殼為主［5］。因此，如何為毛木耳尋求新型、廉價(jià)的食用菌栽培基質(zhì)成為研究熱點(diǎn)。

廣西的桉樹人工林面積以約200 萬畝居全國首位，年產(chǎn)桉樹木材2 000 萬m3以上［7］，其中，主要桉樹加工副產(chǎn)物——桉木屑及邊材約為300 萬t。長(zhǎng)期以來，桉樹加工副產(chǎn)物資源化利用程度低，除部分用于制漿造紙?jiān)稀⒅苯雍烷g接燃料外，相當(dāng)一部分直接被填埋或焚燒［8］，造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。近年來，大多數(shù)研究集中于探索桉木屑應(yīng)用于食用菌栽培的可能性［9］，及其對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度、生物轉(zhuǎn)化率和菌包污染率的影響［10］，而對(duì)桉木屑在食用菌栽培過程中的食用安全性評(píng)價(jià)鮮見報(bào)道。

本研究采用國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方法對(duì)桉木屑栽培毛木耳的常規(guī)營養(yǎng)成分和食用安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，探究桉木屑栽培基質(zhì)對(duì)毛木耳常規(guī)營養(yǎng)成分和食用安全性的影響，以期為桉木屑應(yīng)用于食用菌栽培提供理論基礎(chǔ)，并促進(jìn)桉樹產(chǎn)業(yè)和食用菌產(chǎn)業(yè)共同健康、快速、可持續(xù)性發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

桉木屑栽培的毛木耳子實(shí)體由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所提供。毛木耳子實(shí)體經(jīng)50 ℃恒溫烘干后，用中藥粉碎機(jī)粉碎，過60目篩備用。

急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)動(dòng)物來源于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，無特定病原體（specific pathogen free，SPF）級(jí)BalB/c小鼠、32只+2只檢疫、雌雄各半、6周齡，雄性小鼠最初體重范圍為23.9～26.1 g，雌性小鼠最初體重范圍為20.9～23.2 g。常規(guī)小鼠飼料種類為普通飼料，北京華阜康生物科技股份有限公司，飼養(yǎng)環(huán)境為溫度22～26 ℃，相對(duì)濕度50%～60%，人工光照明暗各12 h。動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK（鄂）2018-0104，動(dòng)物合格證號(hào)：No.430727221101113026。

長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)動(dòng)物來源于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，SPF級(jí)BalB/c小鼠，雌雄各半、50只+2只檢疫、6 周齡，雄性小鼠最初體重范圍為19.1～20.0 g，雌性小鼠最初體重范圍為17.5～18.5 g。常規(guī)小鼠飼料種類為普通飼料，北京華阜康生物科技股份有限公司，飼養(yǎng)環(huán)境為溫度22～26 ℃，相對(duì)濕度50%～60%，人工光照明暗各12 h。試驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（鄂）2018-0104，動(dòng)物合格證號(hào)：No.430727221101442123、No.430727221101442273。

二甲苯、無水乙醇、碳酸鋰、冰醋酸，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑上海有限公司；伊紅、中性樹脂，北京索萊寶科技有限公司；蘇木素，武漢賽維爾生物科技有限公司；戊巴比妥鈉（批號(hào)：P3761），美國Sigma公司。

1.2 儀器與設(shè)備

GC2010plus 氣相色譜儀、AA-6880 原子吸收分光光度計(jì)，日本島津儀器有限公司；1260 高效液相色譜，美國安捷倫科技有限公司；FP640 火焰分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；OLB9870A 全自動(dòng)定氮儀，濟(jì)南歐萊博技術(shù)有限公司；T6 紫外可見分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；WA1020 顯微剪、WA3040 顯微鑷、DM1000 正置顯微鏡、RM2235 石蠟切片機(jī)、Leica Application Suite 圖象系統(tǒng)，德國徠卡顯微系統(tǒng)有限公司；DHG-9023A 恒溫烘箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；TKD-TK攤片烤片機(jī)、TKD-TSF自動(dòng)組織脫水機(jī)，湖北康強(qiáng)醫(yī)療器械有限公司；TB-718L 生物組織包埋機(jī)-冷凍機(jī)、TB-718D 生物組織包埋機(jī)，湖北泰維科技實(shí)業(yè)股份有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 常規(guī)營養(yǎng)成分測(cè)定 水分含量按照GB 5009.3-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定》［11］測(cè)定，蛋白質(zhì)含量按照GB 5009.5-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》［12］測(cè)定，脂肪含量按照GB 5009.6-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》［13］測(cè)定，可溶性糖含量按照NY/T 1278-2007《蔬菜及其制品中可溶性糖的測(cè)定 銅還原碘量法》［14］測(cè)定，粗纖維含量按照GB/T 5009.10-2003《植物類食品中粗纖維的測(cè)定》［15］測(cè)定，粗灰分含量按照LY/T 1268-1999《森林植物與森林枯枝落葉層粗灰分的測(cè)定》［16］測(cè)定。

1.3.2 安全性評(píng)價(jià)指標(biāo)

1.3.2.1 重金屬含量測(cè)定 鉛含量按照GB 5009.12-2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉛的測(cè)定》［17］測(cè)定，鎘含量按照GB 5009.15-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鎘的測(cè)定》［18］測(cè)定，汞含量按照GB 5009.17-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定》［19］測(cè)定，砷含量按照GB 5009.11-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》［20］測(cè)定，鉻含量按照GB 5009.123-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉻的測(cè)定》［21］測(cè)定，錫含量按照GB 5009.16-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中錫的測(cè)定》［22］測(cè)定，鎳含量按照GB 5009.138-2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鎳的測(cè)定》［23］測(cè)定。

1.3.2.2 農(nóng)藥殘留含量測(cè)定 百菌清、三唑酮、異菌脲、聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、高效氟氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯、敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、樂果、敵百蟲、滅線磷、毒死蜱、馬拉硫磷、水胺硫磷、三唑磷含量均按照NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》［24］測(cè)定；吡蟲啉含量按照GB/T 23379-2009《水果、蔬菜及茶葉中吡蟲啉殘留的測(cè)定高效液相色譜法》［25］測(cè)定。

1.3.2.3 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) 急性經(jīng)口毒性以經(jīng)口半數(shù)致死量（median lethal dose，LD50）表示，試驗(yàn)依照GB 15193.3-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)》［26］，同時(shí)結(jié)合毛木耳粉末溶解度進(jìn)行。小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d 后，將動(dòng)物根據(jù)體重平均分為4 組，每組小鼠8 只，雌雄各半。分為對(duì)照組（灌胃給予等量生理鹽水）；試驗(yàn)組（低劑量組、中劑量組和高劑量組）每日灌胃20 mL·kg-1BW 溶解于生理鹽水的毛木耳溶液，灌胃劑量分別為0.50、1.00和2.00 g·kg-1BW，連續(xù)灌胃7 d。灌胃7 d 后，BALB/c 小鼠采用眼眶取血，將全血分為兩份，一份直接轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱保存，一份室溫自然凝固10 min 后1 295×g離心分離血清，于-80 ℃冰箱保存。每只動(dòng)物的心、肝、脾、腎臟組織分為兩份，一份取下后立即放入冰盒，取材完畢后轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱暫存，另一份浸泡在4%多聚甲醛中進(jìn)行固定，準(zhǔn)確稱量各臟器重量，計(jì)算小鼠臟器指數(shù)。

1.3.2.4 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn) 試驗(yàn)選用6 周齡SPF 級(jí)BalB/c小鼠50只+2只檢疫，雌雄各半，飼養(yǎng)環(huán)境為溫度22～26 ℃，相對(duì)濕度50%～60%，人工光照明暗各12 h。試驗(yàn)分為對(duì)照組（灌胃給予等量生理鹽水）；試驗(yàn)組（劑量1組、劑量2組、劑量3組和劑量4組），灌胃劑量分別為0.50、1.00、1.58 和2.00 g·kg-1BW，每日1 次，連續(xù)8周。小鼠采用1%戊巴比妥鈉40 mg·kg-1腹腔注射麻醉，采血測(cè)定血液學(xué)、血清生化學(xué)指標(biāo)。迅速收集心、肝、脾、腎并準(zhǔn)確稱量各臟器重量，計(jì)算小鼠臟器指數(shù)，肉眼觀察后放入10%甲醛中性緩沖液中固定，石蠟切片、蘇木素-伊紅（hematoxylin and eosin，HE）染色、200倍光學(xué)顯微鏡下觀察各臟器的組織學(xué)變化，使用Leica Application Suite 圖象系統(tǒng)采集樣本心、肝、脾、腎各臟器圖片。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)處理和分析，用Duncan 多重比較檢驗(yàn)各處理平均值之間的差異顯著性，以P＜0.05或P＜0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有數(shù)據(jù)采用3次平行試驗(yàn)的平均值作為最后結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 常規(guī)營養(yǎng)成分含量

營養(yǎng)成分含量檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，桉木屑毛木耳的水分92.31%、蛋白質(zhì)12.82%、粗脂肪0.90%、可溶性糖3.78%、粗纖維13.00%、粗灰分8.30%，而常規(guī)基質(zhì)雜木屑毛木耳的水分91.54%、蛋白質(zhì)8.90%、粗脂肪1.72%、可溶性糖2.61%、粗纖維16.4%、粗灰分6.22%。因此，與常規(guī)基質(zhì)雜木屑毛木耳的營養(yǎng)成分相比，利用桉木屑栽培的毛木耳粗蛋白、可溶性糖和粗灰分含量較高，而粗脂肪、粗纖維含量則較低。

2.2 安全性評(píng)價(jià)指標(biāo)含量

2.2.1 重金屬含量 桉木屑毛木耳的重金屬含量見表1。桉木屑毛木耳的主要重金屬含量均符合食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2762-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》［27］。因此，桉木屑毛木耳的重金屬含量處于安全范圍。

表1 桉木屑毛木耳的重金屬含量Table 1 The heavy metal content in Auricularia cornea Ehrenb.planted with eucalyptus sawdust/（mg·kg-1）

2.2.2 農(nóng)藥殘留含量 根據(jù)國家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)常用大宗農(nóng)藥品種百菌清、三唑酮和異菌脲等21 種農(nóng)藥殘留在桉木屑毛木耳中的含量進(jìn)行檢測(cè)。如表2所示，上述農(nóng)藥在桉木屑毛木耳中均未檢出，即不存在農(nóng)藥殘留，表明桉木屑毛木耳生產(chǎn)過程中，栽培原料和栽培環(huán)境均未使用上述農(nóng)藥，生產(chǎn)過程綠色、安全。

表2 桉木屑毛木耳的農(nóng)藥殘留含量Table 2 The pesticide residu content in Auricularia cornea Ehrenb.planted with eucalyptus sawdust /（mg·kg-1）

2.2.3 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果 試驗(yàn)選用小鼠32只+2

只檢疫，檢疫小鼠通過糞便蟲卵確定動(dòng)物無蛔蟲、繞蟲、條蟲、鉤蟲或其他腸道寄生蟲，通過膠帶沾取觀察確定無螨蟲、跳蚤或其他皮膚寄生蟲，通過血液聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）檢測(cè)確定不攜帶鼠痘病毒、沙門氏菌病毒、流行性出血熱病毒、狂犬病病毒、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒及其他病原微生物。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)中限量法測(cè)定桉木屑毛木耳急性經(jīng)口毒性（LD50），試驗(yàn)結(jié)果見表3和表4。

表3 桉木屑毛木耳急性經(jīng)口毒性（LD50）試驗(yàn)結(jié)果Table 3 The results of acute oral toxicity test of Auricularia cornea Ehrenb.planted with eucalyptus sawdust

表4 小鼠臟器指數(shù)Table 4 Organ index of mice

給樣后各劑量組小鼠未見有中毒反應(yīng)，飲食活動(dòng)正常，觀察期內(nèi)試驗(yàn)動(dòng)物無死亡，由表3 可知，各劑量組雄性小鼠和雌性小鼠7 d 后的體重與對(duì)照組具有顯著差異（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)果表明，雌、雄性小鼠經(jīng)口LD50＞2.00 g·kg-1BW，已達(dá)受試小鼠最大劑量（最大使用濃度和最大灌胃體積），說明桉木屑毛木耳屬無毒級(jí)食品。各組小鼠的心、肝、脾和腎器官外觀正常，未見異常變化，由表4 可知，試驗(yàn)中各劑量組雄性小鼠和雌性小鼠的心、肝和腎臟器指數(shù)，以及雄性小鼠脾臟臟器指數(shù)與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05），各劑量組雌性小鼠的脾臟臟器指數(shù)與對(duì)照組相比整體差異顯著（P＜0.05），但無劑量相關(guān)性，表明并非給藥引起的差異。根據(jù)文獻(xiàn)［28］可知，正常小鼠的理論脾臟重量為體重的0.38%，本試驗(yàn)對(duì)照組小鼠實(shí)際脾臟重量為77.14 mg，小于理論脾臟重量101.08 mg。各劑量組雌性小鼠的脾臟重量為73.33～90.30 mg，小于對(duì)照組小鼠的理論脾臟重量101.08 mg，表明雖然各劑量組雌性小鼠的脾臟臟器指數(shù)與對(duì)照組相比差異顯著，但并未引起脾臟重量的異常增加，即未表現(xiàn)出毒性。

2.2.4 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果

2.2.4.1 對(duì)動(dòng)物臨床癥狀的影響 試驗(yàn)選用小鼠50 只+2 只檢疫，飼喂桉木屑毛木耳樣品共8 周，觀察到小鼠進(jìn)食、進(jìn)水、活動(dòng)、毛色、軀體運(yùn)動(dòng)、體溫等一切正常，未出現(xiàn)不良反應(yīng)或死亡現(xiàn)象。

2.2.4.2 對(duì)動(dòng)物體重和攝食量的影響 與對(duì)照組相比，各劑量組小鼠體重結(jié)果見表5，部分劑量組和對(duì)照組的小鼠體重存在顯著差異（P＜0.05），劑量組中的雌性動(dòng)物和雄性動(dòng)物體重均小于生理鹽水對(duì)照組。飼喂期間小鼠攝食量均低于空白對(duì)照組，且差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表5 桉木屑毛木耳長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果Table 5 The results of long term toxicity test of Auricularia cornea Ehrenb.planted with eucalyptus sawdust

2.2.4.3 對(duì)動(dòng)物臟器重量和臟器指數(shù)的影響 由表6可知，飼喂桉木屑毛木耳后，除雌性小鼠0.50 g·kg-1BW劑量組與對(duì)照組的脾臟臟器指數(shù)有顯著差異（P＜0.05）外，其余各劑量組雌性和雄性小鼠心、肝和腎的臟器指數(shù)，以及雄性脾的臟器指數(shù)與對(duì)照組均無顯著差異（P＞0.05）。

表6 小鼠臟器指數(shù)Table 6 Organ index of mice

2.2.4.4 對(duì)小鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響 飼喂8 周后，分別對(duì)小鼠白細(xì)胞（white blood cell，WBC）、紅細(xì)胞（red blood cell，RBC）、血紅蛋白（hemoglobin，HGB）、紅細(xì)胞壓積（hematocrit，HCT）、紅細(xì)胞平均體積（mean corpuscular volume，MCV）、平均血紅蛋白量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、平均血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）、血小板（platelet，PLT）、中性粒細(xì)胞（neutrophil，NEU）、淋巴細(xì)胞（lymphocyte，LYM）、單核細(xì)胞（monocytes，MON）、嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil，EOS）、嗜堿性粒細(xì)胞（basophil，BAS）進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表7。雄性小鼠劑量組的MCV 和BAS 與對(duì)照組相比無顯著差異（P＞0.05），其余指標(biāo)部分劑量下有顯著差異（P＜0.05）；雌性小鼠各項(xiàng)指標(biāo)部分劑量下有顯著差異（P＜0.05），但無劑量相關(guān)性。

表7 對(duì)小鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響Table 7 Effect on blood routine indexes of mice

2.2.4.5 對(duì)小鼠血清生化指標(biāo)的影響 飼喂8 周后，各劑量組中雄性（圖2）和雌性（圖3）的甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL）濃度與對(duì)照組相比在部分劑量下有顯著差異（P＜0.05），但無劑量相關(guān)性。

圖2 雄性小鼠血清生化指標(biāo)Fig.2 Serum biochemical indexes of mal e

圖3 雌性小鼠血清生化指標(biāo)Fig.3 Serum biochemical indexes of female

2.2.4.6 解剖及病理組織學(xué)檢查 飼喂8 周后，進(jìn)行解剖，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、生殖系統(tǒng)、胃腸道等各臟器或組織大小、形態(tài)、顏色、質(zhì)地均未見異常病變。圖4 顯微鏡結(jié)果表明，各組織均無異常病變，肝組織結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞無空泡變性，組織內(nèi)未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤；脾組織結(jié)構(gòu)正常，紅髓及白髓結(jié)構(gòu)清晰；腎組織結(jié)構(gòu)正常，腎小管結(jié)構(gòu)清晰，未見異常；心組織結(jié)構(gòu)正常，未出現(xiàn)炎癥細(xì)胞浸潤。

圖4 主要臟器組織病理切片F(xiàn)ig.4 Pathological sections of main organs

3 討論

栽培條件是影響食用菌風(fēng)味成分產(chǎn)生的重要因素之一［10］，而營養(yǎng)物質(zhì)的含量水平是影響食用菌品質(zhì)的重要因素［29］。本研究顯示，與雜木屑毛木耳的營養(yǎng)成分相比，桉木屑毛木耳的粗蛋白、可溶性糖和粗灰分含量較高，而粗脂肪、粗纖維含量則較低。李阿池等［30］研究發(fā)現(xiàn)，桉木屑栽培毛木耳的營養(yǎng)成分含量均高于油桐木，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。不同栽培基質(zhì)會(huì)對(duì)食用菌子實(shí)體產(chǎn)量、基本營養(yǎng)成分、酶活性以及次級(jí)代謝產(chǎn)物等產(chǎn)生較大影響［31］。陳麗新等［32］發(fā)現(xiàn)，桉樹屑栽培平菇的水含量、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總糖含量均高于棉籽殼栽培平菇。本研究發(fā)現(xiàn)，桉木屑栽培毛木耳的粗蛋白、可溶性糖和粗灰分含量較高，可見，桉木屑栽培具有提高毛木耳蛋白和多糖等營養(yǎng)物質(zhì)含量水平，進(jìn)而提高其風(fēng)味和品質(zhì)的潛力。

隨著人工栽培食用菌的農(nóng)藥殘留問題逐漸顯露，農(nóng)藥殘留過量成為我國食用菌產(chǎn)業(yè)比較集中的問題［33］。本研究發(fā)現(xiàn)，桉木屑毛木耳中未檢出常用大宗農(nóng)藥品種百菌清、三唑酮和異菌脲等21 種農(nóng)藥，即不存在農(nóng)藥殘留問題。食用菌對(duì)重金屬的吸收和富集能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于普通作物［34］。重金屬進(jìn)入人體蓄積后可能帶來系統(tǒng)性的健康隱患，因此重金屬污染評(píng)價(jià)是食用菌食品安全評(píng)價(jià)研究中不可缺少的部分，預(yù)防和控制重金屬污染是食品安全風(fēng)險(xiǎn)管理的關(guān)鍵點(diǎn)［35］。劉春麗等［10］發(fā)現(xiàn)，桉木屑栽培黑木耳金屬含量及氨基酸含量與雜木屑無明顯差異，各成分指標(biāo)均符合黑木耳國家標(biāo)準(zhǔn)及國家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量的要求，表明桉樹栽培黑木耳可行。本研究結(jié)果同樣表明，利用桉木屑栽培的毛木耳子實(shí)體中的鉛、鎘、砷等多種常見重金屬含量均未超出國家標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)一步表明利用桉木屑栽培的毛木耳符合國家安全標(biāo)準(zhǔn)。

急性毒性試驗(yàn)作為檢測(cè)和評(píng)價(jià)受試物毒性作用最基礎(chǔ)的試驗(yàn)，是毒理學(xué)評(píng)價(jià)中的第一階段，通過記錄試驗(yàn)動(dòng)物的中毒體征和死亡情況，可為毒理學(xué)研究提供劑量依據(jù)和相關(guān)觀察指標(biāo)基礎(chǔ)［36］。付珂等［37］發(fā)現(xiàn)，西藏黑木耳的急性毒性試驗(yàn)中，對(duì)小鼠的最大給藥量為12.14 g·kg-1BW，此劑量下未見動(dòng)物死亡、中毒癥狀和肉眼可見的臟器異常，體重和飼料消耗量無明顯變化，表明西藏黑木耳的安全性良好。本研究急性毒性試驗(yàn)中的心、肝、脾、腎等指標(biāo)基本未出現(xiàn)與受試物相關(guān)的明顯改變，急性經(jīng)口LD50＞2.00 g·kg-1BW，高于最大劑量，屬無毒級(jí)食品。與付珂等［37］一次性給藥12.14 g·kg-1BW 不同，本試驗(yàn)高劑量組采用每次給藥2.00 g·kg-1BW，連續(xù)給藥7 d期間不喂食飼料的試驗(yàn)方案，主要是由于所用毛木耳的最大劑量只有2.00 g·kg-1BW，這可能是導(dǎo)致給藥組小鼠體重總體均低于對(duì)照組的原因。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中，對(duì)照組與劑量組均未見明顯的毒性反應(yīng)。劑量組的參數(shù)指標(biāo)與對(duì)照組相比存在一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但無劑量相關(guān)性，分析應(yīng)非樣品本身的毒性所致，不具有毒理學(xué)意義。心臟、腎臟、肝臟及脾臟均為動(dòng)物機(jī)體主要的器官，其中腎臟和肝臟是毒性作用的主要靶器官［38］，本研究長(zhǎng)期毒性結(jié)果顯示，通過剖檢和組織學(xué)觀察主要內(nèi)臟器官的形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)均未發(fā)現(xiàn)異常變化，即未發(fā)現(xiàn)桉木屑毛木耳子實(shí)體存在明顯的長(zhǎng)期毒性。試驗(yàn)結(jié)果表明，桉木屑毛木耳子實(shí)體具有較高的食用安全性。但是，一方面，由于毛木耳含大量膠質(zhì)性成分，吸水膨脹度大（吸脹后體積可膨脹10倍左右）；另一方面，由于人對(duì)毛木耳的攝入量較大，造成了動(dòng)物給藥劑量不能增加，相對(duì)于人常規(guī)食用量倍數(shù)難以進(jìn)一步擴(kuò)大，從而使其毒性不能充分暴露［39］。因此，后續(xù)試驗(yàn)應(yīng)改進(jìn)加工方式，提高給藥量以充分研究其安全性。此外，毛木耳在生產(chǎn)栽培過程中應(yīng)加強(qiáng)微生物污染（如椰毒假單胞菌）的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，同時(shí)在食用過程中若長(zhǎng)時(shí)間（2 d以上）浸泡易滋生其他病原菌，有造成食物中毒的風(fēng)險(xiǎn)［40］。

4 結(jié)論

本研究采用國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方法對(duì)桉木屑栽培毛木耳的常規(guī)營養(yǎng)成分和食用安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)桉木屑毛木耳粗蛋白、可溶性糖和粗灰分含量高于雜木屑毛木耳；重金屬元素鉛、鎘、汞、砷、鉻、錫和鎳含量均低于國家標(biāo)準(zhǔn)中的限量要求，且不存在農(nóng)藥殘留情況；急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)證明，小鼠經(jīng)口LD50＞2.00 g·kg-1BW，桉木屑毛木耳為無毒級(jí)食品；長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組小鼠體重、攝食量、臟器指標(biāo)、血液學(xué)指標(biāo)、血清生化學(xué)指標(biāo)和主要臟器病理學(xué)檢查均無明顯異常。綜上，桉木屑用于栽培毛木耳的食用安全性較高。